2018－2020 年唐山市南美白對蝦苗種專項疫病監測結果及分析

李向新，蔣 丹，劉建朝，蘇文清，張 潔，張 玨

(1.唐山市水產技術推廣站，河北 唐山 063000；2.唐山市曹妃甸區農業農村局，河北 唐山 063000；3.唐山市豐南區農業農村局，河北 唐山 063000)

2001 年唐山市引入南美白對蝦進行小規模池塘養殖試驗，2003 年開始在全市范圍內進行全面推廣，目前已成為唐山市對蝦養殖主要品種之一，養殖面積達10 萬余畝，年產量1.5 萬噸以上。養殖模式由單一的池塘養殖發展為池塘養殖、鹽田晾水池養殖、小棚養殖、工廠化養殖等多種模式。隨著南美白對蝦養殖的迅猛發展，苗種產業也快速發展起來。經調研，唐山現擁有南美白對蝦苗種場近百家，育苗水體約18萬米3，年產蝦苗200多億尾，除滿足唐山的苗種需求外，還銷往天津及河北省周邊地市。由于唐山地處溫帶，南美白對蝦繁育的成本較高，因此唐山的南美白對蝦苗種場主要從海南、廣東、福建等地引進P5仔蝦進行標粗，苗種品質無法把控。

為了解和掌握南美白對蝦苗種主要疫病的基本狀況，對唐山市水生動物疫病風險評估、疫病預警、疫病防控及水產苗種產地檢疫提供科學依據，2018－2020 年唐山市水產技術推廣站針對目前常見及影響最大的白斑綜合征(White spot disease，WSD)、傳染性皮下及造血器官壞死病(Infectious hypodermal and haematopoietic necrosis，IHHN)、急性肝胰腺壞死病(Acute hepatopancreatic necrosis disease，AHPND)、蝦肝腸胞蟲病(Enterocytozoon hepatopenaei disease，EHPD)、蝦虹彩病毒病(Shrimp hemocyte iridescent virus disease，SHIVD)共 5 種疫病及新發重大疾病，開展了唐山市南美白對蝦苗種專項疫病監測工作，從每年的4月下旬開始至5月下旬結束，3 年累計監測苗種場294 批次，檢測苗種樣品1 400份。

一、材料和方法

1.樣品來源

樣品來自唐山市南美白對蝦苗種主產區，主要集中在豐南區和曹妃甸區。按照《水生動物產地檢疫采樣技術規范》(SC/T 7103－2008)的規定進行隨機抽樣，每份樣品的數量不少于150尾，將采集的南美白對蝦苗裝入一次性無菌采樣袋中，密封編號后低溫保存，運輸至實驗室。

2.樣品前處理

將采集的蝦苗樣品研磨后裝入無DNase 和RNase 的離心管中，直接檢驗或-20℃下冷凍保存備檢。

3.主要試劑和儀器設備

(1)主要試劑：DNA 提取試劑盒(TOYOBO，日本)、一步法熒光定量PCR 試劑盒(QIAGEN，德國)、2×Taq Master Mix(Generay，上海)、引物及探針(Generay，上海)、陽性標準物質(中國水產科學研究院黃海水產研究所)。

(2)主要儀器設備：實時熒光定量PCR 儀(ABI Q3)、 梯 度 PCR 儀 (ABI Veriti 96、 BIO- RAD T100)、臺式冷凍離心機(eofuge 13R)、水平電泳儀(BG-subMIDI)、凝膠成像系統(Azure C200)等。

4.檢測方法

蝦類疫病檢測方法詳見表1。

表1 蝦類疫病檢測方法

二、結果與分析

1.苗種場監測情況

2018－2020 年累計監測南美白對蝦苗種場294 批次，檢出陽性場86 批次。2018 年監測苗種場70批次，檢出陽性場10批次，陽性場檢出率為14.29%；2019 年監測苗種場99 批次，檢出陽性場24 批次，陽性場檢出率為24.24%，比上年增長9.95 個百分點；2020 年監測苗種場125 批次，檢出陽性場52 批次，陽性場檢出率為41.60%，比上年增加17.36個百分點。

2.苗種檢測情況

2018－2020 年累計檢測南美白對蝦苗種1 400 份，檢出陽性樣品103 份。2018 年檢測樣品280 份，檢出陽性樣品14 份，陽性樣品檢出率為5.00%；2019 年檢測樣品495 份，檢出陽性樣品27 份，陽性樣品檢出率為5.45%，比上年增長0.45 個百分點；2020 年檢測樣品625 份，檢出陽性樣品62份，陽性樣品檢出率為9.92%，比上年增長了4.47個百分點。

(1)白斑綜合征病毒(WSSV)檢測。3 年累計檢測樣品294份，檢出陽性樣品2份。2018年檢測樣品70 份，檢出陽性樣品2 份，陽性樣品檢出率為2.86%；2019 檢測樣品99 份，檢出陽性樣品0 份，陽性樣品檢出率為0，同比下降2.86 個百分點；2020年檢測樣品125份，檢出陽性樣品0份，陽性樣品檢出率為0，同比持平。

(2)傳染性皮下和造血器官壞死病毒(IHHNV)檢測。3 年累計檢測樣品294 份，檢出陽性樣品26 份。2018 年檢測樣品70 份，檢出陽性樣品6 份，陽性樣品檢出率為8.57%；2019 年檢測樣品99 份，檢出陽性樣品8 份，陽性樣品檢出率8.08%，同比下降0.49個百分點；2020年檢測樣品125 份，檢出陽性樣品12 份，陽性樣品檢出率為9.60%，同比上升1.52個百分點。

(3)急性肝胰腺壞死性弧菌(VpAHPND)檢測。3 年累計檢測樣品294 份，檢出陽性樣品4 份。2018 年檢測樣品70 份，檢出陽性樣品1 份，陽性樣品檢出率為1.43%；2019 年檢測樣品99 份，檢出陽性樣品1 份，陽性樣品檢出率為1.01%，同比下降0.42 個百分點；2020 年檢測樣品125 份，檢出陽性樣品2 份，陽性樣品檢出率為1.60%，同比上升0.59個百分點。

(4)蝦肝腸胞蟲(EHP)檢測。3年累計監測樣品294 份，檢出陽性樣品56 份。2018 年檢測樣品70 份，檢出陽性樣品5 份，陽性樣品檢出率為7.14%；2019 年檢測樣品99 份，檢出陽性樣品14 份，陽性樣品檢出率為14.14%，同比上升7.00 個百分點；2020 年檢測樣品125 份，檢出陽性樣品37 份，陽性樣品檢出率為29.60%，同比上升15.46個百分點。

(5)蝦虹彩病毒(SHIV)檢測。兩年累計檢測樣品224 份，檢出陽性樣品15 份。2019 年檢測樣品99 份，檢出陽性樣品4 份，陽性樣品檢出率為4.04%；2020 年檢測樣品125 份，檢出陽性樣品11 份，陽性樣品檢出率為8.80%，同比上升4.76個百分點。

三、結論

從南美白對蝦苗種專項疫病監測結果看，陽性場檢出率和陽性樣品檢出率均呈逐年上升趨勢。從南美白對蝦苗種專項疫病病原檢測結果看，WSSV 和VpAHPND 陽性樣品檢出率相對較低，IHHN、EHP和SHIV陽性樣品檢出率相對較高。WSSV陽性樣品檢出率呈下降趨勢，IHHN 和VpAHPND 陽性樣品檢出率均呈小幅波動趨勢，EHP和SHIV陽性樣品檢出率均呈大幅上升趨勢(圖1)。

圖1 疫病變化趨勢

四、建議

從3年的監測情況看，常見疫病仍然存在，新發重大疾病不斷出現，且發現同一份樣品檢出兩種以上疫病病原的現象，嚴重影響南美白對蝦養殖業的健康發展，應引起養殖者的高度重視。建議養殖者從以下幾個方面做好疫病防控工作。

一是引進或選育SPF種蝦、蝦苗，從源頭切斷疫病的傳播途徑。二是重視南美白對蝦苗種的產地檢疫，力爭做到“引苗必采、采樣必檢”。三是做好養殖環境和投入品的消殺工作，防止因環境消毒不徹底或投入品攜帶病原感染蝦苗。四是對陽性場和陽性樣品采取“隔離、撲殺、消毒、無害化處理”等措施，以控制病原擴散及避免疫情擴大，最大程度降低經濟損失和養殖風險。