骨髓增生異常綜合征患兒血清LDH、β2-MG、SF和 維生素B12的表達及意義

張佩蕓，蔣 旭,孫群英，李星慧，鄧勝男

(川北醫學院附屬醫院兒科，四川 南充 637000)

骨髓增生異常綜合征(myelodysplastic syndrome，MDS)是主要特征為髓系細胞分化、成熟異常及骨髓衰竭的髓系腫瘤[1]。兒童MDS患者發病年齡較低，病程較短，進展快，白血病轉化率高。MDS患兒臨床無特殊癥狀，大多表現為氣短、乏力、面色蒼白等貧血癥狀，嚴重者出現反復發熱、出血及感染，并且可能發展成為急性髓系白血病，威脅患兒身體健康及生命安全[2]。血清乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase，LDH)是重要的細胞代謝酶，當組織細胞被破壞時，LDH會釋放入血，臨床檢測LDH水平能夠了解機體細胞增殖與代謝的情況[3]。β2微球蛋白(β2-microglobulin，β2-MG)是由血小板、淋巴細胞產生，其血清表達量在血液性疾病的評估中具有重要作用[4]。鐵蛋白(serum ferritin，SF)是人體儲存鐵的主要成分，臨床可用于檢測鐵代謝異常情況及機體鐵儲存水平[5]。同時SF也是腫瘤標志物之一，惡性腫瘤細胞能夠合成分泌SF。維生素B12是造血原料的指標，也是人體合成DNA過程中的重要輔酶，能夠在紅細胞生成中促進DNA生成[6]。本研究通過對比分析MDS患兒血清LDH、β2-MG、SF、維生素B12水平的變化，探究其在臨床應用中的意義，現報道如下。

1研究對象與方法

1.1研究對象

選取2019年2月至2020年6月川北醫學院附屬醫院收治的72例MDS患兒為研究組，其中男41例(56.94%)，女31例(43.06%)；年齡為4～9歲，平均年齡(6.49±1.11)歲；體重為17～27kg，平均體重(21.18±2.28)kg；疾病分型為難治性貧血伴環狀鐵粒幼細胞增多4例，難治性血細胞減少伴多系發育異常17例，難治性貧血伴單系病態造血15例，難治性貧血伴原始細胞增多Ⅰ型16例，難治性貧血伴原始細胞增多Ⅱ型20例。納入標準：①符合《血液病診斷及療效標準》[7]中對MDS的診斷；②臨床資料完整。排除標準：①合并巨幼細胞性貧血、溶血性貧血、慢性失血者；②肝腎功能損害者；③臨床資料不完整。另選取來院體檢的健康志愿者30例兒童為對照組，其中男17例(56.67%)，女13例(43.33%)；年齡為4～9歲，平均年齡(6.34±1.01)歲；體重為16～27kg，平均體重(21.24±2.36)kg。研究組與對照組的性別、年齡、體重一般資料比較差異均無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。該研究通過川北醫學院附屬醫院倫理委員會審批，所有參加本研究的兒童及監護人均對本研究知情同意。

1.2方法

1.2.1檢測方法

分別于研究組患兒入院第2天、對照組體檢當天，抽取清晨空腹靜脈血3mL，于離心機中以3 000r/min離心15min，離心半徑15cm，留取上清液，保存至-80℃待測。應用西門子全自動生化檢測儀，采用速率法檢測LDH水平；應用美國雅培AEROSET型全自動生化分析儀，采用免疫比濁法檢測β2-MG水平；應用羅氏Cobas 6000自動生化分析儀，采用電化學發光法檢測SF、維生素B12水平。

1.2.2分組方法

應用國際預后積分系統(International Prognostic Scoring System，IPSS)[8]，根據骨髓原始細胞百分比、骨髓造血細胞染色體核型及外周血細胞減少系列數對研究組患兒進行計分，0分為低危組，0～1.0為中危Ⅰ組，1.0～2.5為中危Ⅱ組，≥2.5為高危組。

1.3統計學方法

2結果

2.1研究組與對照組的血清LDH、β2-MG、SF和維生素B12水平的比較

研究組的血清LDH、β2-MG、SF水平均明顯高于對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)；研究組與對照組的維生素B12水平比較差異無統計學意義(P>0.05)，見表1。

2.2血清LDH、β2-MG、SF和維生素B12診斷MDS的ROC曲線分析

繪制血清LDH、β2-MG、SF、維生素B12水平的ROC曲線，其中血清LDH、β2-MG、SF和維生素B12聯合檢測的曲線下面積(AUC)最高(0.946)，因此，LDH、β2-MG、SF和維生素B12聯合的診斷效能最高，見表2、圖1。

表1 兩組的血清LDH、β2-MG、SF和維生素B12水平的比較Table 1 Comparison of serum LDH,β2-MG,SF and vitamin B12 levels between the two

表2 血清LDH、β2-MG、SF和維生素B12診斷MDS的診斷效能Table 2 Diagnostic efficacy of serum LDH,β2-MG,SF and vitamin B12 in the diagnosis of MDS

2.3不同危險程度MDS患兒血清LDH、β2-MG、SF和維生素B12水平的比較

在72例MDS患兒中，低危組、中危Ⅰ組、中危Ⅱ組的血清LDH、β2-MG、SF水平均明顯低于高危組(P<0.05)，低危組、中危Ⅰ組均明顯低于中危Ⅱ組，低危組明顯低于中危Ⅰ組，差異均有統計學意義(P<0.05)；低危組、中危Ⅰ組、中危Ⅱ組和高危組的血清維生素B12水平比較差異無統計學意義(P>0.05)，見表3。

圖1 LDH、β2-MG、SF和維生素B12診斷 MDS的ROC曲線Fig.1 ROC curves of LDH,β2-MG,SF and vitamin B12 in the diagnosis of MDS

表3 不同危險程度MDS患兒血清LDH、β2-MG、SF和維生素B12水平的比較Table 3 Comparison of serum LDH,β2-MG,SF and vitamin B12 levels in children with MDS at different risk

3討論

MDS是常見的血液系統疾病，兒童MDS患者易轉化為白血病。MDS患兒會出現發熱、感染、貧血、出血癥狀，易伴發各種并發癥，如免疫性疾病、骨髓增生低下、骨髓纖維化等，也可能發展成為急性髓系白血病[9]，威脅患兒身體健康及生命安全。近年隨著現代分子生物技術的發展，血清疾病相關因子在各類疾病的發生、進展及預后方面的作用逐漸被臨床重視，能夠輔助臨床診斷疾病、評估治療效果及預后，應用情況較好。

3.1血清LDH、β2-MG和SF水平在MDS患兒中的表達意義

LDH是一種存在機體所有組織細胞胞質內的糖酵解酶，當機體正常組織受到損傷時其水平會顯著上升，在白血病、惡性貧血等惡性腫瘤疾病中的表達量也呈較高水平。MDS患兒細胞基因突變，酶蛋白調控基因表達異常，出現能量代謝異常及細胞損傷，并且MDS患兒均具有貧血及感染，炎性因子的釋放也會造成細胞損傷，無氧酵解增強，代謝產物聚集促使LDH釋放[10]。β2-MG是由多形核白細胞、血小板及淋巴細胞產生的低分子蛋白，是構成細胞膜上的組織相容性抗原的一部分，存在于人的血液、腦脊液及有核細胞膜上，機體正常時體內含量較低，但存在炎性反應或惡性腫瘤時，其水平明顯升高，有作為腫瘤標記的價值[11]。SF是含鐵豐富的蛋白質，其鐵結合及儲備能力均較強，能夠參與細胞代謝、生成及免疫調控過程[12]。正常情況下SF水平穩定，除炎癥外，腫瘤細胞合成SF、體內鐵代謝發生障礙均可導致血清SF水平升高。MDS患兒血清SF水平升高與機體鐵利用障礙、利用增加及異常SF結合有密切關系，MDS患兒的病態造血產生異常紅細胞，進而出現鐵代謝異常及利用障礙，同時MDS還具有無效造血及原位溶血，紅細胞被過度破壞導致鐵釋放增加，加之MDS的惡性生物學行為，均會提升血清SF表達水平[13]。維生素B12是人體不可或缺的造血因子之一，也是人體合成DNA的重要輔酶，其在紅細胞的生成中參與并促進DNA生成，影響血細胞的發育及成熟，當其缺乏時，會引起巨幼細胞性貧血[14]。本研究顯示，MDS患兒血清LDH、β2-MG、SF水平均明顯高于健康志愿者。劉元軍等[15]的研究顯示，MDS患兒血清LDH、可溶性CD44、SF水平較健康志愿者均顯著升高，與本研究結果一致。但在本研究中，MDS患兒維生素B12水平與健康志愿者比較無顯著性差異，可能是因為本研究樣本量納入較少，導致差異不明顯，同時部分患兒就診前接受過輸血治療。

3.2血清LDH、β2-MG、SF和維生素B12的診斷效能

本研究顯示，血清LDH、β2-MG、SF和維生素B12聯合檢測的AUC最高，說明血清LDH、β2-MG、SF和維生素B12聯合檢測能夠有效地輔助臨床早期診斷MDS。另外，本研究顯示，低危組、中危Ⅰ組、中危Ⅱ組的血清LDH、β2-MG、SF水平均明顯低于高危組，低危組、中危Ⅰ組均明顯低于中危Ⅱ組，低危組明顯低于中危Ⅰ組，提示血清LDH、β2-MG、SF水平與MDS患兒病情嚴重程度有一定聯系。分析其原因，MDS患兒的LDH水平升高與其染色體異常并存，病情較為嚴重的患兒基因突變與染色體異常更為嚴重，轉化為急性白血病的風險更高。高危MDS患兒腫瘤細胞比例增高，過高的腫瘤負荷與腫瘤免疫導致體內β2-MG水平升高。同時，相對高危的MDS患兒腫瘤細胞分泌、感染、炎性因子釋放等更為嚴重，紅細胞破壞程度也更高，鐵釋放增加，SF水平升高。

綜上所述，MDS患兒血清LDH、β2-MG、SF水平均明顯升高，且與患兒病情嚴重程度有關聯，LDH、β2-MG、SF和維生素B12聯合檢測能夠輔助臨床診斷MDS。