中成藥復方丹參片質量標準研究

母 丹

（重慶市生物技術研究所有限責任公司 重慶 401121）

中藥復方提取物是一個較復雜的混合物，為提高中藥質量，保證用藥的安全、合理、有效，在中藥制劑的研究，生產，保管，供應及臨床使用過程中，都應進行嚴格的分析檢驗，全面控制中藥制劑的質量。在平時工作中，中藥整個制作流程，從原料采購、生產設備、生產工藝、檢驗檢測到儲存都應該嚴格遵守中藥的質量標準。本論文按《中國藥典》（2015年版一部）[1]質量標準考察復方丹參片的質量，主要是用高效液相色譜法測定復方丹參片中每片含丹參量，以丹參酮IIA的含量來判斷，復方丹參片中每片含丹參以丹參酮IIA計不得少于0.20mg。

一、復方丹參片的介紹

（一）復方丹參片的制法

按照《中國藥典》中規定的方法制得。丹參450g，三七141g，冰片8g這三味中藥材，先將丹參提取三次，第一次加入乙醇回流，過濾，回收濃縮至相對密度1.30（55～60℃）。第二次加50%的乙醇回流1.5小時，過濾。第三次加水回流2小時，過濾，合并后面兩次的濾液再回收乙醇，濃縮至相對密度1.40（55～60℃），與第一次的濃縮液合并，混勻，制成相對密度為1.35～1.39（55℃）的清膏。將三七粉碎成細粉，與丹參清膏拌勻，干燥，制成顆粒，將冰片研細，與上述顆粒混勻，壓制成1 000片，或包糖衣或薄膜衣，即得。

（二）復方丹參片的藥理作用

復方丹參片是由丹參、三七及冰片按一定比例互配制成的中成藥[2]，具有活血化淤、理氣止痛的功效。常用于活血化瘀，理氣止痛及氣滯血瘀所致的胸中憋悶，癥見胸悶、心前刺痛、心絞痛等。臨床上，常用于心血管疾病方面的治療，因此必須保證復方丹參片的產品質量，研究其質量標準有著極其重要的作用。

二、實驗部分

本論文實驗根據中國藥典2015年版一部檢驗標準對復方丹參片進行質量檢驗，共檢測了20100901、20100902、20100903三批復方丹參片，規格為0.3g。

（一）性狀

根據藥典的方法，對復方丹參片的外觀性質進行記載。

（二）定性鑒別

按照《中國藥典》2015年版一部質量標準中測定方法進行測定。

1.樣品色譜中，樣品色譜和丹參酮IIA對照品色譜相同位置上，當顯現出相同顏色的斑點后，馬上噴上1%香草醛硫酸溶液，再110℃加熱顯色。在與冰片對照品色譜相同的位置上，顯現相同顏色的斑點（色譜圖見圖1）。

圖1 復方丹參片中丹參與冰片的TLC鑒別

2.供試品色譜中，在與對照藥材色譜和對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點（色譜圖見圖2）。

圖2 復方丹參片中三七的TLC鑒別

（三）檢查

復方丹參片為片劑，除按照《中國藥典》2015年版通則0101片劑項下的規定測定其重量差異，崩解時限項目外，還應該測定砷鹽、重金屬、微生物限度的指標。

1.重量差異

取3批樣品各20片，按重量差異檢查法（《中國藥典》2015年版通則0101）檢查結果。

2.崩解時限

按《中國藥典》2015年版通則0921檢查法檢查。

3.重金屬

按《中國藥典》2015年版四部重金屬檢查法第二法檢查。

4.砷鹽

取本品研細，取1g，加10%硝酸鎂乙醇液10mL，點燃，熄滅后，緩緩在550℃熾灼使完全炭化、放冷，殘渣加鹽酸溶液（2～10）10mL時溶解，將溶液移入檢砷瓶中，坩堝用13mL的水分次洗滌干凈，洗液均加入檢砷瓶中，再加3mL鹽酸，按《中國藥典》2015版四部砷鹽檢查法項下第一法（古蔡氏法），自“再加碘化鉀試液5mL”起，依法操作，檢測3批樣品中砷鹽含量。

5.微生物限度檢查

按《中國藥典》2015年版四部（通則1105）檢測法檢查。

復方丹參片屬于中藥復方制劑，其處方組成為丹參-三七-冰片（450∶141∶8），實驗中發現，由于復方丹參片中含有丹參和冰片，這兩種中藥材均含有抑制菌落生長的物質，對微生物限度檢查結果會產生一定的影響，在進行微生物限度檢查時，由于常規法和培養基稀釋法檢出率較低，為了制定科學合理的復方丹參片微生物限度檢驗方法，制定出科學合理的微生物限度標準，特采用薄膜過濾法對細菌、酵母菌及霉菌進行檢查，以消除藥品中抑菌成分的干擾。

三、有效成分含量測定

為了更好地控制制劑的質量，對處方中的有效成分進行含量測定，擬選擇處方中主藥丹參所含的有效成分丹參酮IIA作為控制本品質量的指標成分。由于高效液相在藥品分析定量方面應用廣泛、靈敏、準確、重現性好、精密度高等優點。故參照《中國藥典》2015年版有關規定，建立了高效液相色譜法測定丹參酮IIA的含量測定方法。

（一）丹參酮IIA的測定

丹參酮IIA照高效液相色譜法（通則0512）測定。

1.色譜條件

色譜柱：ZORBAX Eclipse XDB-C18（4.6×250mm粒度 5-Micron）；流動相：甲醇：水為73：27；柱溫：室溫；流速1.0mL/min；檢測波長為270nm；理論板數按丹參酮IIA峰計算應不低于2 000。

2.配液

制備對照品溶液，精密稱取丹參酮Ⅱ＜[A]＞對照品10mg，放置在50mL的棕色量瓶中，加入甲醇溶解，定容至刻度，搖勻。精密量取5mL，置25mL棕色量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得（每1mL中含丹參酮Ⅱ＜[A]＞40μg）。

供試品溶液的制備取本品10片，除去糖衣片，用乳缽研細至粉末，精密稱取1g，加入甲醇25mL，稱定重量并記錄，超聲處理15分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減少的重量，搖勻后過濾，取續濾液，即得。

（二）線性關系考察

精密移取對丹參酮IIA照品溶液0μL、2μL、4μL、6μL、8μL、10μL、12μL、14μL分別進樣，測定，以峰面積為縱坐標，質量為橫坐標，繪制標準曲線。

（三）精密度實驗

精密吸取對丹參酮IIA對照品溶液，按上述色譜條件連續進樣6次，每次進樣10μL，測定。

（四）重復性實驗

精密吸取取同一批號供試品液，按上述色譜條件連續進樣3次，每次進樣10μL，測定。

（五）供試品含量測定

分別精密吸取對照品與供試品溶液各10μL，注入液相色譜儀，測定即得。

四、結論

本次實驗中對藥物進行的質量評價，所涉及到的檢測項目有：性狀、鑒別、粒度、水分、溶化性、裝量差異、含量測定、微生物限度。通過本次實驗加深了對藥品檢查項目的了解，以及在操作過程中很多問題也在實踐中得到解決。[3]

本論文按照《中國藥典》2015版復方丹參片的檢驗標準，依次進行性狀檢驗；鑒別項檢驗；有關物質、崩解時限、微生物限度的檢查；含量測定；完成了對三個批號復方丹參片的質量檢測。其檢驗結果見表1。

表1

三批復方丹參片的片重差異、重金屬、砷鹽、含量測定的檢查符合藥典的規定，經薄層鑒別證實復方丹參片中含有丹參、冰片和三七。通過線性、精密度、重復性實驗方法驗證該定量體系簡便，準確，重現性好，可用做復方丹參片的質量控制。[4]

復方丹參片在臨床上應用廣泛，但是不同的生產企業生產出來的產品質量也不盡相同，其中三七和冰片的含量也存在較大的差異。丹參由于產地、時間、來源等的差異，即使同一企業的的丹參不同批次的產品也會存在差異。又由于冰片具有揮發性，其保存不當也會回復方丹參片的質量造成影響。因此，研究復方丹參片的質量標準及其重要，提高其質量標準勢在必行。