仁和健太易酵素對人體T淋巴細胞和免疫球蛋白的影響

張國棟，徐向榮，鄭俊云，王金錢，黃武軍，李 欣，王 鴻

仁和健太易酵素對人體T淋巴細胞和免疫球蛋白的影響

張國棟1，徐向榮1，鄭俊云1，王金錢2*，黃武軍3，李 欣3，王 鴻4

1. 江西仁仁健康產業有限公司，江西 樟樹 331200 2. 景德鎮學院，江西 景德鎮 333000 3. 仁和（集團）發展有限公司，江西 樟樹 331200 4. 天津市第三中心醫院，天津 300170

探究仁和健太易酵素對人體T淋巴細胞和免疫球蛋白的影響，評價中藥酵素對提高人體免疫力的作用。采用組間和試驗前后對照設計比較法，按劑量口服仁和健太易酵素90 d，以白細胞計數、人體外周血T淋巴細胞亞群CD4/CD8值和人體血清中免疫球蛋白IgG、IgA、IgM的含量為指標，臨床觀察該酵素對人體免疫力的作用。口服仁和健太易酵素對受試者CD4/CD8和IgG、IgA、IgM含量以及白細胞計數，試驗前后及試驗90 d后較對照組均升高，差異有統計學意義（＜0.05）。仁和健太易酵素具有一定的維持和增強人體免疫力的功效。

仁和健太易酵素；細胞免疫；體液免疫；人體免疫力；CD4/CD8；免疫球蛋白

植物酵素是以可用于食品加工的植物為主要原料，經微生物發酵制得的含有特定生物活性成分可供人類食用的酵素產品[1-2]，傳統酵素的主要原料為果蔬汁、食用菌等。近年來隨著中醫藥在我國的守正創新發展，以“藥食同源”中藥材為原料的酵素在我國市場上逐漸占有一席之地。酵素能促進代謝和能量吸收，凈化血液，抵抗外來病原菌感染，增強對細菌的抵抗力，活化與修復細胞組織，并強化細胞功能，促進人體新陳代謝營養和能量轉換，從而使人體獲得一種平衡狀態，并以此來增強人體免疫力[3]。

仁和健太易酵素為江西仁仁健康產業有限公司研制的新一代中藥酵素，處方由人參、茯苓、大棗、蜂蜜、桑椹、黃精、枸杞、覆盆子、松花粉、甘草等中藥材組成，依次經乳酸發酵、酵母發酵和醋酸發酵、口感調配而成。為評價本品對提升人體免疫力的作用，天津市第三人民醫院篩選125例受試者，以人體外周血T淋巴細胞亞群CD4、CD8所占的比例及CD4/CD8值，人體血清中免疫球蛋白IgG、IgA、IgM的含量，白細胞計數為指標，進行臨床試驗研究。

1 材料與方法

1.1 受試材料

仁和健太易酵素（受試品，液體，規格30 mL/瓶，批號20200901）。安慰劑（對照品，液體，規格30 mL/瓶，批號20200902）含水、糖、色素等無功效成分，在劑型、口感、外觀和包裝上與受試品一致。以上均由江西仁仁健康產業有限公司提供。

1.2 受試對象

1.2.1 納入標準 （1）產品適用于18歲（含18歲）至69歲的人群。（2）經體檢符合條件[4]的自愿受試者。（3）免疫相關健康評分表的綜合評價得分≤60。（4）入組受試者的外周血T淋巴細胞亞群CD4/CD8值（1.4～2.0）及血清中免疫球蛋白IgG、IgA、IgM的含量（6～16、0.76～3.9、0.4～3.45 g/L）在正常值范圍以內。（5）所有受試者均簽署知情同意書。

1.2.2 排除者標準 （1）不能經口進食或不能按規定食用該產品者。（2）年齡在69歲以上者，妊娠或哺乳期婦女，對該產品不耐受或過敏者。（3）主訴不清者。（4）嚴重職業病等重癥患者。（5）合并心、腦、肝、腎和造血系統等嚴重疾病及精神病患者。（6）受試者的外周血T淋巴細胞亞群CD4、CD8所占的比例及CD4/CD8值，血清中免疫球蛋白IgG、IgA、IgM的含量高于正常值上限或低于正常值下限。（7）受試者患有免疫相關性疾病如系統性紅斑狼瘡、類風濕關節炎、系統性血管炎、硬皮病、天皰瘡、皮肌炎、混合性結締組織病、原發性血小板紫癜、自身免疫性溶血性貧血、橋本氏甲狀腺炎、原發性黏液性水腫、甲狀腺機能亢進、潰瘍性結腸炎等。（8）未按規定食用該產品者，資料不全影響療效或安全性判斷者。（9）短期內食用與該產品作用有關的食物或藥物，影響結果判斷者。

1.3 試驗設計與分組

采用試驗前后和組間2種對照設計法，先根據隨機盲法分組，將受試者隨機分為試驗組和對照組，再以白細胞計數作為分層因素進行分層，將受試者按照白細胞計數≤4.2×109/L和白細胞計數＞4.2×109/L分為2層，盡可能考慮影響結果的主要因素如年齡、性別等，進行均衡性檢驗，以保證組間的可比性。每組受試者不少于50例。本試驗經天津市第三人民醫院倫理委員會批準，批準號為[科倫]202006012。

1.4 試驗方法

試驗組口服仁和健太易酵素，2次/d，1瓶/次，食用時間90 d。對照組口服安慰劑，2次/d，1瓶/次，食用時間90 d。

1.5 儀器與試劑

Modular P全自動生化分析儀（德國羅氏診斷公司）；TBA-120全自動生化分析儀（日本東芝公司）；Sysmex-K21三分類血液分析儀（Sysmex公司）；Sysmex血細胞分析稀釋液（Sysmex公司）；生化試劑盒由德國羅氏診斷有限公司生產，由德國羅氏診斷產品（上海）有限公司提供。

1.6 結局指標

1.6.1 健康狀況調查 按照健康調查問卷（表1）詳細詢問受試者，試驗組和對照組在試驗開始前和試驗結束后各問詢1次，試驗組在口服第45天進行試驗期間問詢，在功效指標判定時加以參考。

1.6.2 主觀評價指標

（1）免疫相關健康評分：按照免疫相關健康評分表（表2）詳細詢問受試者，免疫相關健康評分表總分100分。在試驗開始前和試驗結束后各問詢1次，試驗組在口服第45天進行試驗期間問詢并評分。

（2）免疫相關健康評分判定標準：該問卷分為個體總體感受、心理感受、生理感受共3個方面。評分時要考慮每個方面的得分情況和整個問卷的得分情況，采用每個方面得分和總體得分相結合的評定方法對受試品試驗前后的效果進行評價。計算每個方面的得分：按照分值的高低分為差、較差、中等、良好4個等級，每個等級有分值區間，在同一個區間內，分值越高說明越趨向免疫健康。見表3。

1.6.3 功效指標 功效指標分別在試驗開始前和試驗結束后各檢查1次。

（1）細胞免疫指標：分別在試驗前后采集試驗組和對照組受試者外周血，采用流式細胞儀檢測人體外周血T淋巴細胞亞群CD4、CD8所占的比例及CD4/CD8值。

表1 健康調查問卷

Table 1 Health questionnaire

編號問題答案 1您是否是過敏體質是（食物、花粉、皮毛、其他） 否 2您近1個月內是否發生過感冒是（次數：＿＿） 否 3您近2個月內是否做過核酸檢測是（檢測結果：陰 陽） 否 4您現階段是否服藥是（試驗期間是否更換藥物種類：是 否） 否 5您在試驗期間是否同時服用其他保健食品是 否

表2 免疫相關健康評分問卷

Table 2 Immune-related health score questionnaire

評分項目序號相關條目從不偶有(＜15 d)少部分時間有(＜1個月，≥15 d)一半時間有(＜2個月，≥1個月) 個月，≥1個月)大部分時間有(＜3 個月，≥2個月) 個體總體感受（回憶3個月內相關感受）1我容易過敏54321 2我好像比別人容易生病54321 3干燥的天氣讓我不舒服54321 4潮濕的天氣讓我不舒服54321 5我感到身體沉重，不松快54321 6我很想睡覺，總也睡不夠54321 評分項目序號相關條目從不偶有（＜3 d）少部分時間有（＜6 d，≥3 d）一半時間有（＜15 d，≥6 d）大部分時間有（≥15 d） 心理感受（回憶1個月內相關感受）1我心情很愉快12345 2我容易焦慮54321 3我精神緊張54321 4我能夠集中注意力做事情12345 5我的記性不好，容易忘事54321 6失眠讓我苦惱54321 7我精力充沛12345 評分項目序號相關條目從不偶有(＜3 d)少部分時間有(＜6 d，≥3 d)一半時間有(＜15 d，≥6 d)大部分時間有(≥15 d) 生理感受（回憶1個月內相關感受）1我食欲不錯12345 2我感到胃部（或腹部）脹滿不舒54321 3我的大便不成形54321 4我的胃脘部（或背部或腰膝部）怕憐54321 5我的臉色萎黃沒有光澤54321 6呼吸時，我感到氣短54321 7我體力不錯，不容易感到疲乏12345

表3 免疫相關健康評分判定標準

Table 3 Criteria of immune-related health rating scale

項目差較差中等良好 個體總體感受6≤得分≤1212＜得分≤1818＜得分≤2424＜得分≤30分 生理感受7≤得分≤1414＜得分≤2121＜得分≤2828＜得分≤35分 心理感受7≤得分≤1414＜得分≤2121＜得分≤2828＜得分≤35分 綜合評價20≤得分≤4040＜得分≤6060＜得分≤80，單個方面得分均需到中等，但未達到良好80＜得分≤100，單個方面得分均需達到中等或良好

（2）體液免疫指標：分別在試驗前后采集試驗組和對照組受試者外周血，采用免疫比濁法檢測人體血清中免疫球蛋白IgG、IgA、IgM的含量。

（3）結果判定：白細胞計數≤4.2×109/L的分層，試驗組試驗前后自身對照及與對照組組間比較：白細胞計數、CD4/CD8值及IgG、IgA、IgM含量至少有一個指標升高，且有顯著性差異（＜0.05），判定結果為陽性。

試驗組和對照組在試驗后白細胞計數、CD4/CD8值及IgG、IgA、IgM含量中的任意一項指標下降到正常值低限以下或升高到正常值范圍以上，則結果判定為陰性，或出現陰性結果的受試者數量超過全部受試者的5%，則結果判定為陰性。

1.7 統計學分析

自身對照資料采用配對檢驗，組間均數比較采用成組檢驗，后者需進行方差齊性檢驗，對非正態分布或方差不齊的數據進行適當的變量轉換，待滿足正態方差齊后，用轉換的數據進行檢驗；若轉換數據仍不能滿足正態方差齊要求，改用’檢驗或秩和檢驗；方差齊但變異系數太大（如變異系數＞50%）的資料應用秩和檢驗。數據采用表示。

2 結果與分析

2.1 受試者基線特征

納入受試者125例，試驗組63例、對照組62例。試驗組有8例、對照組有8例未在規定時間按時復查，符合受試者排除標準，有效受試者試驗組55例、對照組54例，試驗組、對照組受試者脫失率分別為12.7%、12.9%。兩組在生命體征和健康調查、免疫健康狀況評分及細胞和體液免疫指標進行分析，結果顯示兩組在上述方面差異無統計學意義（＞0.05），兩組具有基線可比性，符合統計要求。

2.2 主觀評價

由表4可見，試驗組試驗后個體總體感受、生理感受、心理感受和綜合評分高于試驗前，差異有統計學意義（＜0.01）；試驗后試驗組個體總體感受、生理感受、心理感受和綜合評分高于對照組，差異有統計學意義（＜0.01）。對照組試驗前后比較，個體總體感受、生理感受和綜合評分差異無統計學意義（＞0.05）。

表4 仁和健太易酵素對受試者免疫相關健康評分的影響()

Table 4 Effects of Renhe Jiantaiyi Enzyme on immune-related health scores in subjects ()

評分項目試驗組(n = 55)對照組(n = 54)95% CIP試驗前試驗后95% CIP試驗前試驗后95% CIP 綜合評分54.75±5.6759.05±5.81**##1.28～5.350.00854.07±4.4454.31±4.57?1.28～2.410.8741.31～5.670.007 個體感受17.07±2.3418.31±2.00**##0.96～2.130.00917.15±1.8417.30±1.60?0.96～1.130.9310.72～2.030.009 心理感受19.47±2.7520.69±2.30**##1.03～3.720.00719.02±2.1318.85±1.89?1.83～1.310.9461.86～2.390.007 生理感受18.16±2.7520.02±2.51**##1.83～3.670.00617.91±2.0318.17±1.77?1.75～1.370.711.74～3.380.006

與同組試驗前比較：**＜0.01；與對照組試驗后比較：##＜0.01

**< 0.01same group before test;##< 0.01control group after test

2.3 客觀評價

2.3.1 細胞免疫、體液免疫指標 由表5可見，試驗組試驗后CD4/CD8值，IgG、IgA、IgM含量較試驗前有上升趨勢，具有統計學差異（＜0.05）；試驗后試驗組CD4/CD8值，IgG、IgA、IgM含量較對照組有所上升，具有統計學差異（＜0.05）。

2.3.2 白細胞計數分層后免疫指標 根據白細胞計數≤4.2×109/L分為2層，試驗前白細胞計數≤4.2×109/L的受試者試驗組11例，對照組12例，試驗過程中分別脫失1例，所以有效白細胞計數≤4.2×109/L的分層為試驗組10例，對照組11例，進行單獨統計分析。

由表6可見，白細胞計數≤4.2×109/L的分層，試驗組試驗后CD4/CD8值，IgG、IgA、IgM含量，白細胞計數較試驗前升高，差異有統計學意義（＜0.05）。試驗后試驗組CD4/CD8值、IgM含量、白細胞計數較對照組有所上升，差異具有統計學意義（＜0.05）。

2.4 不良反應觀察

試驗組、對照組均未見過敏及其他不良反應情況發生。兩組試驗后胸透、腹部B超、心電圖、血、尿、便常規及肝腎功能各指標未見異常，兩組安全可靠。

表5 仁和健太易酵素對受試者細胞免疫、體液免疫指標的影響()

Table 5 Effects of Renhe Jiantaiyi Enzyme on cellular immunity and humoral immunity in subjects ()

指標試驗組(n = 55)對照組(n = 54)95% CIP試驗前試驗后95% CIP試驗前試驗后95% CIP CD4/CD81.46±0.141.85±0.20*#0.35～1.030.0351.40±0.151.44±0.20?0.81～0.620.8300.62～1.230.031 IgG/(μg·mL?1)8 040.38±569.198 233.42±715.29*#1 271.06～2 316.130.0418 033.88±597.958 040.83±687.03?1 036.16～2 637.740.9271 262.37～2 463.210.040 IgA/(μg·mL?1) 1 903.10±113.411 980.41±152.78*#361.18～1 581.610.0441 920.46±111.661 926.29±149.36?132.24～368.630.948 381.21～1 661.620.047 IgM/(μg·mL?1)1 305.07±87.871 410.28±115.55*#111.47～1 227.250.0311 310.79±82.621 292.30±101.90?381.36～281.720.913 258.52～1 174.360.029

與同組試驗前比較：*＜0.05；與對照組試驗后比較：#＜0.05

*< 0.05same group before test;#< 0.05control group after test

表6 仁和健太易酵素對白細胞計數≤4.2×109·L?1的受試者細胞免疫、體液免疫指標的影響()

Table 6 Effects of Renhe Jiantaiyi Enzyme on cellular immunity and humoral immunity in subjects with WBC count ≤ 4.2 × 109·L?1 ()

指標試驗組(n = 10)對照組(n = 11)95% CIP試驗前試驗后95% CIP試驗前試驗后95% CIP CD4/CD81.44±0.101.87±0.19*#0.38～1.120.0371.41±0.191.40±0.14?0.63～0.790.9830.81～1.030.034 IgG/(μg·mL?1)7 855.62±631.207 908.93±776.12*1 251.31～2 459.680.0418 134.18±739.578 184.04±753.68?1 336.51～2 581.390.914?1 211.28～2 859.470.730 IgA/(μg·mL?1)1 859.98±88.241 984.46±118.71*382.72～1 438.170.0461 934.03±84.951 988.99±143.32?169.57～627.410.923?1 362.76～1 416.610.960 IgM/(μg·mL?1)1 265.56±86.991 386.67±150.02*#351.47～1 131.620.0321 302.01±78.131 307.41±124.19?338.49～1 203.720.990351.53～1 218.720.048 白細胞計數4.04±0.155.02±1.00*#1.43～1.740.0374.06±0.294.53±0.780.59～2.160.0831.37～1.840.046

與同組試驗前比較：*＜0.05；與對照組試驗后比較：#＜0.05

*< 0.05same group before test;#< 0.05control group after test

3 討論

3.1 主觀和客觀指標

試驗組試驗后個體總體感受、生理感受、心理感受和綜合評分高于試驗前，差異有統計學意義（＜0.01）；試驗后試驗組個體總體感受、生理感受、心理感受和綜合評分高于對照組，差異有統計學意義（＜0.01）。

試驗前試驗組年齡、性別、綜合評價、CD4/CD8、IgG、IgA、IgM與對照組比較，差異無統計學意義（＞0.05）。試驗組試驗后CD4/CD8值，IgG、IgA、IgM含量較試驗前有所上升，差異有統計學意義（＜0.05）；試驗后試驗組CD4/CD8值，IgG、IgA、IgM含量，較對照組有所上升，差異有統計學意義（＜0.05）。白細胞計數≤4.2×109/L的分層，試驗組試驗后CD4/CD8值、IgG、IgA、IgM含量、白細胞計數較試驗前升高，差異有統計學意義（＜0.05）。試驗組和對照組在試驗前后CD4/CD8值及IgG、IgA、IgM含量均在正常值范圍內，根據《增強免疫力功能評價檢驗方法修訂—有助于維持正常免疫力功能人體試食試驗方法程序》中的判定標準，表明仁和健太易酵素有助于維持正常免疫功能；同時根據方案中的結果判斷標準，表明仁和健太易酵素達到了維持和增強人體免疫功能試驗陽性結果標準的要求。

3.2 不良反應

試驗前后，受試者胸透、腹部B超、心電圖均基本在正常范圍內；血、尿、便常規及肝腎功能各項指標均無顯著性差異，且無過敏反應和其他不良反應發生。說明本品對受試者身體健康無不良影響。

以中藥材為原料的酵素食品在提高抗氧化和抑菌等活性方面比傳統酵素更符合現代人生活特點，服用中藥酵素是全民保健的一個大趨勢[5]。中藥酵素含有的中藥成分經微生物發酵后，能產生多種代謝成分，如大量有機酸、γ-氨基丁酸、維生素、各種氨基酸成分等，以及植物次生代謝產物，如酚類物質和皂苷類物質，風味物質、酶活性等也會發生變化。這些成分具有保健功能，能夠全面改善機體免疫功能，起到強身健體作用，對特定癥狀有顯著的改善作用[6-9]。仁和健太易酵素中的人參、茯苓、大棗、蜂蜜為君藥，具有補中益氣之功效；桑椹、黃精、枸杞為臣藥，具有補腎填精之功效，助君藥益氣；覆盆子、松花粉、甘草為佐使藥，益氣，補腎精，能助君、臣之藥以加強益氣[10]。臨床試驗結果證明，本品具有提升免疫力的作用，為該產品的功能研究與市場開發提供了理論依據。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

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[2] 中國生物發酵產業協會團體標準, 酵素產品分類導則 T/CBFIA 08001-2016 [S]. 2016: 42-46.

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[4] 買歡, 方偉. 免疫功能低下人群流感病毒感染防治進展 [J]. 中華傳染病雜志, 2019, 37(7): 441-445.

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[10] 中國藥典[S]. 一部. 2020: 231-236.

Effects of Renhe Jiantaiyi Enzyme on human T lymphocytes and immunoglobulin

ZHANG Guo-dong1, XU Xiang-rong1, ZHENG Jun-yun1, WANG Jin-qian2, HUANG Wu-jun3, LI Xin3, WANG Hong4

1. Jiangxi Renren Health Industry Co., Ltd., Zhangshu 331200, China 2. Jingdezhen University, Jingdezhen 333000, China 3. Renhe (Group) Development Co., Ltd., Zhangshu 331200, China 4. Tianjin Third Central Hospital, Tianjin 300170, China

To study the effect of Renhe Jiantaiyi Enzyme (仁和健太易酵素) on human T lymphocytes and immunoglobulin, and to evaluate the effect of traditional Chinese medicine enzyme on improving human immunity.The control design and comparison method between groups and before and after the test were used. Renhe Jiantaiyi Enzyme was orally administered for 90 d. The effects of Renhe Jiantaiyi Enzyme on human immunity were observed by the white blood cell count, CD4/CD8 value of T lymphocyte subsets in human peripheral blood and the contents of IgG, IgA and IgM in human serum as indicators.The contents of CD4/CD8, IgG, IgA, IgM and leukocyte count of subjects treated with Renhe Jiantaiyi Enzyme were significantly higher than those of the control group and before the test (< 0.05).This product has the effect of maintaining and enhancing human immunity.

Renhe Jiantaiyi Enzyme; cellular immune; humoral immunity; human immunity; CD4/CD8; immuneglobulin

R285.64

A

0253 - 2670(2022)04 - 1121 - 06

10.7501/j.issn.0253-2670.2022.04.020

2021-10-20

張國棟（1982—），男，碩士，講師，江西樟樹人，主要從事食品發酵與釀造研究。Tel: 18279577366 E-mail: 250746999@qq.com

王金錢，博士，副教授，江西樂平人，主要從事中藥量效關系研究。Tel: 17379828989 E-mail: 157670292@qq.com

[責任編輯 潘明佳]