CD138的表達對慢性子宮內膜炎合并不孕癥的診斷價值

胡蕾蕾，吳東恩，張梅芳，黃惠蘭，陳芷菲，朱珊珊

河源市婦幼保健院病理科，廣東 河源 517000

子宮內膜炎為婦科常見疾病，其中急性子宮內膜炎所致的盆腔區域疼痛、月經過多、白帶增多、痛經等表現較明顯，診治較容易。慢性子宮內膜炎的病程較長，治療不徹底易復發，從而影響患者生活質量[1]，且慢性子宮內膜炎缺乏典型癥狀，臨床易被忽視。近年來研究發現子宮內膜炎癥能夠導致宮腔微環境改變，影響胚胎著床，導致不孕、種植失敗、流產等不良妊娠結局[2]。田海英等[3]研究也發現，不明原因的不孕不育和反復流產與慢性子宮內膜炎有直接關系。免疫組織化學染色檢查是診斷此類疾病的重要手段，子宮內膜中有組織細胞、淋巴細胞及漿細胞浸潤，其中以漿細胞的診斷價值最高[4]。CD138為漿細胞的特異性表層抗原，其免疫組織化學染色檢查能夠有效顯示漿細胞，提高慢性子宮內膜炎的診斷效能[5]。本研究通過分析CD138在慢性子宮內膜炎合并不孕患者中的表達，推測其表達和不孕癥患者的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2019年7月至2020年6月在河源市婦幼保健院接受子宮內膜活檢的85例不孕癥患者為研究對象，所有患者均接受蘇木精伊紅染色，依據蘇木精伊紅染色形態學診斷結果將所有患者分為慢性子宮內膜炎陰性組(簡稱陰性組，n=38)，慢性子宮內膜炎疑似組(簡稱疑似組，n=31)和慢性子宮內膜炎陽性組(簡稱陽性組，n=16)。納入標準：①患者均已婚，未避孕情況下規律性生活超過1年以上，且未懷孕；②月經周期及性激素正常；③無輸卵管積液、卵巢腫瘤及子宮肌瘤等；④就診前2 d內無陰道用藥史；⑤均接受蘇木精伊紅染色和免疫組化染色檢查。排除標準：①男方因素不孕或輸卵管因素不孕或不明原因不孕，合并盆腔器質性病變；②其他生殖道感染。慢性子宮內膜炎陰性組患者年齡24~39歲，平均(30.19±2.77)歲；月經周期21~35 d，平均(28.75±2.11)d；不孕時間2~9年，平均(5.67±1.22)年。慢性子宮內膜炎疑似組患者年齡23~39歲，平均(30.34±2.84)歲；月經周期20~36 d，平均(28.52±2.18)d；不孕時間2~10年，平均(5.52±1.03)年。慢性子宮內膜炎陽性組患者年齡23~40歲，平均(30.91±2.65)歲；月經周期21~35 d，平均(29.03±1.96)d；不孕時間2~9年，平均(5.74±1.03)年。三組患者的基線資料比較差異均無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經醫院醫學倫理委員會審核批準，所有患者知情并簽署知情同意書。

1.2 檢查方法 采集所有患者子宮內膜活檢組織，予以10%中性福爾馬林液固定，脫水，常規石蠟包埋和切片。(1)蘇木精伊紅染色檢查：將切片脫蠟，并浸入蘇木蘇染色，脫水后用中性樹膠封片，于顯微鏡下觀察。(2)免疫組織化學染色檢查：采用羅氏BenchMark GX全自動免疫組化染色儀，嚴格按照說明書設置染色程序，進行自動免疫組織化學檢測。染色按照要求在每張玻片上設陽性對照。所用抗體CD138購自福州邁新生物技術開發公司。二氨基聯苯胺(DAB)顯色，蘇木精對比染色。

1.3 結果判定 (1)蘇木精伊紅染色判定：子宮內膜間質可見漿細胞為慢性子宮內膜炎陽性；子宮內膜間質中可見纖維化伴淋巴細胞浸潤，但無漿細胞為慢性子宮內膜炎疑似；無以上表現為慢性子宮內膜炎陰性。(2)免疫組化染色判定：CD138定位于細胞質和細胞膜，漿細胞細胞質弱陽性，細胞膜強陽性。每個400倍高倍鏡視野下子宮內膜間質中可見≥5個典型漿細胞診斷為慢性子宮內膜炎。CD138免疫組化染色中無漿細胞或400倍高倍鏡下漿細胞<5個為非慢性子宮內膜炎[6]。

1.4 隨訪觀察 所有慢性子宮內膜炎疑似者和陽性者均予以常規抗炎治療，通過門診及電話訪問等方式隨訪至少6個月，記錄患者妊娠情況。

1.5 統計學方法 應用SPSS18.0軟件進行數據分析。計量資料符合正態分布，以均數±標準差(x-±s)表示，組間比較采用t檢驗，計數資料比較采用χ2檢驗。均以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 陰性組、疑似組和陽性組患者的CD138表達水平比較 陽性組患者的CD138陽性率明顯高于疑似組和陰性組，且疑似組患者的CD138陽性率明顯高于陰性組，差異均有統計學意義(P<0.05)，見表1和圖1。

表1 陰性組、疑似組和陽性組患者的CD138表達水平比較[例(%)]

圖1 CD138免疫組織化學染色檢查(均為40×10)

2.2 CD138陰性組與陽性組患者的妊娠情況比較 經6個月隨訪，CD138陽性組患者的妊娠率為36.00%(9/25)，明顯高于CD138陰性組的11.67%(7/60)，差異有統計學意義(χ2=5.388，P<0.05)。

3 討論

慢性子宮內膜炎為婦科常見疾病之一，大部分患者缺乏特異性癥狀，也無典型的宮腔鏡下表現，臨床診斷率較低。有研究報道[7]，近年來子宮內膜炎的發生率呈上升趨勢。最近有研究表明[8]，炎癥細胞存在細胞毒作用，能夠降低精子活動力或引起精子死亡，減少輸卵管中精子數量，影響生育，導致不孕。另外，引起炎癥的病原體又可激發機體免疫反應，并生成抗體，刺激大量炎性細胞及細胞因子的釋放，不利于孕卵著床和胎盤植入及胚胎發育[9]。又有文獻報道，慢性子宮內膜炎可影響子宮內膜容受性，為不孕癥的危險因素之一，其胚胎轉移著床率顯著低于未合并慢性子宮內膜炎不孕者[10]。但目前臨床有關慢性子宮內膜炎合并不孕癥缺乏統一認識及有效處理。

子宮內膜間質細胞中的漿細胞在慢性子宮內膜炎的組織學診斷中有重要作用。但傳統蘇木精伊紅染色時漿細胞的可見度較低，加上漿細胞易與子宮內膜間質的單核細胞及纖維細胞混淆，另外分泌期提取的內膜組織存在間質細胞密度增加及腺上皮水腫樣變化，不利于漿細胞鑒別[11]。以上結果表明蘇木精伊紅染色在漿細胞識別上可能存在一定程度的主觀判斷偏差，影響臨床診斷準確性。

近年來有研究提出CD138作為配體聚糖，是漿細胞的良好標記物，能夠直接檢測漿細胞，并可排除形態類似細胞的影響，為慢性子宮內膜炎的診斷提供參考依據[12]。生理狀態下成人子宮內膜組織中的CD138僅在上皮細胞表達，間質細胞不表達CD138，從而維持子宮內膜上皮細胞。有國外文獻表明[13]，CD138免疫組織化學染色檢查對內膜間質中漿細胞的識別價值較高。CD138能夠結合趨化因子，誘導中性粒細胞在炎癥部位聚集，并抑制T細胞遷移，又可調節機體白細胞-內皮細胞反應，從而參與炎癥反應，導致滋養層的遷移及侵襲[14]。多種病原菌能夠導致宿主細胞表層CD138分子從外功能區脫落，從而增強自身毒性作用。子宮內膜受損時上皮細胞膜外的CD138分子發生脫落，并與細菌或成纖維細胞結合，參與機體內膜組織修復和炎癥反應。

本研究中85例不孕癥患者均進行了免疫組織化學染色檢查，其中慢性子宮內膜炎陽性患者CD138陽性率顯著高于可疑組及陰性組，間接提示疑似慢性子宮內膜炎標本經蘇木精伊紅染色無法識別漿細胞時，CD138免疫組織化學染色檢查能夠有效顯示漿細胞，從而易于分辨漿細胞，利于慢性子宮內膜炎的診斷。建議在常規蘇木精伊紅染色基礎上聯合CD138免疫組織化學染色檢查，以彌補形態學檢查的不足，減少蘇木精伊紅染色的誤診和漏診。對于懷疑慢性子宮內膜炎患者建議其進行CD138免疫組織化學染色檢查，進一步明確診斷。另外本研究觀察發現，CD138陽性者妊娠率顯著高于CD138陰性者，考慮通過分析CD138免疫組織化學染色檢查能夠指導慢性子宮內膜炎不孕癥患者的臨床治療，從而改善患者生殖預后。

綜上所述，臨床通過免疫組織化學染色檢查CD138的表達情況可有效識別子宮內膜中漿細胞，為慢性子宮內膜炎合并不孕癥的診斷提供參考依據，從而對不孕癥的治療可能有一定指導價值。但本研究的樣本量有限，且觀察指標不夠全面，CD138表達在慢性子宮內膜炎合并不孕癥中的價值仍有待更多大規模、多中心的研究進一步論證及分析。