基于裂殖酵母的蒙醫(yī)藥抗真菌作用研究

烏仁圖雅,劉倩楠,房 月,霍萬學,席琳圖雅

(1. 錫林郭勒職業(yè)學院,內(nèi)蒙古 錫林郭勒市 026000; 2. 內(nèi)蒙古蒙醫(yī)藥工程技術研究院,通遼市 028000; 3. 內(nèi)蒙古民族大學,內(nèi)蒙古 通遼市 028000; 4. 中國醫(yī)科大學藥學院微生物與生化藥學,遼寧 沈陽市 110001; 5. 錫林郭勒盟蒙醫(yī)醫(yī)院,內(nèi)蒙古 錫林郭勒市 026000)

近年來在國家和地方的大力支持下蒙醫(yī)藥在防病、治病和醫(yī)學科研等方面得到跨越式的發(fā)展。但通過文獻檢索發(fā)現(xiàn),蒙藥抗真菌作用研究方面的報道較少,內(nèi)容不夠深入,局限于體外實驗及抗菌效果的觀察等諸多問題。本文通過閱讀國內(nèi)外真菌研究相關文獻,對蒙藥抗真菌作用研究現(xiàn)狀進行綜述,并為研發(fā)抗真菌蒙藥提供新的策略。

1 抗真菌藥物研究的意義

近幾十年來隨著癌癥化療、器官移植和免疫抑制等醫(yī)療干預措施以及艾滋病毒感染的增多,使真菌感染率明顯增加,發(fā)病率在1%～47%[1]。尤其是侵蝕性真菌感染的致死率較高,毛霉菌(40%～80%)[2]、白色念珠菌(20～40%)[3]、曲霉菌(50～90%)、新型隱球菌(20～70%)[4]。真菌感染全球死亡率為10～49%[5]。真菌感染已成為威脅人類生命健康的全球公共衛(wèi)生問題。目前,常用的抗真菌藥物主要有針對麥角甾醇合成(唑類)、麥角甾醇本身(多烯類)或細胞壁合成(棘白菌素類)等[6]。然而,隨著抗真菌藥物的大量應用,肝毒性、腎毒性、神經(jīng)毒性和骨髓毒性等毒副作用及真菌耐藥率等問題日趨增加,給臨床治療真菌感染帶來了極大的困難,并引起了國內(nèi)外研究者們的廣泛關注[7]。利用現(xiàn)有的藥物資源或開發(fā)新藥是治療真菌感染的重要思路。

2 真菌感染屬于蒙醫(yī)“粘”蟲病

蒙醫(yī)學理論中致病蟲類可分肉眼能見者和肉眼不能見者兩類。肉眼看不見的“粘蟲”引起的叫“粘”蟲病。粘蟲病感染之途徑,經(jīng)鼻腔、皮膚小傷或汗腺而進入人體,或隨飲食鉆入人體。有些粘蟲感染與季節(jié)有關,如春夏秋及其后溫暖或炎熱時節(jié),粘蟲病易于流行。此外,粘蟲借血液行流竄至某一器官及部位引起不同的“粘”蟲病,并且還能使原有的其他疾病發(fā)作和加重。因此,病毒、細菌和真菌等微生物感染的疾病屬于蒙醫(yī)理論粘蟲病的范疇。

蒙醫(yī)“蒙醫(yī)金匱”、“哲對寧諾爾”、“甘露四部”和“醫(yī)法之海”等古籍中都有記載“粘”蟲病的概念及其治療方案,其中“醫(yī)法之海”的記載最詳細。“醫(yī)法之海”中把粘蟲病分為18類,并詳細記載其治療方案,從中我們整理出56種殺“粘”作用的復方,巴特爾七味丸、巴特爾五味丸、嘎如迪-5、嘎如迪-9、嘎如迪-13、木香-10、云香-11等[8]。這提示我們,需要進一步從蒙醫(yī)古籍中發(fā)掘治療“粘”蟲病的方子,并需要研究證明這些方子的抗真菌作用及其作用機制,為我國的衛(wèi)生防控提供重要價值。

3 蒙醫(yī)藥抗真菌作用臨床研究與實驗研究

蒙藥的抗真菌作用研究從上世紀九十年代初開始。包德必力格[9]等用蒸餾水提取的60種蒙藥水煎劑通過實驗發(fā)現(xiàn)有22種蒙藥對14種皮膚癬菌的抑真菌作用。李東霞[10]等通過體外實驗發(fā)現(xiàn)大花葵、石榴、萵苣及芫荽等四種蒙藥對紅色毛癬菌、須癬毛癬菌、犬小孢子茵、白色念珠菌和糠秕馬拉色菌等致病真菌的均有一定程度的抑制真菌作用。通過形態(tài)學結果的分析,初步可以判斷大花葵作用于細胞壁。提示,為大花葵的抗真菌作用機制研究提供實驗依據(jù)。穰真[11]等研究發(fā)現(xiàn)11種蒙藥對5種馬拉色菌有一定程度的抑菌作用,其中石榴種子乙醇提取物對馬拉色菌株抑菌作用最強。李文媛[12]通過研究發(fā)現(xiàn)蒙藥玉簪花的乙酸乙酯部位和正丁醇部位為玉簪花抗菌活性最佳。提示,對這兩個部位中含有抗真菌活性成分。王星[13]等的研究蒙藥朱如拉提取物及線葉菊提取物分別顯著抑制紅色毛癬菌和馬拉色菌的生長。提示,這兩種蒙藥中含有抗真菌活性成分,需要進一步深入研究。霍萬學[14]通過體外實驗發(fā)現(xiàn)蒙藥土茯苓湯合劑具有較強的抗真菌作用,并能有效延長白假絲酵母菌感染小鼠的壽命。因此,土茯苓湯合劑可能為臨床治療真菌感染有一定的作用。包桂蘭[15]等研究發(fā)現(xiàn)蒙藥嘎日迪-13浸膏粉和云香十五味浸膏顯著抑制小鼠皮膚由粉小孢子菌和石膏樣小包子菌引起的真菌感染。提示,這兩種蒙藥顯著抑制皮膚真菌感染,嘎日迪-13和云香十五散味,用于殺“粘”的口服藥物。因此,這兩種蒙藥具有開發(fā)治療深部真菌感染藥物的潛能。烏日娜[16]等通過體外實驗發(fā)現(xiàn)蒙藥三子湯洗劑能夠抑制羊毛狀小孢子菌、石膏樣小孢子菌、紅色毛癬菌、青霉菌和白色念珠菌等真菌的生長。研究提示,蒙藥三子湯洗劑具有良好的抑制真菌作用。

目前,蒙藥復方的體外抗真菌實驗、動物實驗和臨床療效等研究提示,蒙藥中含有抗真菌活性成分。蒙藥復方多見于淺部皮膚真菌感染的臨床療效方的報道,尤其是對深部真菌感染需要進行進一步深入研究。對蒙藥抗真菌作用機制的研究報道少見,尤其是抗真菌有效活性成分的分離、鑒定、抗真菌作用機制等方面的研究報道極少,有待于系統(tǒng)的深入研究。

4 結論

蒙藥成分相對復雜,尤其是復方制劑,物質基礎不清晰、作用靶點不確切,而且大部分都是口服藥。常規(guī)的動物實驗影響因素眾多,不利于分子機制分析。裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe,S.pombe)又稱為Fission yeast,是真菌的一種,具有簡單、經(jīng)濟、整體、直觀的特點,能較好的將藥物靶點研究與表型研究有機結合起來。房月等[17]用粟酒裂殖酵母缺失株文庫進行篩選,揭示了與麥角甾醇生物合成抑制劑的細胞反應相關的分子途徑,這些篩選到的基因可能為開發(fā)使細胞對這些藥物敏感的策略提供有用的信息。此外,用于治療乳腺癌的選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑他莫昔芬具有抗真菌活性,以裂殖酵母為模式生物探討了其抗真菌作用機制。研究發(fā)現(xiàn),calmodulin-calcineurin通路和麥角甾醇生物合成與他莫昔芬的抗真菌作用有關,并為其抗真菌發(fā)展和聯(lián)合治療真菌疾病提供了新的靶點[18]。周鑫等[19]研究發(fā)現(xiàn),兩性霉素B和免疫抑制劑FK506分別聯(lián)合米卡芬凈對野生型酵母細胞的抑制活性明顯高于單獨使用米卡芬凈,而氟康唑與米卡芬凈之聯(lián)合使用沒有協(xié)同作用。這些發(fā)現(xiàn)為臨床治療真菌感染的新藥物組合提供了科學依據(jù)。

現(xiàn)階段蒙醫(yī)藥單味藥及復方的抗真菌研究報道極少、研究進展較慢,尤其是分子生物學或抗真菌機制方面的研究尚不多見。在今后的抗真菌蒙藥研究中應該用高效、簡便、快捷的研究方法篩選抗真菌活性成分,研發(fā)低毒、高效的新藥。因此,裂殖酵母為模式生物研究蒙藥的抗真菌作用研究可能帶來新的思路和研究方法。

綜上所述,抗真菌蒙藥還未進行系統(tǒng)性篩選,蒙藥與抗真菌藥物的協(xié)同作用研究基本處于空白,能得到安全、有效、可控的增效劑,也是蒙藥抗真菌作用研究的重要內(nèi)容。在今后的研究中需要建立完善的蒙藥抗真菌作用研究的動物和體外模型、抗真菌蒙藥的臨床數(shù)據(jù)庫,提取更多的具有明確臨床療效價值的蒙藥單體成分,蒙藥抗真菌作用研究才能發(fā)揮其優(yōu)勢。