固相萃取-氣相色譜/質譜法測定蔬菜中的8種殺蟲殺菌劑

□ 李婷婷 淄博市疾病預防控制中心

隨著生活水平的提高，人們對于食品安全問題越來越注重。為了保證食品的安全，農藥標準的限量要求也越來越嚴格，建立簡單、高效和準確的農藥殘留檢測方法是目前分析工作者關注的焦點問題[1]。固相萃取法的回收率和富集倍數高，凈化徹底，被廣泛用于農藥殘留的前處理[2]。利用質譜優良的定性能力，氣相色譜-質譜可以很好地避免樣品檢測假陽性，提高檢測準確度[3]。本文乙腈為提取溶劑，CARB/NH2固相萃取小柱（500 mg/6 mL）凈化，通過Rtx-5MS色譜柱分離檢測，用氣相色譜-質譜檢測方法，對蔬菜中氟蟲腈及其代謝產物、腈菌唑、惡霜靈、異菌脲、吡唑醚菌酯等8種殺蟲殺菌劑進行了測定。

表1 8種殺蟲殺菌劑類農藥的氣相色譜-質譜參數

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

儀器：氣相色譜-質譜聯用儀（島津GC/MS-QP 2010 Plus）、Rtx-5MS毛細管柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）、高速離心機、氮吹濃縮儀、超聲波清洗器、固相萃取儀、CARB/NH2固相萃取柱（500 mg/6 mL）。

試劑：丙酮、乙腈、二氯甲烷為色譜純試劑；氟蟲腈亞砜、氟甲腈、氟蟲腈、腈菌唑、氟蟲腈砜、惡霜靈、異菌脲、吡唑醚菌酯濃度均為100 μg/mL，定值單位為農業部環境保護科研檢測所。

1.2 儀器條件

離子源溫度230oC；離子源能量70 eV；接口溫度250oC；掃描方式SIM。載氣為高純氦氣（99.999 %）；載氣流速1.0 mL/min。升溫程序：60oC保持1 min，以5oC/min升至290oC，保持2 min。進樣口溫度為260oC；不分流進樣，進樣體積1 μL。

1.3 樣品處理

準確稱取10.0 g左右已勻漿的蔬菜樣品，乙腈25 mL于50 mL離心管中，渦旋混勻，超聲10 min。離心后取15 mL上清液氮吹至近干，加入1 mL（1∶1）丙酮-二氯甲烷溶液復溶。CARB/NH2固相萃取柱凈化：用丙酮-二氯甲烷5 mL（1∶1）活化小柱后，將復溶樣品轉入萃取柱中，再10 mL丙酮-二氯甲烷（1∶1）先后分三次淋洗固相萃取柱，收集洗脫液并氮吹至近干，用1.0 mL丙酮定容。

2 實驗結果

2.1 提取溶劑的選擇

將微量或痕量的目標物有效地提取出來是需要解決的首要問題，農藥殘留檢測中常用的萃取溶劑為乙酸乙酯、丙酮和乙腈[4]。丙酮對葉綠素和碳水化合物等物質溶解性好，共提雜質多，使凈化較難，且溶劑與樣品不能完全分離。乙酸乙酯極性較弱，對極性農藥提取效果不好。乙腈極性較大，穿透力強，提取效率好，且乙腈提取出的色素、油脂類雜質較少，能夠沉淀蛋白質等雜質[5]，因此，本試驗選取乙腈作為提取溶劑。

2.2 標準曲線及檢出限

在最佳分析條件下對標準溶液進行測定，標準品的總離子流圖示于圖1中，標準曲線方程及相關系數列于表2中。在實驗濃度范圍內，線性關系良好，相關系數在0.997～0.999，檢出限為0.01～0.005 mg/kg，8種殺蟲殺菌劑農藥均有較好的線性及較高的靈敏度。

圖1 Rtx-5色譜柱對8種殺蟲殺菌劑的SIM圖（混合標準濃度0.5 μg/mL）

表2 8種殺蟲殺菌劑的標準曲線方程及檢出限

表3 8種殺蟲殺菌劑的加標回收率及相對標準偏差

2.3 方法回收率和精密度

以已知不含農藥殘留的白菜樣品為基質做加標回收實驗，加入濃度為0.05 mg/Kg和0.1 mg/Kg。同實驗樣品前處理和檢測方法處理并計算回收率。每個加標做6個平行樣，計算平均回收率及相對標準偏差，其結果見表3。8種殺蟲殺菌劑組分的回收率在78 %～112 %，滿足分析要求；平行樣的相對偏差滿足檢測結果。

3 結論

本文以乙腈作為提取溶劑，通過超聲波輔助提取、固相萃取凈化，對蔬菜中8種殺蟲殺菌劑進行了測定。實驗充分利用氣相色譜-質譜的定性定量優勢，同時測定蔬菜中多種殺蟲殺菌劑，檢測結果準確、可靠，滿足蔬菜中農藥殘留限量標準的要求。