小兒急性腹瀉常見病原微生物感染分析

邵偉芳 劉祺 林素珍 唐莉莉

急性腹瀉是發病率較高的一種兒科病癥，若未及時進行正確有效的治療，則會對患兒的生長發育產生限制性影響，甚至威脅生命安全。因為嬰幼兒的身心發育尚不成熟，身體免疫力低下，極其容易受到病原微生物的侵襲［1］。相關臨床研究表明，病毒、真菌、細菌均是引起患兒發生急性腹瀉的主要影響因素，其中病毒最為常見。臨床上，由于病原微生物的檢測與鑒定需要一定的時間，進而容易耽誤治療［2］。因此，如果醫護人員能夠熟悉掌握急性腹瀉患兒的病原微生物分布特性及其發病規律，便可以及時給予有效治療。本研究收集了140例急性腹瀉患兒的糞便標本，分析不同性別、年齡、季節下小兒急性腹瀉的常見病原微生物檢驗結果。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2019年1月至2020年6月本院接診的急性腹瀉患兒140例，主要臨床表現為惡心、嘔吐、發熱、大便黃綠色或黃色，無膿血。（1）納入標準：持續腹瀉時間≤3天，每日排便次數≥3次，大便性狀改變，呈現蛋花湯樣、稀糊樣、黏液樣以及稀水樣等，未出現膿血，且大便常規檢測結果提示WBC計數＜10/hp；年齡≤5歲。（2）排除標準：大便量少于3 mL；患有先天性肺炎、貧血以及炎性胃腸道病癥的患兒；食物中毒、脂瀉病或囊胞性纖維病患兒；治療護理依從性較差的患兒。其中，男患兒76例，女患兒64例；從病情發作至入院治療的時間為48～72 h，平均（60.24±5.13）h；年齡2個月～5歲，平均（2.46±0.36）歲；年齡＜1歲患兒32例，1～2歲患兒82例，3～5歲患兒26例；在12月至2月發病者44例，3月至5月發病者27例，6月至8月發病者40例，9月至11月發病者29例。本研究經醫院醫學倫理委員會批準。

1.2 研究方法 患兒入院接受治療后，醫護人員選用無菌一次性吸管采取新鮮糞便標本4～8 mL，2 h內送檢。（1）細菌分離培養及鑒定：沙氏瓊脂培養基（鄭州人福博賽生物技術有限責任公司），XLD平板、麥康凱平板（上海科瑪嘉微生物技術有限公司），堿性蛋白胨水、4號平板（江門市凱林貿易有限公司），哥倫比亞血瓊脂培養基（廣州市迪景微生物科技有限公司），將患兒糞便樣本在培養基上接種，并作分離培養，按照《全國臨床檢驗操作規程》進行操作。采取梅里埃全自動鑒定儀Vitek2-compact及配套試劑對所培養的菌株進行鑒定。同時，通過血清凝集對沙門、志賀菌進行分群分型，通過核酸檢測測定致瀉性大腸埃希菌等微生物。（2）病毒學檢測：10%的便懸液標本制備采用標本處理液試劑盒（上海酶聯生物科技有限公司），采用酶聯免疫吸附法檢測人輪狀病毒，具體操作參照酶聯免疫吸附試劑盒的說明書。（3）逆轉錄聚合酶鏈反應（PCR）檢測：通過ROCHE全自動核酸純化儀檢測腺病毒、杯狀病毒以及人星狀病毒，對病毒RNA核酸進行提取并純化，將《全國病毒性腹瀉監測方案》作為參考對引物序列進行設計，依據反轉錄試劑盒（北京鴻躍創新科技有限公司）以及PCR擴增試劑盒（上海恪敏生物科技有限公司）說明書，開展逆轉錄聚合酶鏈反應檢測實驗，檢測結果提示PCR陽性產物應送到測序中心進行檢測。

1.3 觀察指標 糞便標本中真菌、寄生蟲、致病菌以及病毒等病原微生物的檢出情況以及感染特點。

1.4 統計學方法 采取SPSS21.0統計軟件。計數資料以例數/百分比表示，采用χ2檢驗。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 糞便標本中病原微生物的檢出情況 病毒的檢出率最高，主要是人杯狀病毒（50.58%）和人輪狀病毒（15.29%）。見表1。

表1 病原微生物感染情況分析

2.2 不同條件下患兒糞便標本的病原微生物檢出情況分析 男、女患兒糞便標本的病原微生物檢出率分別為52.94%、47.06%，性別差異無統計學意義（P＞0.05）。不同年齡段患兒糞便標本的病原微生物檢出率比較，差異有統計學意義（P＜0.05）。不同季節發病患兒糞便標本的病原微生物檢出率比較，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 不同條件下患兒病原微生物檢出情況分析

2.3 病原微生物感染季節分布特性分析 病原微生物感染可以在全年任意季節發作，人杯狀病毒感染的高發期是6月至8月，人輪狀病毒感染的高發期是12月至2月。病原微生物感染的季節差異有統計學意義（P＜0.05）。見表3。

表3 病原微生物感染季節分布特性分析

3 討論

小兒腹瀉是發病率較高的一種消化道綜合征，致病原因復雜，受諸多因素影響，臨床癥狀主要表現為排便次數顯著增加、大便性狀改變。本研究收集140例腹瀉患兒的糞便標本開展病原微生物檢驗，探討病原微生物的分布規律及構成情況。結果顯示，140例糞便標本的病原微生物檢出率為60.71%，病毒占比75.29%，主要是人杯狀病毒和人輪狀病毒，說明導致患兒腹瀉的主要因素是病毒感染［3］，與其他國家的相關流行病學調查結果相似。而人輪狀病毒是導致小兒出現腹瀉的主要病原體，本組病例中出現人輪狀病毒感染的幾率高達50.58%。研究報道，我國成都地區人輪狀病毒感染的幾率高達37.76%。其實，大部分小兒在5歲之前均發生過人輪狀病毒感染所導致的腹瀉，其中1～2歲期間的感染幾率較高［4］。本研究結果顯示，年齡＜1歲患兒糞便標本的病原微生物檢出率為29.41%，1～2歲患兒糞便標本的病原微生物檢出率為54.12%，3～5歲患兒糞便標本的病原微生物檢出率為17.65%，與上述研究結果相符。病原微生物檢出率的年齡差異有統計學意義（P＜0.05），可能與患兒的機體免疫力水平存在一定的關聯性。年齡＜1歲的患兒能夠從母乳中吸收IgG、IgA抗體，可對病原微生物的入侵產生抵抗作用；年齡＞2歲患兒的機體免疫系統逐步完善，自身對病原微生物抵抗能力得到提升；12個月至2歲患兒，不僅是從母體吸收的抗體減弱，而且自身發育系統尚不完善，因此更容易導致病原微生物的入侵［5］。140例患兒糞便樣本的人杯狀病毒檢出率為15.29%，國外急性腹瀉患兒人杯狀病毒的檢出率為1.32%～15.72%。人杯狀病毒由兩個屬性組成，即札如病毒和諾如病毒，主要感染對象為人類，2歲以下的幼兒極其容易感染［6］。人杯狀病毒感染的主要臨床表現為喘息、嘔吐、發熱、水樣便、咳嗽等。由本研究結果可知，病原微生物感染能夠在全年任意季節發作，人杯狀病毒的高發期是6月至8月，人輪狀病毒高發期是12月至2月，與國內報道結果相符［7］。由此可知，人輪狀病毒感染與季節變換存在緊密相關，該病毒感染發病高峰期為冬季，提示可依據病毒感染的季節性特征，提早加強對患兒的保護，對降低小兒急性腹瀉的發病率有著積極影響。此外，還發現細菌感染導致的小兒急性腹瀉主要發生在夏季，致病菌、真菌以及寄生蟲感染同樣是導致小兒急性腹瀉的影響因素。臨床上，應依據病原微生物感染種類開展針對性治療，由于病原微生物的鑒定、培養需要時間較長，通過全面掌握了解病原微生物感染的分布特點及發病規律，有助于早期指導臨床診斷及治療預防工作［8］，不至于貽誤病情。

綜上所述，1～2歲是小兒急性腹瀉的高發年齡段，大部分為病毒感染所致，與季節分布存在關聯性，與性別不存在關聯性。但本研究的樣本量較少，極有可能存在抽樣誤差，下一步將擴大樣本量探索病原微生物感染的相關影響因素。