桄榔木屑為培養基質的黑皮雞樅菌林下栽培試驗研究

鄧莉杰，盧中強*，唐 璇，明鳳恩，陸榮生，陳進寧，韓美麗

（1.廣西國有高峰林場，廣西南寧 530001；2.廣西田林農業農村局，廣西百色 533399；3.廣西農業科學院微生物研究所，廣西南寧 530007）

桄榔[（Arenga pinnata（Wurmb.）Merr.]屬于棕櫚科喬木，在華南地區廣泛栽培，主要用于園林綠化、繩纜制造、食品加工等。在桄榔樹砍伐、加工過程中會產生許多的粗纖維廢渣，在廣西南部桄榔樹傳統種植區，每年都因制作桄榔粉而產生大量桄榔廢渣。據統計，僅廣西龍州縣每年從越南購進的桄榔樹就達500～600 t，年產桄榔粉200 t 左右，產生的廢渣達300～400 t[1]，這些廢渣除少量用于農業無土栽培外，多數被焚燒或丟棄，造成資源浪費與環境污染[2]。許多分析測定表明，棕櫚科喬木細胞中含纖維素42%～53%，木質素20%～40%[3]，可以滿足食用菌在內的真菌生長需要，因此如何有效地利用包括桄榔在內的棕櫚科喬木加工廢棄物是食用菌科研的一個重要內容。

黑皮雞樅又名長根菇（Oudemansiella raphanipes），是近年出現的食用菌新品種，具有很高的食用和藥用價值[4]，其子實體內不僅存在大量人體所需的蛋白質、脂肪、鈣、磷、鐵、核黃酸等多種營養成分，還含有麥角甾醇類物質、多糖體等治療糖尿病、抑制人體癌細胞生長等物質[5]。黑皮雞樅菌人工栽培時間不長，主要栽培方式為大棚覆土栽培[6]，其栽培技術研究主要包括生物學特性觀察、培養料篩選、覆土土壤成分及厚度等，用的較多的栽培材料是棉籽殼、雜木屑等。黎勇等[7]發現采用30%雜木屑附加45%棉籽殼與22%麩皮的培養基栽培黑皮雞樅菌可以取得較好的生物轉化率；譚永忠等[8]研究發現黑皮雞樅菌最適栽培配方為棉籽殼39%、稻草40%、麩皮17%； 郭興等[9]認為黑木耳菌糠35%與木屑45%、麥麩15%配合栽培黑皮雞樅技術上完全可行；顏振蘭[10]在推廣黑皮雞樅工廠化栽培技術時推薦使用棉籽殼30%、玉米芯30%、木屑8%、玉米粉10%、麩皮20%、碳酸氫鈣1%、石灰粉1%作為栽培料配方。覆土層厚度上，葉雷等[11]發現黑皮雞樅菌覆土厚度5 cm 較為合適。柯智等[12]認為紅黑沙混土最適宜黑皮雞樅子實體的生長發育，能促使原基快速形成，提高出菇速率和生物學轉化率。

目前尚無桄榔木屑及發酵雞糞在黑皮雞樅栽培上的應用報道，而華南地區棕櫚科植物栽培較多，每年因園林綠化修剪、工業砍伐加工、食品加工而產生很多廢木屑，因此筆者通過研究桄榔木屑與發酵雞糞結合對黑皮雞樅菌菌絲生長及生物轉化率的影響，建立桄榔木屑為主要成分的黑皮雞樅菌林下栽培基本體系，為拓展食用菌栽培原料，提高棕櫚科植物種植業的附加值及豐富林下經濟作物種類提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗用黑皮雞樅菌HP-7 號為筆者所在課題組保存的菌株，所用桄榔木屑由廣西國有高峰林場木材加工廠提供。

1.2 試驗地點

高峰林場森林公園5年生灰木蓮林下，林區郁閉度85%～90%。

1.3 試驗方法

1.3.1 不同含量桄榔木屑對黑皮雞樅菌出菇袋菌絲生長影響。以棉籽殼78%+ 米糠20%+ 石膏1%+ 過磷酸鈣1%的培養基為基本培養基，設置添加桄榔木屑處理8 個，添加量分別為0%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、78%，各處理以78%為基數，同時減少對應的棉籽殼含量。接種后觀察不同處理菌絲生長情況。

1.3.2 桄榔木屑為主要成分培養基中以雞糞發酵物替代米糠后對黑皮雞樅菌出菇袋菌絲生長、生物轉化率的影響。以“1.3.1”選出的桄榔木屑為主要成分的出菇袋培養基為基本培養基，雞糞添加量分別為0%、4%、8%、12%、16%、20%（各處理米糠對應量分別為20%、16%、12%、8%、4%、0），所用雞糞分為發酵雞糞與非發酵雞糞。接種后觀察出菇袋成品率、菌絲生長、生物轉化率的變化。

1.3.3 出菇袋覆土層土壤中發酵雞糞添加量與覆土層厚度對黑皮雞樅菌生物轉化率、蛋白質含量的影響。為改善覆土層土壤營養成分，在覆土層土壤中添加了不同含量的發酵雞糞，添加量分別為0、3.0%、6.0%、9.0%、12.0%、15.0%。覆土層厚度設置了2、4、6、8、10 cm 共5 個處理。觀察不同處理黑皮雞樅菌原基形成所用時間、生物轉化率的變化。

1.4 雞糞發酵方法

將雞糞發酵劑活化12 h 后，添加到雞糞與秸稈粉混合物中（2 種成分分別為70%、30%），翻拌均勻，用塑料薄膜密封，在適宜溫度為25℃～35℃下發酵5～10 d。發酵結束后發酵產物用于出菇袋培養基配制與土壤調配。

1.5 出菇袋培養基制作與出菇管理

按試驗方案稱取各成分，加水到含水量60%～65%，拌勻，裝袋（23 cm×70 cm 規格聚丙烯菌袋），121℃消毒4 h。菌絲24℃～28℃下黑暗培養。菌絲長滿菌袋后繼續培養60～65 d 以完成后熟作用。

出菇管理：將長滿菌絲的出菇袋在菌袋側面劃一個切口，然后將塑料袋平放于林下挖好且已消毒過的地畦中（切口向上），按試驗設計蓋上調配好的混配土，第1 次淋次透水，以后5～7 d 淋1 次透水。出菇期間林下溫度28℃～32℃，空氣濕度80%～90%。采收2 批。

1.6 數據統計

試驗中，各指標計算方法如下：

接種塊恢復生長所需時間指菌種接種至開始在新培養基上生長所需時間。

出菇袋成品率（%）= 菌絲長滿且沒有雜菌的出菇袋數/ 接種出菇袋總數

生物轉化率（%）=2 次采收的子實體鮮重（g）/ 培養料干重（g）

2 結果與分析

2.1 不同含量桄榔木屑添加物對黑皮雞樅菌出菇袋菌絲生長的影響

將栽培菌種接入添加不同含量的桄榔木屑出菇袋培養基上后，可以觀察到不同含量桄榔木屑培養基的菌絲生長與生物轉化率明顯不同（表1）。桄榔木屑添加量60%、70%、78%的3 個處理接種菌塊恢復生長時間分別為3.3、3.3、3.0 d，明顯少于對照與其他處理，三者間無顯著差異；這3 個處理菌絲生長速度分別為50.0、53.3、50.0 mm/d，明顯高于對照及其他處理，三者間也無明顯差異，但桄榔木屑添加量78%的處理菌絲生長稍弱。桄榔木屑添加量50%的處理菌塊恢復生長時間次之，菌絲生長速度為1.4 cm/3 d；桄榔木屑添加量20%的處理菌絲生長速度與對照無差異。

表1 不同含量桄榔木屑添加物對黑皮雞樅菌菌絲生長與生物轉化率的影響

桄榔木屑添加量50%、60%、70%的3 個處理生物轉化率分別為61.8%、66.4%、65.7%，明顯高于對照與其他處理，三者無顯著差異。桄榔木屑添加量20%、30%的2 個處理生物轉化率分別為49.4%、50.2%，與對照無顯著差異。

綜合接種塊恢復生長所用時間、菌絲生長速度、生物轉化率3 個因素，黑皮雞樅菌出菇袋培養時，桄榔木屑的添加量以60%～70%為宜。

2.2 桄榔木屑為主要成分培養基中添加雞糞發酵物替代米糠對黑皮雞樅菌出菇袋菌絲生長、生物轉化率的影響

從表2 可以看出，發酵雞糞添加量為4%、8%、12%、16%、20%的5 個處理，菌袋成品率分別達94.6%、96.8%、97.8%、97.8%、96.7%，與對照無明顯差異；發酵雞糞添加量為12%、16%、20%的3 個處理菌絲生長速度在所有處理中最高，分別為83.3、86.7、83.3 mm/d，三者間無明顯差異；這3 個處理的生物轉化率分別達到76.8%、78.1%、75.5%，高于對照與其他處理，三者間無明顯差異。

表2 雞糞添加物對桄榔木屑為主要成分的黑皮雞樅菌生長的影響

非發酵雞糞添加量為4%、8%、12%、16%、20%的5 個處理中，12%、16%、20%的3 個處理，菌袋成品率分別達90.0%、86.6%、83.3%，明顯低于對照及其他處理；12%、16%、20%的3 個處理菌絲生長速度在所有處理中最高，分別為73.3、80.0、76.7 mm/d，3 者間無明顯差異；三者的生物轉化率分別達70.5%、72.4%、71.9%，高于對照及其他處理，但低于添加發酵雞糞對應處理的生物轉化率。

綜合菌袋成品率、菌絲生長速度、生物轉化率3 個方面的因素，可以認為培養基中添加發酵雞糞12%～20%的效果高于添加20%的米糠效果。

2.3 出菇袋覆土用土壤中發酵雞糞添加量與覆土層厚度對黑皮雞樅菌原基形成與生物轉化率的影響

黑皮雞樅菌室內栽培時，菌袋覆土層厚度一般為1～2 cm。林下栽培時，空氣濕度變化比室內大，進而可能影響到土層濕度，為此，針對林下的特點，研究了不同覆土層厚度對黑皮雞樅菌子實體形成的影響，同時也通過添加發酵雞糞對覆土層土壤的營養成分進行了補充（表3、4）。

從表3 可以看出，覆土層厚度對黑皮雞樅菌原基形成與生物轉化率均有一定影響。土層厚度6、8 cm 2 個處理原基形成時間比對照推遲3～5 d，但生物轉化率明顯高于對照及其他處理，分別達到83.4%、85.6%。因此，黑皮雞樅菌林下栽培適宜的土層厚度為6～8 cm。

表3 覆土層厚度對黑皮雞樅菌生物轉化率的影響

從表4 可以看出，覆土層6 cm 的條件下，發酵雞糞添加量不同對黑皮雞樅生物轉化率的影響不同。發酵雞糞加入量10%、15%、20%的生物轉化率分別為90.3%、92.4%、89.8%，高于對照與其他處理，三者間無顯著差異。覆土層中加入發酵雞糞的不同處理原基形成時間無明顯差異。因此黑皮雞樅覆土層中添加10%～20%的發酵雞糞有助于生物轉化率的提高，但對原基形成時間無影響。

表4 覆土層土壤中發酵雞糞加入量對黑皮雞樅菌生物轉化率的影響

3 結論與討論

華南地區不是產棉區，棉籽殼需要從北方運過來，成本高，加之近年農業側供給改革，棉花種植也相對減少，棉籽殼本身價格也逐年提高。因此結合當地資源情況，發掘當地低廉的農林加工生產過程產生的廢棄物替代棉籽殼很有必要。棕櫚科植物富含纖維素、木質素等食用菌生長所需的營養成分，但棕櫚科植物加工過程中的廢棄物在食用菌生產上的應用報道較少。該試驗發現了棕櫚科中桄榔加工廢渣循環再利用的方法。

發酵雞糞替代米糠加入培養，有助于菌絲體的快速生長及生物轉化率的提高。雞糞是價格低廉的優質有機肥，其含純氮、磷（P2O5）、鉀（K2O）分別約為1.63%、1.54%、0.85%。未發酵雞糞內存在一些寄生蟲及其卵，以及傳染性的一些病菌，因此使用前必須經過充分腐熟，將有害生物在腐熟（漚制）的過程得到滅活[13]。該試驗也證明，發酵雞糞的菌袋成品率高于非發酵菌袋，原因可能是非發酵雞糞中的有害生物蟲卵及病菌孢子在設定的消毒條件下不能完全殺死，表現為消毒不徹底，因而影響菌袋的成品率。采用發酵過的雞糞則沒有了消毒不徹底的現象。米糠是食用菌生產中用得較多的一種添加物，它主要提供給食用菌生長所需的氮源、維生素。近年來米糠價格逐年提高，因此有條件的地方發酵雞糞替代米糠可以降低生產成本。

覆土層厚度對黑皮雞樅菌原基形成與生物轉化率均有一定影響。若土層太薄，原基形成數量少，且由于原基露出土面過早導致原基發育不良或干死，會大幅降低生物轉化率。若土層太厚，有些原基形成后未能及時出土，造成發良不良或畸形菇，也會影響生物轉化率。該文中的覆土層厚度試驗結果表明，林下栽培條件下，黑皮雞樅適宜的土層厚度為6～8 cm。

在林下土壤腐殖質含量不高的情況下，可以通過在覆土層土壤中添加發酵雞糞改善覆土層營養成分，添加量10.0%～15.0%為宜。由于發酵雞糞發酵時添加了一定量的秸稈粉，因此在覆土層中加入發酵雞糞對土壤質地也有改善作用，提高了土壤通透性。

棕櫚科植物在南方很多地區種植面積較大，不僅用于街道公園綠化、制作食品與化工品，也用于家具加工、造船等，這些加工過程中均會產生廢渣，因此桄榔粉制作廢渣在食用菌上的利用，不僅提高了桄榔粉制作行業的附加值，還對整個棕櫚科植物加工行業廢渣廢木屑的應用有重要意義。