粗脂肪的提取和定量測(cè)定的對(duì)比研究

毛一博 吳怡昌

摘 要：脂肪組織中，測(cè)定脂肪所占比例的實(shí)驗(yàn)方法有很多種，結(jié)合現(xiàn)有實(shí)驗(yàn)條件，嘗試使用三種沸點(diǎn)石油醚，采用索氏提取法對(duì)肥肉中的粗脂肪進(jìn)行提取，從而分析出豬肉組織中粗脂肪的含量。同時(shí)，將采用氣相色譜分析法得到的數(shù)據(jù)與三種沸點(diǎn)石油醚得到的數(shù)據(jù)及提取速度做了比對(duì)，得出相應(yīng)的結(jié)論，為類(lèi)似的課題實(shí)驗(yàn)提供了具有一定參考價(jià)值的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

關(guān)鍵詞：粗脂肪；提取；定量測(cè)定；對(duì)比研究

據(jù)人民網(wǎng)等媒體報(bào)道，一項(xiàng)研究報(bào)告稱(chēng)，中國(guó)目前肥胖人口達(dá)3.25億人，增幅超過(guò)美國(guó)、英國(guó)和澳大利亞。這個(gè)數(shù)字在未來(lái)20年還可能增加一倍，并有加速提高的趨勢(shì)。肥胖癥常常會(huì)伴發(fā)多種慢性疾病，是嚴(yán)重影響人們健康和生活質(zhì)量的疾病之一，已成為世界各國(guó)面臨的嚴(yán)重公共健康問(wèn)題。專(zhuān)家指出，肥胖癥、艾滋病、吸毒和酗酒共同組成了新的四大社會(huì)醫(yī)學(xué)難題。開(kāi)展與肥胖相關(guān)的課題研究是當(dāng)前很多學(xué)者義不容辭的任務(wù)。本文通過(guò)運(yùn)用索氏提取法、氣相色譜法來(lái)探究粗脂肪的提取和含量測(cè)定，從而為研究肥胖相關(guān)的課題提供參考。

一、實(shí)驗(yàn)過(guò)程

（一）索氏提取法

1.實(shí)驗(yàn)方法

索氏提取法：以索氏提取器為提取儀器，一般采用低沸點(diǎn)有機(jī)溶劑（石油醚）回流抽提，除去樣品中的粗脂肪，以樣品與殘?jiān)亓恐睿?jì)算粗脂肪含量。由于有機(jī)溶劑的抽提物中除脂肪外，還或多或少含有游離脂肪酸、甾醇、磷脂、蠟及色素等類(lèi)脂肪物質(zhì)，因而抽提法測(cè)定的結(jié)果只能是粗脂肪。

2.實(shí)驗(yàn)儀器和設(shè)備

索氏抽提器、水浴鍋、鐵架臺(tái)、分析天平、濾紙、研缽、培養(yǎng)皿、攪拌機(jī)、干燥箱、蒸餾儀器、試管、燒杯、玻璃棒、鐵架臺(tái)、50 ml燒杯、250 ml燒杯、500 ml燒杯、酒精燈、藥匙、鑷子、膠頭滴管、10 ml量筒、小漏斗、架盤(pán)天平、表面皿、pH試紙、溫度計(jì)。

3.材料和試劑

新鮮豬肥肉末40 g、Na2SO4溶液、石油醚（沸點(diǎn)為30℃～60℃、60℃～90℃和90℃～120℃）等。

4.索氏抽提器的結(jié)構(gòu)及作用原理

索氏抽提器由抽提管、接收瓶和回流冷卻器三個(gè)部分組成，在抽提時(shí)，抽提管下端與接收瓶相接，而冷卻器則與抽提管上端相接，抽提管經(jīng)過(guò)管與接收瓶相通，以供醚的蒸汽由接收瓶進(jìn)入抽提管中。而提取液則通過(guò)虹吸管重新回流到接收瓶中。接收瓶在電熱套上加熱，所形成的蒸汽沿管進(jìn)入冷卻器，并于冷卻器中冷凝。被冷凝的醚滴入抽提管中，進(jìn)行抽提，將脂肪抽出。當(dāng)吸有脂肪的溶劑超過(guò)虹吸管的頂端時(shí)，則發(fā)生虹吸作用，使溶劑回流到接收瓶中，一直到溶劑吸凈則虹吸管自動(dòng)吸空回流到接收器的溶劑繼續(xù)受熱蒸發(fā)。再經(jīng)過(guò)冷卻器冷凝重新滴入抽提管中，如此反復(fù)提取，將脂肪全部抽出。稱(chēng)取脂肪重量即可知脂肪的百分含量。

5.實(shí)驗(yàn)步驟

（1）取兩份肉末各20 g，并加入Na2SO4溶液，放置在干燥箱中干燥。注意：樣品在烘箱中干燥時(shí)，時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)，以免不飽和的脂肪酸受熱氧化而增加質(zhì)量。

（2）用濾紙包好已干燥好的肉末樣品。注意：樣品應(yīng)干燥后研細(xì)，裝樣品的濾紙筒一定要緊密，不能往外漏樣品。

（3）在索氏提取器中加入藥品，并將濾紙包放入抽提管中，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。注意：加入石油醚至接收瓶?jī)?nèi)容積的處。

（4）實(shí)驗(yàn)結(jié)果

①使用30℃～60℃的石油醚提取樣品中的粗脂肪含量是17.71%。

②使用60℃～90℃的石油醚提取樣品中的粗脂肪含量是18.83%。

③使用90℃～120℃的石油醚提取樣品中的粗脂肪含量是18.53%。

（二）氣相色譜分析

1.實(shí)驗(yàn)方法

氣相色譜分析法

2.原理：

氣相色譜法是利用色譜柱中裝入的固定液，用載氣把與分析的混合物帶去色譜柱，在一定溫度和壓力條件下，各氣體組分載氣和固定液薄膜的氣、液兩相中的分配系數(shù)不同，隨著載氣的向前流動(dòng)，樣品各組分在氣、液兩相中反復(fù)進(jìn)行分配，使脂肪酸各組分的移動(dòng)速度有快有慢，從而將各組分開(kāi)。

3.氣相色譜數(shù)據(jù)分析結(jié)果

經(jīng)過(guò)氣相色譜分析法得出1000 ul里有18.3245 ug粗脂肪，所以100 g里有1.8324 g，即樣品中脂肪的含量為18.324%。

二、兩種方法對(duì)比分析得到的結(jié)論

1.經(jīng)過(guò)索氏提取法得到樣品中脂肪含量的范圍在17.71%～18.83%之間。

2.經(jīng)過(guò)氣相色譜分析法得出樣品中脂肪的含量為18.324%。

3.使用30℃～60℃的石油醚得到的數(shù)據(jù)與氣相色譜分析法得到的數(shù)據(jù)偏差為0.61%；使用60℃～90℃石油醚得到的數(shù)據(jù)與氣相色譜分析法得到的數(shù)據(jù)偏差為0.51%；使用90℃～120℃石油醚得到的數(shù)據(jù)與氣相色譜分析法得到的數(shù)據(jù)偏差為0.21%。

因此，使用90℃～120℃石油醚得到的數(shù)據(jù)較為準(zhǔn)確。

4.使用沸點(diǎn)為90℃～120℃的石油醚抽提的速度比60℃～90℃的石油醚的速度要快，低沸點(diǎn)石油醚速度最慢。

三、本次研究性課題的創(chuàng)新點(diǎn)及意義

1.本次實(shí)驗(yàn)課題采用氣相色譜法和索氏提取法兩種實(shí)驗(yàn)方式進(jìn)行脂肪含量的分析，打破了以往單一實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行類(lèi)似的測(cè)定，同時(shí)，對(duì)兩種方法得到的數(shù)據(jù)進(jìn)行了對(duì)比分析，得出具有一定參考價(jià)值的結(jié)論。

2.本次實(shí)驗(yàn)中，以氣相色譜分析的數(shù)據(jù)作為基準(zhǔn)，對(duì)使用低沸點(diǎn)石油醚（30℃～60℃）、中沸點(diǎn)石油醚（60℃～90℃）與高沸點(diǎn)石油醚（90℃～120℃）進(jìn)行提取的方法進(jìn)行了對(duì)比分析，發(fā)現(xiàn)了使用沸點(diǎn)為90℃～120℃的石油醚抽提的速度大于沸點(diǎn)為60℃～90℃的石油醚的抽取速度，而低沸點(diǎn)30℃～60℃石油醚的抽取速度最慢，高沸點(diǎn)石油醚抽取速度最快。

3.用高沸點(diǎn)石油醚得到的數(shù)據(jù)偏差小，結(jié)果更準(zhǔn)確，為此類(lèi)實(shí)驗(yàn)提供了具有一定參考價(jià)值的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

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