Ki-67、腫瘤壞死因子-α及糖類抗原125在非霍奇金淋巴瘤患者中的表達及臨床意義

史瑞，溫靜，吳雯，雷小茹，宋艷萍

西安市中心醫院血液內科，西安市血液病研究所，西安 710004

非霍奇金淋巴瘤（non-Hodgkin lymphoma，NHL）是原發于淋巴結與結外淋巴組織的惡性腫瘤，具有高度異質性[1]。早期對NHL做出正確診斷并進行積極治療是提高患者預后的關鍵。以往研究顯示，多種腫瘤標志物聯合檢測可提高對腫瘤患者的臨床診斷價值，而腫瘤標志物水平的改變情況也可為預后評估提供參考[2]。腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、糖類抗原 125（carbohydrate antigen 125，CA125）是臨床中廣泛應用的血清腫瘤標志物，研究顯示，TNF-α水平隨NHL患者病情變化而發生動態改變，TNF-α高表達與NHL患者預后不良有關[3]。CA125是診斷卵巢上皮癌的常用標志物，以往有研究顯示，NHL患者中CA125水平升高，尤其是伴有腹部浸潤者，其CA125水平升高更明顯[4]。細胞增殖是腫瘤發生、發展的基礎，Ki-67屬于細胞核抗原，僅在增殖細胞核中表達，是反映細胞增殖活性的有效指標[5]。基于此，本研究探討Ki-67、TNF-α及CA125在NHL患者中的表達情況，分析三者聯合檢測在NHL診斷及治療中的臨床意義，以期為NHL的臨床診療提供參考依據，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2016年5月至2021年5月西安市中心醫院收治的NHL患者的病歷資料。納入標準：①經病理檢查確診為NHL；②臨床資料完整；③入院后均接受手術、放化療等相關治療。排除標準：①合并其他惡性腫瘤；②入院前接受過放化療等相關治療；③合并心、肝、腎等器官嚴重疾病。依據納入和排除標準，本研究共納入85例NHL患者，作為NHL組。其中，男47例，女38例；年齡30～72歲，平均（46.58±5.95）歲；Ann Arbor分期[6]：Ⅰ～Ⅱ期56例，Ⅲ～Ⅳ期29例；NHL國際預后指數（international prognostic index，IPI）[6]：低危（IPI評分為 0～1分）52例，中高危（IPI評分為2～3分）33例。NHL組患者在入院后完善各種檢查，給予環磷酰胺+多柔比星+長春新堿+潑尼松（CHOP）方案進行治療，化療2個周期后依據《血液病診斷及療效標準》[7]將患者分為緩解組（完全緩解+部分緩解，n=49）和未緩解組（疾病穩定+疾病進展，n=36）。另選取西安市中心醫院收治的淋巴結反應性增生患者37例，作為對照組。其中，男20例，女17例；年齡30～73歲，平均（46.74±5.87）歲。兩組患者的性別、年齡比較，差異均無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經醫院倫理委員會審批通過，所有患者均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 Ki-67、TNF-α及CA125檢測方法

NHL組患者在確診后空腹狀態下抽取靜脈血5 ml，對照組患者在檢查當日空腹狀態下抽取靜脈血5 ml，均于離心后獲取上清液用于TNF-α和CA125檢測，并獲取兩組患者的病理組織標本用于Ki-67檢測。采用酶聯免疫吸附試驗檢測TNF-α水平，采用免疫化學發光法檢測CA125水平。采用免疫組化染色法檢測Ki-67水平，Ki-67定位于細胞核內，出現黃色或棕黃色顆粒為陽性，以標記指數（labeling index，LI）表示Ki-67水平：取組織芯片中200個腫瘤細胞，計算陽性細胞所占百分比。

1.3 觀察指標

比較NHL組和對照組患者的Ki-67、TNF-α及CA125表達情況；比較不同臨床特征NHL患者的Ki-67、TNF-α及CA125表達情況；比較緩解組和未緩解組患者的Ki-67、TNF-α及CA125表達情況；分析Ki-67、TNF-α、CA125單獨及聯合檢測對NHL的診斷價值。

1.4 統計學方法

采用SPSS 20.0軟件對數據進行統計分析，計量資料以均數±標準差（±s）表示，組間比較采用t檢驗；計數資料以例數和率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗；采用Kappa一致性檢驗分析Ki-67、TNF-α、CA125單獨及聯合檢測對NHL的診斷價值；以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 NHL組和對照組患者Ki-67、TNF-α及CA125表達情況的比較

NHL組患者的Ki-67、TNF-α及CA125水平均明顯高于對照組，差異均有統計學意義（P＜0.01）。（表 1）

表1 NHL組和對照組患者Ki-67、TNF-α及CA125表達情況的比較（x± s）

2.2 不同臨床特征NHL患者Ki-67、TNF-α及CA125表達情況的比較

Ⅲ～Ⅳ期NHL患者的Ki-67、TNF-α及CA125水平均明顯高于Ⅰ～Ⅱ期患者，差異均有統計學意義（t=12.907、10.065、17.179，P＜0.01）；中高危 NHL患者的Ki-67、TNF-α及CA125水平均明顯高于低危患者，差異均有統計學意義（t=6.955、6.136、15.453，P＜0.01）。（表2）

表2 不同臨床特征NHL患者的Ki-67、TNF-α及CA125表達情況

2.3 緩解組和未緩解組患者Ki-67、TNF-α及CA125表達情況的比較

治療前，緩解組和未緩解組患者的Ki-67、TNF-α及CA125水平比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）；治療后，緩解組患者的Ki-67、TNF-α及CA125水平均低于本組治療前及未緩解組，差異均有統計學意義（P＜0.05）；治療前后未緩解組患者的Ki-67、TNF-α及CA125水平比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）。（表3）

表3 治療前后緩解組和未緩解組患者Ki-67、TNF-α及CA125表達情況的比較（±s）

表3 治療前后緩解組和未緩解組患者Ki-67、TNF-α及CA125表達情況的比較（±s）

注：a與本組治療前比較，P＜0.05；b與未緩解組治療后比較，P＜0.05

組別緩解組（n=49）未緩解組（n=36）時間治療前治療后治療前治療后Ki-67（%）31.29±7.11 18.62±5.46a b 30.61±7.55 29.86±7.84 TNF-α（pg/ml）38.16±10.55 21.64±10.13a b 39.52±10.34 36.71±10.16 CA125（U/ml）44.51±10.65 14.21±5.84a b 45.57±10.17 42.16±10.74

2.4 Ki-67、TNF-α、CA125單獨及聯合檢測對NHL的診斷價值

Ki-67單獨檢測診斷NHL的靈敏度、特異度、準確度分別為 78.82%（67/85）、70.27%（26/37）、76.23%（93/122），TNF-α單獨檢測診斷NHL的靈敏度、特異度、準確度分別為81.18%（69/85）、81.08%（30/37）、81.15%（99/122），CA125單獨檢測診斷NHL的靈敏度、特異度、準確度分別為72.94%（62/85）、64.86%（24/37）、70.49%（86/122），三者聯合檢測診斷NHL的靈敏度、特異度、準確度分別為98.82%（84/85）、89.19%（33/37）、95.90%（117/122），其中三者聯合檢測的靈敏度、特異度、準確度均高于各指標單獨檢測（表 4）。Ki-67、TNF-α、CA125單獨及聯合檢測診斷NHL與病理結果的Kappa值分別為0.531、0.604、0.481、0.788，其中三者聯合檢測與病理結果的一致性最好。

表4 Ki-67、TNF-α、CA125單獨及聯合檢測診斷NHL的結果與病理結果的對照

3 討論

臨床中NHL的治療以多學科聯合的綜合治療為主，因此，早期準確地診斷NHL對患者治療方式的選擇及預后均具有重要意義。

Ki-67水平在細胞周期中的M期達到高峰，M期后Ki-67被迅速降解或丟失抗原決定簇，Ki-67單克隆抗體可標記G1后期、S期、G2期及M期細胞抗原，是評估腫瘤增殖性的常用指標，其陽性表達提示細胞正處于增殖旺盛狀態[8]。研究顯示，惡性程度高、預后不良、發生轉移的惡性腫瘤患者中Ki-67均為高表達[9]。本研究結果顯示，NHL組患者的Ki-67水平明顯高于對照組，Ⅲ～Ⅳ期、中高危NHL患者的Ki-67水平分別明顯高于Ⅰ～Ⅱ期、低危患者，說明Ki-67可客觀反映NHL細胞的增殖情況，對NHL侵襲性的評估具有一定的參考價值，其表達升高意味著腫瘤細胞增殖旺盛，從而導致NHL的侵襲性增加。有研究指出，Ki-67是評估NHL患者預后的獨立預測指標[10]。本研究中，治療后未緩解組患者的Ki-67水平高于緩解組患者，提示Ki-67升高可能預示患者預后不良。

TNF-α是單核-巨噬細胞被激活后分泌的一種細胞因子。研究證實，TNF-α對腫瘤的作用具有雙向性，可殺傷腫瘤細胞，也可促進腫瘤細胞增殖、浸潤[11-12]。有研究顯示，NHL患者血液中的TNF-α水平隨著病情進展而發生改變，TNF-α水平高的患者預后不良的概率較高[13]。本研究結果顯示，NHL組患者的TNF-α水平明顯高于對照組，Ⅲ～Ⅳ期、中高危NHL患者的TNF-α水平分別明顯高于Ⅰ～Ⅱ期、低危患者，說明TNF-α水平升高可能與NHL患者的臨床分期、侵襲性有關。本研究中，治療后未緩解組患者的TNF-α水平高于緩解組患者，說明TNF-α可有效反映患者的治療效果，在臨床中可作為監測治療效果的輔助指標。

CA125在臨床中多用于卵巢癌、宮頸癌等惡性腫瘤的診斷，在腫瘤治療效果及預后評估中均具有一定的應用價值。有研究顯示，NHL患者的CA125水平明顯升高，治療后完全緩解時CA125水平降低，復發患者中CA125水平又呈上升趨勢，因此認為CA125與NHL的發生、發展有關[14]。也有研究發現，NHL患者中CA125水平升高與疾病進展有關，存在巨大包塊、腫瘤負荷大、有胸腔積液的患者CA125水平升高更明顯[15]。本研究結果與上述結果一致，NHL患者中CA125水平升高，且與患者的臨床分期、侵襲性有關，同時其水平升高預示患者預后不良。目前有關Ki-67、TNF-α、CA125聯合檢測對NHL診斷價值的研究較少，本研究發現，Ki-67、TNF-α、CA125聯合檢測診斷NHL的靈敏度、特異度及準確度均高于各指標單獨檢測，且與病理結果的一致性較好，說明聯合檢測對NHL的診斷價值更高，可為臨床診斷提供更全面的參考信息。

綜上所述，Ki-67、TNF-α及CA125水平與NHL患者的臨床分期、腫瘤侵襲性及預后密切相關，三者聯合檢測對NHL的早期診斷及臨床治療具有重要的指導意義。