牛副結(jié)核病的診斷與防控

劉國華/河南省駐馬店市上蔡縣農(nóng)業(yè)行政綜合執(zhí)法大隊(duì) 463800

副結(jié)核病是一種傳染性、慢性、進(jìn)行性肉芽腫感染疾病，主要影響小腸和其他臟器。副結(jié)核病由禽分枝桿菌副結(jié)核亞種（mycobacterium avium subsp.paratuberculosis，MAP）感染引起的、該病最早的報道見于1895年。MAP 主要感染牛、綿羊和山羊，但也有報道馬、鹿、駱駝、羊駝、豬、兔、鼬、獾、狐感染MAP。流行病學(xué)調(diào)查數(shù)據(jù)顯示，國內(nèi)反芻動物能感染野生動物，以及野生動物可能是家畜副結(jié)核病感染的宿主。

副結(jié)核病主要引起的腸道炎癥和功能障礙，剖檢病變主要為腸壁增厚和水腫。腸系膜淋巴結(jié)有時也可出現(xiàn)腫脹和水腫，其他器官，如肝臟也可出現(xiàn)病變。腸道病變會影響營養(yǎng)和蛋白質(zhì)的吸收，導(dǎo)致肌肉萎縮和生產(chǎn)能力降低。動物感染后MAP 后還可會出現(xiàn)腹瀉、下頜水腫、食欲正常但體重減輕、營養(yǎng)不良、貧血、消瘦、嗜睡和死亡。副結(jié)核病的出現(xiàn)給牛養(yǎng)殖業(yè)造成了重大的經(jīng)濟(jì)損失，這主要是由于牛過早淘汰、動物更換導(dǎo)致養(yǎng)殖成本增加、產(chǎn)奶量下降、飼料轉(zhuǎn)化效率降低、生育性能降低、屠宰價值降低以及對其他疾病的易感性增加。大多數(shù)受感染的動物在2～6 歲之間可表現(xiàn)出臨床疾病，盡管出現(xiàn)臨床的年齡從4 個月到15 歲不等。MAP 傳播的主要途徑是糞口傳播，但也提出了其他感染途徑，如子宮內(nèi)傳播和氣溶膠傳播。已在飼養(yǎng)受感染牛的養(yǎng)牛設(shè)施的灰塵中檢測到MAP，這表明MAP 的氣溶膠傳播是可能的。此外，已從器官、支氣管淋巴結(jié)中分離出MAP，這同樣支持氣溶膠傳播的假設(shè)。此外，對感染副結(jié)核病奶牛沒有有效的治療方法。

動物可在出生后的前6 個月內(nèi)感染MAP，新生兒特別容易受到感染，并且子宮內(nèi)感染也是可能存在的。已觀察到隨著年齡的增加，動物對MAP感染的抵抗力增加。牛可能需要幾年的時間才能表現(xiàn)出臨床癥狀，亞臨床感染也會硬性動物健康、生成性能和養(yǎng)殖場的盈利。此外，處于亞臨床階段的動物可能會排出不同數(shù)量的MAP，通常是低水平或中水平脫落，但也可能出現(xiàn)將是百萬或數(shù)十億MAP 排泄到環(huán)境中的超級脫落情況。

受感染的公牛可以在糞便和精液中排出MAP。受感染的奶牛可能在糞便和牛奶中排出MAP。大量排泄物有可能是初乳中的MAP 脫落。幼畜感染MAP 可通過子宮內(nèi)傳播或攝入被污染的初乳或牛奶，但糞口傳播是主要的傳播途徑。MAP 在生奶中也可檢測到，因此可以通過牛奶傳播給給人類，并且MAP 可能無法通過巴氏消毒法有效滅活。副結(jié)核病主要影響反芻動物，但反芻動物副結(jié)核病與人類克羅爾氏病之間的潛在關(guān)系仍是有爭議的論點(diǎn)。盡管沒有明確的針具證明MAP 會導(dǎo)致或促成人類的克羅恩病，但在克羅恩病患者中經(jīng)常檢測到MAP。需要闡明反芻動物副結(jié)核病和人克羅恩病之間的潛在關(guān)系，但人類食用的巴氏消毒后的牛奶中可存活有MAP，這措施公共衛(wèi)生機(jī)構(gòu)和組織建議防止MAP 進(jìn)入食品。MAP 存在潛在的人畜共患風(fēng)險、對動物健康和福利的影響以及對牛養(yǎng)殖業(yè)造成的巨大經(jīng)濟(jì)損失使得許多國家實(shí)施了副結(jié)核病的控制計(jì)劃。

1 副結(jié)核病的診斷

最常用于檢測感染動物、估計(jì)流行率和疾病控制計(jì)劃的檢測方法是糞便培養(yǎng)、血清ELISA 和牛奶ELISA。糞便的PCR 檢測也可用于驗(yàn)證性檢測。MAP 的糞便培養(yǎng)被認(rèn)為是參考檢測方法。MAP 的流行率在部分情況下受檢測方法的影響。一般來說，糞便培養(yǎng)和PCR 檢測的敏感性要優(yōu)于ELISA，并可用于識別MAP 感染的牛。但用于副結(jié)核病的各種檢測和診斷方法的特異性和敏感性的可能會出現(xiàn)變化。可從環(huán)境中殘疾樣品來檢測畜群中MAP 的存在，也如可以從奶牛的擠奶室、圍欄和糞便。

診斷和檢測方法在正確識別受感染和無病動物方面起著至關(guān)重要的作用，是作為實(shí)行控制策略和疾病管理計(jì)劃的基礎(chǔ)。正確識別牛的感染狀態(tài)也取決于檢測方法，對于各感染階段來說，有臨床癥狀的牛更容易被發(fā)現(xiàn)。這也解釋了為什么副結(jié)核診斷和檢測中處于亞臨床階段的整體敏感性低。

當(dāng)診斷和檢測的敏感性較低時，可能會降低MAP 患病率從而導(dǎo)致假陰性結(jié)果。另一方面，由于可能存在于其他分支桿菌的交叉反應(yīng)從而獲得假陽性結(jié)果。由于診斷檢測方法的局限性，可能難以獲得真正的MAP 的患病率預(yù)估值，但科學(xué)合理的研究設(shè)計(jì)可能有助于克服該問題。

2 牛副結(jié)核病的流行病學(xué)

MAP 對干燥、酸性條件和紫外線輻射具有一定的抵抗力。此外，MAP具有一定的耐熱性，這使得加熱牛奶對MAP 滅活效果可能欠佳。高溫短時間的巴氏消毒法似乎不會使所有MAP 滅活。此外,MAP 可在土壤中存活長達(dá)47 個月，在水環(huán)境中存活48 周，因此被污染的土壤和水可能是重要的感染源。MAP 在糞便中存活可長達(dá)55 周，這被認(rèn)為是一種重大的生物安全風(fēng)險。新引進(jìn)的動物存在相當(dāng)大的生物安全風(fēng)險，并且與副結(jié)核病的血清陽性率增加可能有關(guān)。線蟲等寄生蟲也可以作為MAP 傳播的載體。

多種因素將影響副結(jié)核病在牛群中的流行、維持、傳播和感染。以發(fā)現(xiàn)動物的年齡是檢測出副結(jié)核病的重要因素，大多數(shù)陽性動物年齡在4 歲以上。畜群規(guī)模以確定為副結(jié)核病傳播和流行的重要因素。在大牛群中和新牛群中的牛感染風(fēng)險更高，更有可能檢測出副結(jié)核病。已報道與小牛更多接觸受MAP 污染的糞便相關(guān)的幾個風(fēng)險因素，如與成年感染奶牛的密切接觸以及圍產(chǎn)期奶牛和斷奶小牛的集體飼養(yǎng)。被MAP 污染的乳房和產(chǎn)房糞便可能是新生犢牛感染的主要因素。此外，MAP 陽性的奶牛的初乳中也可存在MAP，副結(jié)核病與較大的牛群的關(guān)聯(lián)可通過是由于牛群動物數(shù)量減少和重新放養(yǎng)的方法緩解，特別是在為控制副結(jié)核病而移除動物。犢牛被認(rèn)為具有更大的感染風(fēng)險，尤其是剛出生的前24h 內(nèi)，因此應(yīng)考慮管理措施已較少新生犢牛接觸MAP。將小牛飼養(yǎng)在遠(yuǎn)離MAP 感染的成年母牛的地方可能對小牛感染MAP 具有保護(hù)作用。

3 牛副結(jié)核病的防控策略現(xiàn)狀

目前各國提出的防控措施都是基于MAP 檢測和淘汰方案相結(jié)合。有研究人員建議使用糞便培養(yǎng)進(jìn)行檢測和淘汰策略比使用ELISA 更有效，并且經(jīng)ELISA 檢測為陽性的結(jié)果仍需通過糞便培養(yǎng)確定，除非ELISA 檢測方法的特異性非常高。最有效的副結(jié)核病的控制策略是基于生物安全措施和重復(fù)檢測。有針對性的抽樣檢測被建議是一種有效的畜群篩查方法。養(yǎng)殖場管理措施，如適當(dāng)管理動物糞便和改進(jìn)小牛的管理方法應(yīng)被包含于副結(jié)核病的控制計(jì)劃中。如果將副結(jié)核病的控制納入畜群健康管理計(jì)劃中以控制多種疾病，可能增加養(yǎng)殖成本。

在許多國家實(shí)行的自愿性副結(jié)核病控制計(jì)劃基于不同的目標(biāo)、控制策略和不同的接受度。大多數(shù)控制程序基于與風(fēng)險管理相結(jié)合的檢測和淘汰策略。但由于成本高、計(jì)劃持續(xù)時間長、工作量大以及成功預(yù)期有限，因此養(yǎng)殖場參與此類計(jì)劃的意愿可能受到限制。然而，雖然生產(chǎn)者通常對疾病控制計(jì)劃的參與度不高，但在許多情況下的結(jié)果表明，通過有效的實(shí)行副結(jié)核病控制計(jì)劃可節(jié)省大量的時間和財(cái)力。有效的宣傳與實(shí)行副結(jié)核病控制計(jì)劃的相關(guān)優(yōu)點(diǎn)將提高養(yǎng)殖場對體檢的疾病控制策略的參與度。

4 結(jié)語

副結(jié)核病是一種影響牛的重要慢性疾病，盡管該病對牛造成的影響可能是可變的。應(yīng)盡快將牛群中出現(xiàn)臨床癥狀、傳播MAP 的動物從牛群中移除。在有臨床病例的牛群中，副結(jié)核病的經(jīng)濟(jì)影響可能相當(dāng)大，但亞臨床副結(jié)核病的影響還尚不清楚。此外，經(jīng)濟(jì)損失估計(jì)取決于對感染MAP 的動物進(jìn)行準(zhǔn)確的分類，這有取決于診斷和檢測方法。缺乏準(zhǔn)確可靠的診斷加測方法將導(dǎo)致圍繞副結(jié)核病流行、感染和控制策略的有效性評估的不確定性。由于可能存在大量的假陰性和假陽性，不建議單獨(dú)實(shí)行檢測和淘汰策略。大多數(shù)控制計(jì)劃結(jié)合了養(yǎng)殖場的風(fēng)險評估、檢測以及生物安全措施。缺乏可靠的診斷檢測方法和養(yǎng)殖場不愿意參與控制計(jì)劃是控制副結(jié)核病的主要障礙。盡管面臨挑戰(zhàn)，世界各地仍為控制牛副結(jié)核病做出了努力。此外，副結(jié)核病與公共衛(wèi)生安全之間的相關(guān)性，尤其是乳制品行業(yè)的經(jīng)濟(jì)損失，以至于疾病控制計(jì)劃在經(jīng)濟(jì)上是合理的。未來，應(yīng)進(jìn)一步開發(fā)能正確用于副結(jié)核病的動物分類、可靠的診斷方法在控制副結(jié)核病中十分重要。改善生物安全和實(shí)施防控措施的成本，減少對養(yǎng)殖場造成的經(jīng)濟(jì)影響，提高生產(chǎn)者的積極性，減少包括副結(jié)核病在內(nèi)的幾種傳染病的傳入和傳播風(fēng)險。從而改善動物健康和動物福利。