RhCcEe抗原配合性輸血在長期、定期輸血患者中的應(yīng)用

劉愛菊，陳仕順，韋金華，韋 婷

（河池市人民醫(yī)院輸血科，廣西河池 547099）

地中海貧血等相關(guān)疾病患者需長期依賴輸注紅細(xì)胞，隨著醫(yī)療技術(shù)的發(fā)展，提高了臨床輸血效果的安全性，但紅細(xì)胞血型抗原同種免疫問題開始引起臨床醫(yī)師的重視[1]。Rh血型是較復(fù)雜的血型系統(tǒng)，紅細(xì)胞免疫原性強(qiáng)，Rh血型檢測的重要性僅次于ABO型[2]。RhCcEe抗原配合性輸血是指針對RhD、RhE、Rhe、RhC、Rhc 5種血型進(jìn)行抗原配型輸注，但長期、定期輸血患者由于受多次血型抗原刺激，其體內(nèi)產(chǎn)生血型同種抗體，提升溶血性輸血反應(yīng)風(fēng)險、加重輸血安全事件發(fā)生率[3]。長期、定期輸血的患者，其血清同種抗體比率較高，其中以Rh抗體為主，因此Rh系統(tǒng)相合輸注是非常有必要的。基于此，本研究擬通過臨床對照，研究RhCcEe抗原配合性輸血在長期定期輸血患者血液輸注中的應(yīng)用，為RhCcEe抗原配合性輸血的推廣提供依據(jù)。現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2020年4月至2021年4月河池市人民醫(yī)院收治的80例長期定期輸血患者作為研究對象，進(jìn)行前瞻性研究，按隨機(jī)數(shù)字表法分為觀察組和對照組，兩組各40例。觀察組患者中男性21例，女性19例；年齡2～68歲，平均（38.55±2.12）歲；患者構(gòu)成比：15例地中海貧血患者，15例慢性白血病患者，10例敗血癥患者。對照組患者中男性23例，女性17例；年齡2～68歲，平均（38.62±2.18）歲；患者構(gòu)成比：16例地中海貧血患者，17例慢性白血病患者，7例敗血癥患者。兩組患者一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經(jīng)由河池市人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)，所納入患者及其家屬知情同意并簽署知情同意書。納入標(biāo)準(zhǔn)①符合地中海貧血、慢性白血病、敗血癥等診斷標(biāo)準(zhǔn)[4-6]者；②滿足輸血指征者[7]；③IgG型抗體篩查陰性；④需長期輸注紅細(xì)胞者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①既往存在過敏反應(yīng)史者；②RhD陰性者等。

1.2 檢驗方法 ①試劑與儀器：ABO/RhD血型定型檢測卡、Rh血型分型檢測卡及抗球蛋白檢測卡（長春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司，規(guī)格：6孔/卡）；抗球蛋白試劑、ABO及RhD標(biāo)準(zhǔn)血清（上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司，規(guī)格：2 mL/支）；不規(guī)則抗體篩選紅細(xì)胞（長春博德生物技術(shù)有限責(zé)任公司，規(guī)格：5 mL/支）；譜細(xì)胞（生產(chǎn)廠家：匈牙利雷格恩斯有限公司，規(guī)格：0.8%）；全自動血型分析儀（Hamiltn Microlab Starlet IVD，規(guī)格：SA-120型）、毛細(xì)管離心機(jī)（江蘇貝索生物工程有限責(zé)任公司，規(guī)格：YZ-DM1424）。②輸血前血清學(xué)檢測具體方法：ABO、RhD血型鑒定主要采取試管法與微柱凝膠法進(jìn)行兩次鑒定，若鑒定一致則錄入血型鑒定結(jié)果。采集患者靜脈血3 mL，經(jīng)抗凝劑抗凝，常規(guī)離心，經(jīng)鹽水介質(zhì)試管法鑒定ABO、RhD血型。于輸血前后采集患者外周靜脈血2 mL，采取微柱凝膠法檢測RhCcEe血型抗原。對于出現(xiàn)混合視野的患者，無法鑒定血型抗原者，則通過從靜脈血中提取的DNA樣本進(jìn)行RhCcEe基因分型，采用毛細(xì)管離心技術(shù)，分離自身紅細(xì)胞及輸入紅細(xì)胞后，按基因檢測結(jié)果篩選相合血液，再進(jìn)行微柱凝膠法鑒定。觀察組患者交叉配血時選擇ABO、RhC、c、D、E、e抗原相合性或相容性的血液進(jìn)行RhCcEe抗原配合性輸血；對照組患者交叉配血時選擇ABO及RhD相合（常規(guī)配血方案）的血液進(jìn)行。每次輸血后對兩組受試者的輸血效果進(jìn)行密切監(jiān)測，并篩查兩組患者每次輸血后至下次輸血前有無不規(guī)則抗體。在患者血清中加入洗滌后的A型、CCDee紅細(xì)胞，30 ℃孵育30 min，離心后取紅細(xì)胞，使用細(xì)胞放散液，出現(xiàn)與C陽性細(xì)胞凝集而與E陽性細(xì)胞不凝集者，則為抗體特異性為抗-C。在患者血清中加入洗滌后的A型、ccDEE紅細(xì)胞，30 ℃孵育30 min，離心后取紅細(xì)胞，使用細(xì)胞放散液，與E陽性細(xì)胞凝集而與C陽性細(xì)胞不凝集者，則為抗體特異性為抗-E。

1.3 觀察指標(biāo) ①觀察組受血者Rh表型分布：統(tǒng)計CCDee、CcDEe、CcDee、ccDEE、ccDEe、CCDEe、ccDee、CCDEE、CcDEE的頻數(shù)。②兩組患者不規(guī)則抗體陽性率：對兩組患者的靜脈血進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查，針對篩查陽性者，采用譜細(xì)胞進(jìn)行抗體鑒定。③不良反應(yīng)：包括遲發(fā)性溶血性輸血反應(yīng)和遲發(fā)性血清學(xué)反應(yīng)。不良反應(yīng)發(fā)生率為發(fā)生不良反應(yīng)的例數(shù)占總例數(shù)之比。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 數(shù)據(jù)采用SPSS 22.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行分析，計數(shù)資料用[例（%）]表示，行χ2檢驗或校正χ2檢驗。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 觀察組受血者Rh表型分布 觀察組抗原表型分布頻率為CCDee＞CcDEe＞CcDee＞ccDEE＞ccDEe＞CCDEe＞ccDee=CCDEE=CcDEE，見表1。

表1 觀察組受血者Rh表型分布（例）

2.2 兩組受試者不規(guī)則抗體陽性率比較 觀察組患者不規(guī)則抗體陽性率低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜ 0.05），見表2。

表2 兩組患者不規(guī)則抗體陽性率比較[例（%）]

2.3 兩組不良反應(yīng)發(fā)生情況比較 觀察組患者未發(fā)生遲發(fā)性溶血性輸血反應(yīng)和遲發(fā)性血清學(xué)反應(yīng)，對照組患者中有10例發(fā)生遲發(fā)性溶血性輸血反應(yīng)和遲發(fā)性血清學(xué)反應(yīng)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表3。

表3 兩組患者不良反應(yīng)發(fā)生情況比較[例（%）]

3 討論

隨著我國新型鐵促排藥物的臨床應(yīng)用，長期依賴輸血患者壽命得以延長，但多次異體輸血會產(chǎn)生紅細(xì)胞血型同種抗體，導(dǎo)致部分患者難以尋找相合的獻(xiàn)血者血液，逐漸成為臨床難題[8]。有研究結(jié)果顯示，長期、定期輸血患者同種抗體陽性率在10%左右，同型血液輸注可預(yù)防因血型抗體不同而引起的免疫反應(yīng)，同時提高臨床輸注效果[9]。

Rh血型有50多個抗原，其中D抗原最強(qiáng)，因此常被列為常規(guī)檢查。由于事先檢測是否存在D抗原，故相關(guān)輸血的不良反應(yīng)較少。相比之下，其他幾個抗原由于未被重視，且都具有一定的免疫原性，輸血后會刺激機(jī)體產(chǎn)生不規(guī)則抗體，引起交叉配血不合[10-11]。長期定期輸血導(dǎo)致紅細(xì)胞同種抗體增加，進(jìn)而導(dǎo)致輸血費(fèi)用增加，還會造成急救用血困難。國外有研究報道，30%左右的長期輸血患者體內(nèi)可檢出同種抗體[12]。國內(nèi)深圳某醫(yī)院資料統(tǒng)計，RhCcEe同型輸血出現(xiàn)同種抗體者占比為2.08%[13]。對長期輸血的患者所做的同種抗體鑒定，以Rh血型為主，這表明Rh血型抗體是引起免疫性溶血性反應(yīng)的常見抗體，因此進(jìn)行RhCcEe抗原配合性輸血理論上可提高輸血的安全性和有效性[14-15]。本研究中，觀察組患者血中抗原表型分布頻率較高的有CCDee、CcDEe、CcDee、ccDEE、ccDEe、CCDEe， 這與王雨涵等[16]研究結(jié)果相符。本研究中觀察組患者未檢測出ccDee、CCDEE、CcDEE這3種表型，原因可能一方面這幾種表型分布頻率低，另一方面可能與樣本量較少有關(guān)。本研究結(jié)果還顯示，觀察組患者的不規(guī)則抗體陽性率低于對照組，觀察組患者未發(fā)生遲發(fā)性溶血性輸血反應(yīng)和遲發(fā)性血清學(xué)反應(yīng)，對照組中兩種不良反應(yīng)的總發(fā)生率高達(dá)25.00%，組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義。由此可見，未進(jìn)行RhCcEe抗原配合性輸血在反復(fù)輸血后產(chǎn)生不規(guī)則抗體的概率和不良反應(yīng)發(fā)生率均升高,與張秋會等[17]研究結(jié)果相符。對長期、定期輸血患者推行RhCcEe抗原配合性輸血，可有效預(yù)防同種免疫的發(fā)生，因為長時間輸注Rh抗原不合的異體血，會使不規(guī)則抗體風(fēng)險增高，遲發(fā)性溶血性輸血反應(yīng)和遲發(fā)性血清學(xué)反應(yīng)增加[18]。

綜上所述，本研究證實臨床采取RhCcEe抗原配合性輸血使長期定期輸血患者不容易產(chǎn)生不規(guī)則抗體，且降低不良反應(yīng)的發(fā)生概率，提高了長期、定期輸血治療的有效性和安全性。因此，針對長期、定期輸血患者，臨床上用RhCcEe抗原配合性輸血是有益且必要的。