老年癡呆患者血清微小miR-9和M-CSF及Hcy的變化及其意義

張穎奇，徐瑩，劉琳

（沈陽積水潭醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，遼寧 沈陽 110027）

我國屬于老年癡呆的高發(fā)國家，因此，引起了人們的廣泛關(guān)注[1]。癡呆是因大腦病變所導(dǎo)致的臨床綜合征之一，患者臨床特征主要表現(xiàn)為認(rèn)知功能減退，如抽象思維、計(jì)算、推理、判斷、理解、記憶，同時(shí)可能伴人格改變、行為紊亂、妄想、幻覺[2]。血管性癡呆、阿爾茨海默癥則是臨床中較為常見的老年癡呆類型。準(zhǔn)確識(shí)別和有效預(yù)防老年癡呆，能有效延緩病程進(jìn)展，顯著改善患者預(yù)后。臨床相關(guān)研究結(jié)果顯示，老年癡呆的發(fā)生、發(fā)展，與血清微小RNA-9（miR-9）、巨噬細(xì)胞刺激集落因子（M-CSF）、同型半胱氨酸（Hcy）水平密切相關(guān)[3]。本研究旨在分析老年癡呆患者血清miR-9、M-CSF、Hcy的變化及其意義，旨在能為老年癡呆的防治提供指導(dǎo)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取本院2019年2月至2020年4月收治的老年癡呆患者60例作為實(shí)驗(yàn)組，另選取同期本院收治的60例非老年癡呆患者作為對照組。實(shí)驗(yàn)組男33例，女27例；年齡62～81歲，平均（75.33±6.72）歲；伴高血壓36例，伴糖尿病19例，伴冠心病6例，吸煙15例。對照組男35例，女25例；年齡61～83歲，平均（75.18±6.65）歲；伴高血壓31例，伴糖尿病16例，伴冠心病4例，吸煙17例。兩組臨床資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：患者及家屬均知情同意并簽署知情同意書；符合相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]，MMSE評分為14～23分；年齡≥60歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：精神疾病；過往存在顱腦手術(shù)、創(chuàng)傷病史；放化療和顱內(nèi)惡性腫瘤；腦出血、腦梗死、短暫性腦缺血發(fā)作；其他原因?qū)е碌陌V呆。

1.2 方法 采集兩組患者6 ml空腹靜脈血，選取部分血液標(biāo)本，13 000 r/min離心10 min，收集血清標(biāo)本，通過miR-9試劑盒提取miRNA，利用反轉(zhuǎn)錄試劑盒反轉(zhuǎn)錄為cDNA，保存在-80℃的冰箱內(nèi)。根據(jù)PCR儀器說明書開展相關(guān)的檢測操作，選擇CFX manager 3.0軟件分析相對定量表達(dá)。選取部分血液標(biāo)本2 500 r/min離心15 min，收集血清，選擇酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清M-CSF、Hcy水平；選擇美國貝克曼AU680型全自動(dòng)生化分析儀和上海東方順宇生物科技有限公司的試劑，嚴(yán)格遵循試劑說明書開展相關(guān)的檢測操作。

1.3 觀察指標(biāo) 比較兩組血清miR-9、M-CSF、Hcy水平檢測結(jié)果與MMSE評分，分析兩組MMSE評分與各項(xiàng)檢測指標(biāo)的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以“±s”表示，比較采用t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清miR-9、M-CSF、Hcy水平檢測結(jié)果與MMSE評分比較 實(shí)驗(yàn)組血清miR-9、M-CSF、Hcy水平均明顯高于對照組（P＜0.05），但MMSE評分明顯低于對照組（P＜0.05），見表1。

表1 兩組血清miR-9、M-CSF、Hcy水平檢測結(jié)果與MMSE評分比較（±s）Table 1 Comparison of serum miR-9,M-CSF,Hcy levels and MMSE scores between the two groups(±s)

表1 兩組血清miR-9、M-CSF、Hcy水平檢測結(jié)果與MMSE評分比較（±s）Table 1 Comparison of serum miR-9,M-CSF,Hcy levels and MMSE scores between the two groups(±s)

注：miR-9，Microrna-9；M-CSF，巨噬細(xì)胞刺激集落因子；Hcy，同型半胱氨酸；MMSE，簡易精神狀態(tài)量表

組別實(shí)驗(yàn)組對照組t值P值例數(shù)60 60 miR-9（2-△△ct）8.24±1.18 5.55±0.94 13.811 5＜0.05 M-CSF（pg/ml）632.77±151.75 457.08±94.15 7.620 4＜0.05 Hcy（μmol/L）20.54±3.03 14.24±2.82 11.789 5＜0.05 MMSE評分（分）16.86±2.02 25.79±2.17 23.331 9＜0.05

2.2 兩組MMSE評分與各項(xiàng)檢測指標(biāo)的相關(guān)性分析 老年癡呆患者的MMSE評分與血清miR-9、M-CSF、Hcy水平呈負(fù)相關(guān)（P＜0.05），見表2。

表2 MMSE評分與各項(xiàng)檢測指標(biāo)的相關(guān)性Table 2 Correlation between MMSE score and various test indexes

3 討論

老年癡呆屬于一種認(rèn)知功能障礙綜合征，發(fā)生時(shí)患者意識(shí)并無異常；其病理學(xué)特征不僅包括老年斑、神經(jīng)元喪失，而且還包括神經(jīng)元纖維纏結(jié)、血管淀粉樣病變等[5]。老年癡呆的發(fā)病原因復(fù)雜，相關(guān)臨床研究結(jié)果顯示，炎癥反應(yīng)、神經(jīng)細(xì)胞骨架改變、神經(jīng)傳遞障礙、遺傳、年齡等因素與老年癡呆的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[6]。老年癡呆的發(fā)病具有隱匿性，發(fā)病初期易被忽視，當(dāng)患者認(rèn)知功能障礙癥狀明顯時(shí)，表示其病情已較危重，常規(guī)干預(yù)手段效果不佳。因此，準(zhǔn)確和及早識(shí)別老年癡呆，同時(shí)進(jìn)行有效的干預(yù)，能有效控制病程進(jìn)展。選擇合適的生物學(xué)標(biāo)志物早期診斷老年癡呆已成為現(xiàn)階段的研究熱點(diǎn)[7]。

血清微小RNA-9（miR-9）含量比較穩(wěn)定，可將其作為診斷多種疾病的標(biāo)志物。miR-9能調(diào)控多種基因表達(dá)，如突觸孔蛋白、神經(jīng)突觸小泡磷酸酶1等，進(jìn)而影響神經(jīng)遞質(zhì)功能、神經(jīng)元活性；除此之外，miR-9還能在一定程度上調(diào)節(jié)和控制糖皮質(zhì)激素感觸因子基因表達(dá)，阻礙神經(jīng)元的相互運(yùn)輸[8-9]。M-CSF是由星形膠質(zhì)細(xì)胞與小膠質(zhì)細(xì)胞合成的，通過與神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞增生同族受體有效結(jié)合激活趨化因子，不僅能明顯增強(qiáng)小膠質(zhì)細(xì)胞清道夫受體表達(dá)，而且還能明顯增強(qiáng)脂蛋白E受體，促進(jìn)細(xì)胞增殖，損傷神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞[10]。Hcy為甲硫氨酸代謝脫去甲基的衍生物之一，不但能促進(jìn)氧自由基的生產(chǎn)，而且還能促進(jìn)鈣離子超載，出現(xiàn)神經(jīng)毒性；此外，Hcy還能增強(qiáng)神經(jīng)元對毒性淀粉樣β蛋白的敏感性。當(dāng)Hcy處于較高水平時(shí)，則會(huì)在一定程度上損傷血管內(nèi)皮功能，在一定程度上影響脂質(zhì)代謝，腦內(nèi)小動(dòng)脈發(fā)生粥樣硬化，腦血管發(fā)生缺血性損傷，認(rèn)知功能出現(xiàn)障礙[11]。本研究結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組血清miR-9、M-CSF、Hcy水平均明顯高于對照組（P＜0.05），表明，老年癡呆患者的血清miR-9、MCSF、Hcy水平明顯升高。另外，實(shí)驗(yàn)組MMSE評分則明顯低于對照組（P＜0.05），老年癡呆患者的MMSE評分與血清miR-9、M-CSF、Hcy水平表現(xiàn)為負(fù)相關(guān)（P＜0.05）。本研究結(jié)果顯示，老年癡呆患者的MMSE評分與血清miR-9、M-CSF、Hcy水平存在顯著相關(guān)性，血清miR-9、M-CSF、Hcy水平越高，認(rèn)知功能損害則越嚴(yán)重。相關(guān)臨床研究[12-13]發(fā)現(xiàn)，在早期診斷老年癡呆患者時(shí)，單獨(dú)檢測血清miR-9、MCSF、Hcy的診斷靈敏度、特異度分別為86.17%和78.02%、84.53%和74.09%、66.00%和75.86%；而聯(lián)合檢測的診斷靈敏度、特異度則為96.91%、92.28%；表明，聯(lián)合檢測血清miR-9、M-CSF、Hcy水平能明顯提高診斷靈敏度、特異度。

綜上所述，老年癡呆患者血清miR-9、M-CSF、Hcy水平顯著增加，且與認(rèn)知功能損害密切相關(guān)，通過聯(lián)合檢測血清miR-9、M-CSF、Hcy水平，能為輔助診斷老年癡呆提供一定依據(jù)。