丹參對(duì)平菇生長(zhǎng)發(fā)育的影響

劉姍姍 趙佳浩 忻龍祚*

（河北北方學(xué)院農(nóng)林科技學(xué)院 河北 張家口 075000）

平菇，原專指糙皮側(cè)耳，現(xiàn)在平菇是一種泛稱[1]，是擔(dān)子菌門下傘菌目側(cè)耳科一大種類[2]。平菇肉質(zhì)飽滿、味道鮮美，是一種高蛋白、低脂肪的食物[3]?？稍鰪?qiáng)人體免疫力，且具有預(yù)防癌癥的功效，極受消費(fèi)者喜愛[4]。平菇在生長(zhǎng)過程中會(huì)產(chǎn)生大量的酶，具有較強(qiáng)分解轉(zhuǎn)化的能力和極強(qiáng)的富集作用[5]。丹參，唇形科鼠尾草屬植物[6]。在我國(guó)擁有悠久的種植歷史，全國(guó)各地都有分布，在臨床也有悠久的入藥歷史?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，丹參對(duì)治療心血管病有一定的治療作用[7]，是擴(kuò)張血管、活血化瘀、改善心臟血液循環(huán)的優(yōu)質(zhì)藥材[8]。

平菇作為全國(guó)栽培量最大的食用菌之一，價(jià)格低廉、食用范圍廣泛，栽培技術(shù)已經(jīng)非常成熟[9]。然而隨著人們對(duì)健康食品需求的增加，怎樣研究出營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高、具有保健作用的新型平菇產(chǎn)品成為眾多企業(yè)和研究機(jī)構(gòu)所面臨的新的挑戰(zhàn)[10]。本試驗(yàn)嘗試將中藥丹參添加到平菇栽培料中，觀察丹參對(duì)平菇生長(zhǎng)發(fā)育的影響，探究丹參的有效成分是否可以轉(zhuǎn)化到平菇子實(shí)體中，以期培育出品質(zhì)更高、具有保健作用的功能型平菇。

1 材料與方法

1.1 供試材料

1.1.1 供試菌種。平菇8194菌種，來(lái)源于邢臺(tái)市威縣中沃食用菌公司。

1.1.2 栽培基質(zhì)。原料：棉籽殼、玉米芯、麩皮、石灰、石膏、磷肥等由河北北方學(xué)院食用菌實(shí)驗(yàn)室提供。丹參片，購(gòu)買于石家莊市行唐縣。

1.2 試驗(yàn)時(shí)間與地點(diǎn)。試驗(yàn)時(shí)間：2020年9～12月；試驗(yàn)地點(diǎn)：河北北方學(xué)院食用菌實(shí)驗(yàn)室。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 配方設(shè)計(jì)。將購(gòu)買的丹參片放入KC-500高速粉粹機(jī)打碎，過60目的篩子。將過篩后的丹參粉按照占栽培基質(zhì)總干料質(zhì)量的1%、2%、3%的比例添加至栽培基質(zhì)中。以不添加丹參粉的處理作為對(duì)照組，共設(shè)置4個(gè)處理，每個(gè)處理3次重復(fù)。各處理具體配方設(shè)置見表1。

表1 平菇栽培料配比 (%)

1.3.2 栽培基質(zhì)的制作。將葡萄枝、棉籽殼、玉米芯、麩皮、丹參粉、磷肥、石膏、石灰等提前24 h預(yù)濕，按配料比設(shè)計(jì)分別放入攪拌機(jī)中混勻。調(diào)節(jié)栽培料含水量在65%左右，調(diào)節(jié)pH值為7～8。攪拌均勻后，取50 g栽培料裝入內(nèi)徑20 mm、長(zhǎng)200 mm的大試管，裝至距離試管塞2～3 cm處即可。每個(gè)處理做兩個(gè)大試管，重復(fù)3次，用來(lái)測(cè)定平菇菌絲的生長(zhǎng)速度；然后，取混勻的等量栽培料裝入聚丙烯栽培袋中，每個(gè)處理制作20個(gè)菌棒，每個(gè)菌棒重700 g，3次重復(fù)。高壓滅菌2 h。

1.3.3 觀測(cè)指標(biāo)。①菌絲生長(zhǎng)特性：形狀、色澤、長(zhǎng)勢(shì)、濃密度；②菌絲生長(zhǎng)速度：通過測(cè)量菌絲生長(zhǎng)的長(zhǎng)度(4 d測(cè)1次)；③平菇子實(shí)體的單菇重：測(cè)量第一潮單菇的重量；④平菇多糖含量測(cè)定的方法：醇提法；⑤平菇蛋白含量測(cè)定的方法：三氯乙酸-丙酮法；⑥平菇中丹參的有效成分：紫外吸光度法。

1.3.4 丹參對(duì)平菇菌絲生長(zhǎng)影響的測(cè)定。①接種：提前將接種室滅菌，將平菇8194的試管種和所制作的含平菇栽培料的大試管，用接菌針尖部劃切取出3～5 mm見方菌種塊，接種針挑上迅速轉(zhuǎn)移至大試管中，灼燒試管口，并將試管塞在火焰上迅速過一下，塞好試管口。菌種接完后，貼好標(biāo)簽，位置不影響對(duì)菌絲生長(zhǎng)的觀測(cè)即可。②培養(yǎng)：放入恒溫的人工氣候箱中培養(yǎng)。③測(cè)量菌絲生長(zhǎng)特性：采用劃線法進(jìn)行測(cè)量，將每次測(cè)量時(shí)的菌絲生長(zhǎng)最前端進(jìn)行劃線標(biāo)記，最好測(cè)量劃線距離，計(jì)算菌絲生長(zhǎng)速度。同時(shí)觀察色澤、生長(zhǎng)趨勢(shì)、稀疏程度、形態(tài)特征。

1.3.5 丹參對(duì)平菇產(chǎn)量的測(cè)定。①接種：提前將接種室滅菌，平菇枝條菌種接種需要兩個(gè)人合作，一人擰開未接種的平菇菌棒的袋口，另一個(gè)人拿好枝條菌種頂部迅速平行放進(jìn)菌種孔，接種完一袋菌種再取菌種繼續(xù)接種。中間接種工作人員不得碰除枝條種之外的物品，如不小心碰到需用75%酒精消毒。②放入人工氣候培養(yǎng)室培養(yǎng)，及時(shí)檢測(cè)是否污染。菌袋長(zhǎng)滿菌絲后移動(dòng)到大棚進(jìn)行管理，溫度應(yīng)控制在20℃左右，空氣相對(duì)濕度為80%左右，注意通風(fēng)以及二氧化碳濃度等。③單菇重測(cè)定：平菇邊緣即將翹起時(shí)采摘，這時(shí)并沒有孢子射出，采摘時(shí)不留小的平菇。稱重記錄產(chǎn)量。④干菇制備：采下的子實(shí)體自然風(fēng)干保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.6 平菇多糖含量的測(cè)定。樣品烘干、稱重、水浴、離心、旋蒸、乙醇溶解、沉淀過濾，得到粗多糖。

1.3.7 平菇蛋白含量的測(cè)定。分別取CK、處理1、處理2、處理3的平菇樣品5 g，粉碎為細(xì)粉，加入濃度為8 mol/L的尿素溶液300 ml，回流30 min，4500r/min離心10min，取上清液，加入三氯乙酸15ml，離心，取沉淀，滴加丙酮，離心，取沉淀，烘干至恒重，即得CK、處理1、處理2、處理3蛋白質(zhì)的質(zhì)量。

2 結(jié)果與分析

2.1 丹參對(duì)平菇菌絲體形態(tài)的影響。由表2可知，處理1、處理2較對(duì)照組菌絲形態(tài)無(wú)明顯變化，處理3較對(duì)照組相比菌絲較為稀疏。

表2 添加不同比例的丹參對(duì)菌絲體形態(tài)的影響

2.2 丹參對(duì)平菇菌絲生長(zhǎng)速度的影響。由表3可知，這四個(gè)處理中處理1生長(zhǎng)最快，但與CK比無(wú)顯著性差異，與處理2、處理3相比差異較為顯著；處理2最慢，與CK、處理1、處理3相比有顯著性差異。

表3 添加不同比例的丹參對(duì)平菇菌絲生長(zhǎng)速度的影響

2.3 丹參對(duì)平菇子實(shí)體生長(zhǎng)發(fā)育的影響。由表4可知，平菇單菇重由大到小依次為：CK＞處理2＞處理3＞處理1。CK的單菇重為91.41g，高于試驗(yàn)組，與處理1、處理2、處理3相比有顯著性差異；處理1平均單菇重最輕，為71.05 g，與CK、處理2、處理3相比有差異顯著性。

表4 添加不同比例的丹參對(duì)平菇單菇重的影響

2.4 丹參對(duì)平菇子實(shí)體蛋白和多糖含量的影響。由表5可知，蛋白含量由大到小依次為：處理1＞處理3＞CK＞處理2，其中處理1、處理2與CK相比有顯著性差異，而處理3與CK無(wú)顯著性差異；多糖含量由大到小依次為：處理2＞處理1＞CK＞處理3，處理1、處理3與CK相比無(wú)顯著性差異，而處理2與CK相比差異顯著。

表5 丹參對(duì)平菇蛋白和多糖含量的影響

2.5 平菇中丹參的有效成分。經(jīng)檢驗(yàn)，四個(gè)處理的蘑菇紫外吸收光譜沒有區(qū)別。由于紫外光吸收度是有加和性的，所以蘑菇提取液里沒有丹參素、丹酚酸和丹參酮等有效成分。

3 結(jié)論與討論

據(jù)試驗(yàn)結(jié)果得知，在平菇栽培料中添加丹參粉，會(huì)對(duì)平菇的生長(zhǎng)造成影響。在本試驗(yàn)的梯度范圍內(nèi)添加丹參粉，會(huì)對(duì)平菇菌絲的生長(zhǎng)產(chǎn)生一定的影響，至于影響的程度以及影響的利弊，還需后續(xù)更加嚴(yán)謹(jǐn)?shù)脑囼?yàn)進(jìn)行驗(yàn)證。但添加丹參粉會(huì)對(duì)平菇子實(shí)體的單菇重產(chǎn)生一定程度的負(fù)面影響。同時(shí)，對(duì)添加了丹參處理的平菇自然風(fēng)干后進(jìn)行蛋白、多糖和丹參有效成分含量的測(cè)定，發(fā)現(xiàn)添加丹參粉會(huì)提升平菇子實(shí)體的蛋白含量與多糖含量，而丹參的有效成分丹參素、丹酚酸和丹參酮均未檢測(cè)出，丹參酮IIa含量非常低。因此，為了更加全面的探究丹參對(duì)平菇子實(shí)體的的影響，還需進(jìn)行進(jìn)一步的試驗(yàn)進(jìn)行論證。

從物種分類來(lái)看，平菇與丹參分屬兩大界，將二者結(jié)合轉(zhuǎn)化是有些困難的。本處理在栽培料中添加丹參，為國(guó)內(nèi)外學(xué)者將藥用植物應(yīng)用于誘導(dǎo)大型食用真菌次生代謝產(chǎn)物積累的研究與實(shí)踐提供了寶貴經(jīng)驗(yàn)。