不同廠家六味地黃濃縮丸的質量分析

詹國平，朱麗芳，蔡家寶，黃曉瑜，詹成思

(深圳市南山區蛇口人民醫院藥劑科，廣東 深圳 518067)

六味地黃丸大多用于滋補腎陰，主要是由牡丹皮，熟地黃，茯苓，酒茱萸，山藥以及澤瀉六味藥材組成，對頭暈耳鳴，腎陰虧損，腰膝酸軟患者具有顯著效果。而六味地黃濃縮丸是一類由常規丸劑改制成的現代劑型類型，其將現代藥劑技術及傳統中醫藥共同聯系起來，不僅保留了傳統湯劑中的優勢，還將現代制藥技術原有的先進性進行有效體現[1]。近年來，伴隨著中藥濃縮丸制劑技術不斷完善，六味地黃濃縮丸的臨床使用量越來越大，國內有諸多廠家均生產此類藥物[2]。2010年版《中國藥典》中規定的質量控制指標景關注于馬錢苷與丹皮酚其含量檢測方法為高效液相色譜法，在使用過程中方法準確性較高，但在檢測時采用不同液相色譜法分別檢測丹皮酚以及馬錢苷含量使后期檢測時費時較長，同時過程較為繁雜，會由于操作步驟較多產生分析誤差，而牡丹皮是六味地黃丸中主要原材料，區別于其他五味藥材生產過程中提取的是丹皮酚進行入藥，因此需要觀測丹皮酚在生產過程中的轉移規律，有效控制生產質量情況，而熟地黃中5-羥甲基糠醛含量較高，該類物質對人體具有一定毒素反應，在食品中多數作為危害因子進行控制。因此本研究參考2015版《中國藥典》測定市售5個不同廠家生產的六味地黃濃縮丸，對各項檢驗指標進行差異分析，基于現有質量標準對藥品質量控制的作用進行評估，能在一定程度上科學系統的指導臨床用藥[3-4]。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2020年1月—2020年12月市售5個不同廠家生產的六味地黃濃縮丸作為研究對象，并通過2015版《中國藥典》規定項下溶出度、含量測定以及裝量差異等相關內容對不同廠家的產品質量進行分析研究。

1.2 方法

1.2.1 儀器與材料

(1)儀器MSA225S-000-DU型電子天平、Agilent1260型高效液相色譜儀、ZB-1C型智能崩解儀(北京醫療設備四廠)、ZRS-8G型智能溶出儀、HHS21—4S型數顯式電熱恒溫水浴鍋、JBT/D—GXST380/26型超聲波清洗器以及DHG-9070A型電熱鼓風干燥箱(上海昕儀儀器儀表有限公司)。

(2)試劑馬錢苷對照品(批號：111640-200901)以及丹皮酚對照品(批號：0708-9704)，甲醇、乙腈為色譜純，其他試劑為分析純；MilliP<0.052ore純水機制備超純水。

(3)材料佛慈六味地黃濃縮丸(批準文號：國藥準字Z62020664，蘭州佛慈制藥股份有限公司)、同仁堂六味地黃濃縮丸(批準文號：國藥準字Z19993068，北京同仁堂科技發展股份有限公司制藥廠)、仲景六味地黃濃縮丸(批準文號：國藥準字Z41022128，仲景宛西制藥股份有限公司)、九芝堂六味地黃濃縮丸(批準文號：國藥準字Z43020145，九芝堂股份有限公司)以及修正六味地黃濃縮丸(批準文號：國藥準字Z22023388，通藥制藥集團股份有限公司)等5個不同廠家的六味地黃濃縮丸。

1.2.2 水分測定

(1)依據烘干法進行測定，選取2～5g供試品，將其在干燥且恒重的扁形稱量瓶內妥善放置，厚度≤5mm，并對其進行精密的稱重，之后將瓶蓋緩緩打開，置于105℃的條件下進行5h干燥處理，并及時把瓶蓋蓋緊，放置在干燥器內，進行30min左右的冷卻處理，再次精密稱定，105℃干燥1h，再次冷卻稱重，連續兩次稱重相差<5mg即停止。依據減失之后的實際重量來系統計算供試品中的含水量，計算公式：Q=K×W+R+V×T

(2)溶散時限的檢測，要采取供試品6丸，放置在適當孔徑的吊籃玻璃管中，增加擋板后需要啟動崩解儀進行檢測。

1.2.3 含量測定

對照品溶液的制備：選取適量的馬錢苷對照品、莫諾苷對照品及丹皮酚對照品適量，精密稱定，加入50%甲醇，制成每lmL含有馬錢苷、莫諾苷各40μg、含丹皮酚90μg的混合溶液，即得20μg馬錢苷的對照品溶液。

(1)馬錢苷含量測定

色譜條件：色譜柱Agilent EclipsePlusC18柱(100mm×4.6mm，3.5μm)；流動相：四氫呋喃-甲醇-乙腈-0.05%磷酸溶液(1：4：8：87)；柱溫設置為40℃，檢測波長數值設置為236nm；流速數值設置為1.0mL/min。

供試品溶液的制備：選取本品適量，全部研細，取出0.5g左右，精密稱定，于具塞錐形瓶中放置，對其進行精密量取之后，將25mL濃度為50%的甲醇溶液緩緩加入，并進行密塞處理，之后對實際重量進行測量，并給予其1h加熱回流處理，放冷之后，再次測量重量，經由50%甲醇溶液把已經減失掉的重量重新補足，精密抽取續濾液10mL放置在中性氧化硅柱上，其指標為4g，200目，鋁柱內徑為1cm，并使用10mL濃度為40%的甲醇進行洗脫后續收集流出液以及洗脫液，蒸干后需要將殘渣采取濃度50%甲醇進行溶解，并轉移到10mL量瓶中等待使用，完成后利用50%甲醇稀釋到相應刻度，并將其充分搖勻，然后進行濾過，最終續濾液取出，即得。

測定法：依次對供試品及對照品溶液進行嚴密吸取，均需10μL，之后于液相色譜儀內緩緩注入，并對其實施測定，即得。

(2)丹皮酚含量測定

色譜條件：色譜柱：Agilent EclipsePlusC18柱；流動相：甲醇-水(70：30)；柱溫為處于室溫狀態下；檢測波長數值設置為274nm；流速數值設置為1.0mL/min。

供試品溶液的制備：選取本品適量，全部研細，取出0.5g左右，精密稱定，于具塞錐形瓶中放置，對其進行精密量取之后，將50mL濃度為50%的甲醇溶液緩緩加入，并進行密塞處理，之后對實際重量進行測量，需要對供試品溶液進行超聲處理，維持儀器參數為250W，頻率保持35kHz，持續處理半小時，放冷之后，再次測量重量，并采取50%甲醇溶液補足已經解釋掉的重量，將其充分搖勻后濾過處理，最終續濾液取出，即得。

1.3 觀察指標

(1)觀察分析五個不同廠家六味地黃濃縮丸重量差異情況。

(2)觀察分析五個不同廠家六味地黃濃縮丸含量測定情況。

1.4 統計學處理

2 結果

由研究可以發現，不同廠家生產的六味地黃濃縮丸在重量并未有統計學差異，其全部符合2015版《中國藥典》相關規定，見表1。

表1 五個不同廠家六味地黃濃縮丸重量差異情況

本研究發現，不同廠家馬錢苷以及丹皮酚的含量均存在統計學差異，見表2。

表2 五個不同廠家六味地黃濃縮丸含量測定情況

3 討論

3.1 六味地黃丸質量控制情況

六味地黃丸是目前應用廣泛的中成藥之一，主要是由熟地黃，山藥，澤瀉，茯苓，牡丹皮以及酒茱萸組成。熟地黃能夠滋陰補精，澤瀉能夠去除濕氣，山藥可以健脾養胃，酒茱萸能夠養肝收斂，牡丹皮可以清瀉肝火，茯苓能夠滲濕，幫助山藥健脾，該藥物使用時補瀉結合，但以補為主。六味地黃丸還能用于治療頭暈耳鳴，骨蒸潮熱，消渴等癥狀?，F代醫學研究表明，六味地黃丸在使用時能夠提高自身免疫功能，起到抗低溫，抗衰老的效果，因此需要重視六味地黃丸質量控制情況，提高藥效。

3.2 六味地黃丸原材料作用分析

六味地黃丸中各類藥材對患者機體均具有一定價值，藥方中牡丹皮可長時間放置，使用時能夠起到解毒、潤喉的作用，同時還能增強免疫細胞功能。中藥材牡丹皮主要成分為丹皮酚被規定為六味地黃丸質量分析控制的主要指標?，F代醫學研究證明丹皮酚以及牡丹皮中存在的糖類成分能夠起到降溫，消炎，解熱的效果。

六味地黃丸另一配方為酒茱萸具有止汗、補腎、壯陽的效果，同時還能抑制血小板聚集，該類中藥材中含有馬錢苷、熊果酸以及莫諾苷等有效成分，在對酒茱萸進行質量控制時，以上有效成分均被作為酒茱萸的常規檢測成分。研究表明，2005年起《中國藥典》將馬錢苷作為六味地黃丸的主要質量控制指標，該有效成分能夠起到抗癌、抗輻射的效果，還能止咳化痰。

熟地黃又被稱之為熟地以及地黃，地黃可分為生地和熟地，男性患者多服用熟地黃，女性患者多服用生地黃，熟地黃在使用過程中能夠治療月經不調及頭暈等癥狀，起到補血益腎的效果。熟地黃中重要化學成分包括毛蕊花糖苷、氨基酸等，糖類成分高于生地黃。由于熟地黃中糖類會脫水生成果糖以及5-羥甲基糠醛，研究分析表明，藥材中5-羥甲基糠醛含量較多，會對機體產生毒理反應，因此需要嚴格控制六味地黃丸研究。

山藥應用時可起到化痰止咳，補脾養胃的效果，現代營養學研究證明，山藥在使用過程中能夠增強免疫功能，并且含有大量蛋白質和維生素。同時山藥中主要成分為淀粉，日常生活中使用能夠增加脾胃消化吸收能力，防止出現便秘，其他化學成分包括山藥堿、尿囊素以及氨基酸等，尿囊素能夠促進細胞生長，并且加速皮膚組織生長，能夠治療皮膚創傷。

茯苓能夠治療頭痛，膝關節積液等癥狀，起到解毒效果。該類中藥材主要化學成分包括茯苓酸，去氫茯苓酸等，由于茯苓中化學成分較為復雜，同時含量較少，目前對該類藥材質量分析研究不多。

澤瀉具有較好利尿功能，促進尿素以及氯化鈉排出體外，還能降低膽固醇，起到降血脂的效果，分析原因在于澤瀉能夠抑制小腸脂化膽固醇的能力，與茯苓相同，澤瀉化學成分較為復雜，含量較少，因此質量控制分析研究較少。

3.3 六味地黃濃縮丸的質量控制情況

通過以上六味地黃丸中藥材成分介紹表明中成藥臨床效果較好，同時廣泛應用使六味地黃丸質量控制效果重要性提高。而目前六味地黃制劑類型較多，包括濃縮丸，軟膠囊，片劑，口服液等多種形式，其中六味地黃濃縮丸使用率較高，因此質量控制是其研究重點。當前中藥材的來源具有一定的復雜性，且中藥材科屬種類、環境以及栽培采收等方式均存在差異，因此不同批次藥材原料的質量會具有明顯的差異性[5]。依據2015年版《中國藥典》中關于藥物質量標準檢驗可以發現不同廠家的六味地黃丸其水分、容散時限及含量等多個環節均同有關規定相符合。藥典中規定其水分不能超過9.0%，且不同廠家六味地黃濃縮丸并未存在顯著差異性；同時溶散時限不能大于120min，且不同廠家之間具有較大差異，其全部符合2015版《中國藥典》相關規定，同時不同廠家馬錢苷以及丹皮酚的含量均存在明顯差異，表明不同廠家不同批次的藥品中馬錢苷以及丹皮酚的含量是不一致的[6]。研究發現，不同廠家馬錢苷以及丹皮酚的含量均存在明顯差異，其中依據含量的多少順序依次為：仲景六味地黃濃縮丸>同仁堂六味地黃濃縮丸>九芝堂六味地黃濃縮丸>佛慈六味地黃濃縮丸>修正六味地黃濃縮丸，這可能是因為不同廠家所應用的中藥材存在差異。因為當前中藥材的來源相對比較復雜且存在明顯的差異性，其栽培、環境及采收加工方式差異較大，因此使得批次不同的藥材原料在質量上出現一定程度的差異性。同時藥材質量合格，但制劑工藝并不恰當或者是未依據規程完成操作，導致未徹底提取藥材有效成分，進而使六味地黃濃縮丸含量存有差異。

綜上所述，當前市售六味地黃濃縮丸在質量上已經達到了國家標準所規定的基本要求，但在具體指標上存在明顯的差異性，因此需要有效提高藥品質量控制范圍，保證后期患者用藥安全性。