中華蜜蜂囊狀幼蟲病防治方法綜述

唐相友，宋華莉，張小燕，范曉東，石 鵬

（重慶師范大學生命科學學院，重慶 401331）

蜜蜂是重要的經濟昆蟲，在農業傳花授粉和維持生態環境方面發揮著重要作用[1]。中華蜜蜂（Apis cerana cerana），簡稱中蜂，是我國特有的蜜蜂種質資源，具有善于采集零星蜜粉源等優良特性，在我國廣大山區均有分布。自2006 年被列入《國家畜禽遺傳資源保護名錄》以來[2]，中華蜜蜂的保護和利用被日益重視，其整體種群數量也呈向好趨勢發展。但是，長期以來以中華蜜蜂囊狀幼蟲病為主的病蟲危害仍影響著養蜂業的可持續發展。

中蜂囊狀幼蟲病（Chinese sacbrood disease,CSBD），簡稱中囊病，是由中蜂囊狀幼蟲病毒（Chinese sacbrood virus,CSBV） 引起的高致病的傳染性疾病。自1972 年在我國廣東省被首次報道以來[3]，中囊病逐漸成為危害中蜂的最主要的病毒性疾病。其高致病性、高傳染性使得中囊病迅速蔓延至全國各地，嚴重威脅我國養蜂業的發展。

中囊病主要出現在春季和秋季繁殖季節[4]，易感染幼蟲，也能侵染蛹和成蟲。感染CSBV 后，幼蟲會產生大量蛻皮液而導致不能化蛹[5]，其中大約有30%的幼蟲在封蓋前死亡，70%的幼蟲則在封蓋后死亡。成蟲染病后會成為主要的水平傳播者[6]，諸如采集花粉時病蜂會將病毒遺留在花朵上導致其他健康蜜蜂感染病毒；感染病毒后的成蟲喂食幼蟲會導致幼蟲染病死亡等。長此以往，導致蜂群見蜂不見子、飛逃等[7,8]，造成蜂群覆滅，給中蜂養殖帶來巨大損失。

鑒于中囊病的危害性大，本文總結了中囊病的誘發因素、發病規律、表征及防治方法等，以期為中蜂健康高效養殖及科學防治提供參考。

1 中囊病誘發因素、發病規律與表征

1.1 誘發因素

中囊病的誘發因素是多種多樣的，主要包含病毒性感染誘發和應激誘發[9]。病毒感染是中囊病發生的最主要因素[9]。SBV 病毒粒子從消化道進入體內，在中腸大量復制至一定程度后，破壞蜜蜂中腸黏膜而引發免疫力下降[10]，同時也會導致幼蟲細胞凋亡水平增加[11]。應激誘發主要體現在溫度差異上，Wang 等[12]研究了蜜蜂在低溫脅迫下感染SBV 的死亡差異性，發現感染SBV 的5 日齡幼蟲其死亡率顯著高于感染SBV 的2 日齡幼蟲，表明溫度可能是影響感染SBV 的重要因素。

1.2 發病規律

中囊病的發生與氣候、蜜源、飼料等都有關系[13]。中囊病主要出現在春季和秋季繁殖季節[4]，繁蜂時期缺少難以維持蜂群繁殖的飼料，則容易導致群勢減小，抗病能力減弱。氣候多變也是如此，當遭遇低溫寒潮天氣時，蜂群會應激性聚集抱團，邊緣繁育區幼蟲因受凍挨餓，對病毒的抵抗力下降而染病。

1.3 表征

感染CSBV 的幼蟲初期表現為蟲體前端下垂，頭部前端1/3 處變得透明，體軀分節明顯；后期幼蟲頭部離開巢房壁，并且頭部呈鉤狀，形似“龍船”[14]；幼蟲尸體呈囊狀，且無異味[15]。被感染的幼蟲顏色由白色轉變成黃色，繼而變成黑褐色[16]，這與由蜂房球菌（Melissococcus pluton） 引起的歐洲幼蟲腐臭病（European foulbrood） 具有明顯區別。感染歐洲幼蟲腐臭病的幼蟲呈現乳白或灰白、黃白色，無光澤[17]。成蟲感染CSBV 后無明顯的癥狀，但潛伏期較長[18,19]，其壽命會大幅度縮短[20]，病蜂表現為不護脾、不采粉，且易在脾面上成堆狀[21]。

2 常規防治

2.1 蜂場位置選擇與蜂場管理

蜂場位置選擇與科學化的蜂場管理對于中囊病的防治具有積極意義。對于蜂場位置建議選擇在生態環境良好的地方，盡量遠離污染源[22]，例如化工廠、造紙場、豬場、雞場等污染較為嚴重的地方，減少污染源對蜜蜂的侵害。王瑞生等[7]認為規模化蜂場的蜂箱位置擺放需要考慮風向與光照。最好是春來需背風、向陽；夏來需陰涼、通風；冬來需免受寒風侵襲。除此之外，加強蜂場管理也是常規防治的重要舉措。針對蜂場、蜂箱、蜂具等相關設施、器具需要保持干凈。定期對蜂場進行清掃，清理蜂箱附近的雜物、雜草等，并采用生石灰或者消毒水對蜂場及相關蜂用設備消毒處理。王為城等[16]使用消毒水對蜂具進行沖洗，而后用清水反復沖洗，最后放在烈日下暴曬，起到了較好的消毒效果。同時，蜂場管理者的個人衛生也尤為重要，在每次開箱前，可使用肥皂清洗雙手進行消毒滅菌。

當蜂場發現有輕微感染的蜂群時，可轉移至2.5 km 以外且周圍無其他蜜蜂活動的區域進行隔離治療[23]，待蜂群恢復后方可轉移回原蜂場；針對感染較為嚴重的蜂群，需將病群、病脾盡快做無害化處理，例如焚燒、掩埋、冷凍、化蠟等[24-26]，并對蜂箱等配件進行嚴格消毒，以防止病情蔓延，造成更大的損失。

2.2 加強飼養管理

蜜蜂是社會性昆蟲，具有一定的個體免疫和群體免疫能力，具有較強的抗逆性[27,28]。在越冬時期，蜜蜂結成蜂團并以微弱的生理活動度過冬蟄期[29]。陳世璧等[30]認為蜂群不強，蜜蜂數量減少，會導致蜂群抵御疾病的能力減弱。而加強飼養管理是強群飼養的重要手段。蜂群的飼養管理應簡化、熟練、精準、到位[7]。在日常管理中，蜂場管理者應盡量減少開箱檢查的次數，多采用箱外觀察，尤其是在越冬時期。除減少開箱次數外，還應注意適當保溫，諸如在箱內隔板外塞入保溫填充物（干稻草、舊棉絮等）[21,31]，以保證蜂箱內溫度。對于高海拔地區（如川西高原），同樣也需要適宜保溫。但由于高原地區晝夜溫差較大，除必要的保溫措施外，還應注意使用遮陰法遮擋箱蓋和箱壁，避免陽光直射蜂箱。王遂林等[32]對阿壩中蜂越冬期不同遮陽方式的實驗表明，因太陽直射導致蜂王不間斷產卵，蜜蜂空飛損耗嚴重。同時，養殖蜜蜂過程中，飼料充足也是必須的，尤其是在春繁、秋繁及越冬時期。飼糧是保證蜜蜂正常生活的重要保障[33]。因此，選擇優質的蜂蜜、代用糖、蛋白源更有利于蜜蜂的健康，對于來歷不明的飼料應慎用。張學文等[4]發現在春繁期補充飼喂花粉和橡膠蜂蜜可有效防控中囊病，提高蜂群的抗病力，但無法根除CSBV。在春繁、秋繁時期，極大可能地滿足蜂群對蜜源、粉源的需要[4]，保證正常的食物供應，以便于飼養強群；在越冬時期，對于弱群蜜蜂，采用合并策略。除此之外，小轉地有利于蜂群充分利用優質蜜粉源，是培養強群的可行方法[34]。

2.3 適時換王與抗病蜂王選育

抗病選育在凡納濱對蝦（Litopenaeus vannamei）[35]、鯉（Cyprinuscarpio）[36]、中華絨螯蟹（Eriocheir sinensis）[37]、水稻（Oryza sativa）[38]等動植物中均有廣泛應用。中蜂抗病蜂王選育也是防治中囊病的常用方法。亢韋芳等[39]選擇無病或癥狀輕微的蜂群作為父本和母本選育抗病力強的育種素材。對于蜂場中存在的患病蜂王應及時更替，更換蜂王后，盡量讓蜂王產2 代子[21]，這樣新出房的蜂群內無病蟲，增強了對中囊病的抵抗能力。2017 年，韓國研究學者Nguyen 等[40]通過收集4 個不同區域的東方蜜蜂蜂群，進行篩選和人工授精，經過4 個世代，初步培育出對囊狀幼蟲病（Korean Sacbrood Virus，KSBV)具有顯著抗性的蜂群。

2.4 斷子防治

中囊病易感對象一般為蜜蜂幼蟲，幼蟲體內富含有CSBV 所需的營養成分[41]。因此，當發現中囊病時，應及時對幼蟲進行處理，以防傳染源擴大。斷子[39]有利于工蜂在無傳染源的情況下徹底清理巢脾。郭力爭等[42]將蜂王扣在囚王籠中，避免產卵以達到斷子目的。在蜂群斷子期間，需進一步加強對蜂群的管理，保證飼糧的充足，以提高蜂群的抵抗力[39]。

3 藥物防治

3.1 中藥防治

中草藥是天然產物且功能較為廣泛，具有抗菌、消炎、抗病毒等廣泛的藥理作用[9]。一些民間配方也被用于中囊病的防治。郭力爭等[42]使用貫眾、金銀花、甘草，加適宜水煎煮過濾濃縮至150 g 后，與50%濃度的蜜水混合，每隔一天喂食一次。胡佑志等[14]采用貫眾30 g、金銀花30 g、虎杖20 g、紫草15 g、甘草15 g、青木香10 g，加適宜水煎煮過濾濃縮至250 mL，后加糖蜜400 g，喂食3～5 d。吳政等[43]使用金銀花、五加皮、板藍根、半枝蓮，加適量水煎煮后過濾濃縮，加入適量糖蜜水，可飼喂蜜蜂40 脾左右。除上述所描述中藥材外，也有報道采用大青葉、菊花、山烏龜等中藥經煎煮后，與糖蜜水、維生素片混用后飼喂蜜蜂用以防治中囊病[9,44,45]。

3.2 西藥防治

與中藥材的應用類似，西藥在中囊病的防治中同樣被應用。因中囊病是病毒感染所致，養蜂經驗欠缺者盲目使用抗生素防治，往往效果不佳，甚至可能造成蜂蜜中的藥物殘留[46-48]。針對于西藥防治，研究者也做了較多測試，王為城等[16]使用“抗病毒一號”進行中囊病防治，并提醒使用者注意使用劑量。劉守禮等[49]使用嗎啉胍按照每框蜂1 片的劑量，用少量水化開后與糖蜜水混合喂蜂，隔天1 次，5 d 為一療程。夏曉翠等[50]按一定比例在糖蜜水中加入鹽酸金剛烷膠粉，飼喂蜂群，3 d 1 次，持續6 次。楊柳等[51]使用EM液（Effective Microorganisms） 用40%的糖蜜水稀釋50 倍后飼喂蜜蜂，每500 g 稀釋液可喂食10 脾蜜蜂。

4 其他防治

除常規防治與藥物防治外，隨著生物技術的高速發展，研究人員在抗體、腸道菌群、多肽藥物和RNA 干擾等方面也開展了大量研究。

4.1 卵黃抗體

單克隆抗體是近年來研發的熱點，也是生物制藥重要的一類藥物。Sun 等[52]將滅活的CSBV 病毒接種到母雞，以此獲得卵黃抗體，發現其對感染CSBV 的蜂群的治療效果明顯，這對防治蜜蜂CSBV 提供了重要的思路與見解。

4.2 腸道菌群干預

腸道菌群可以影響宿主營養代謝、保持腸道黏膜屏障結構完整性、免疫調劑和抑制病原菌，進行腸道菌群干預可改善腸道菌群結構，改善免疫調節功能[53]。雷清芝等[54]利用羅伊氏乳桿菌（Lactobacillus reuteri） LP4 探究對東方蜜蜂成年工蜂存活率、腸道菌群結構和抗菌肽的影響研究表明，飼喂東方蜜蜂成年工蜂后可提高存活率。乳酸菌(LAB)是不形成芽孢的有益細菌，存在于乳制品（如酸奶） 中[55]。有研究表明，LAB 對蜜蜂細菌致病菌有抑制作用[56,57]。Nguyen 等人[58]對體外培養的健康西方蜜蜂幼蟲和感染SBV 的幼蟲噴灑酸奶以判斷其療效及對幼蟲的影響，發現噴灑酸奶后對消除SBV 的臨床癥狀方面具有較高的成功率，且酸奶對健康的幼蟲無害。腸道菌群干預為防治東方蜜蜂CSBV 提供了重要的思路與新的見解。

4.3 多肽藥物

小分子陽離子六肽 （short cationic hexapeptides，SP6） 在體外抗菌實驗[59]和中囊病治療實驗[60]中被證實具有多種生物活性，且具有先天免疫調節的功能。沈克飛等人[61]將SP6 溶于糖蜜水中，間隔1 天飼喂，連續使用9 次，發現0.1%的SP6 給藥能顯著性地降低感染CSBV 的蜂群幼蟲死亡率，防治效果達到74.48%。

4.4 RNA 干擾

RNAi 是生物天然免疫的主要機制之一，已廣泛應用于各種疾病的治療[9]。史紅霞等[10]通過喂食dsRNA 使CSBV 的RdRp 下調85%，對CSBV 表達具有一定的抑制作用。除此之外，張鶴等[62]喂食CSBV 衣殼蛋白VP1 的dsRNA，馬躍宇等[63]喂食CSBV 的VP2 蛋白的siRNA 均取得了不錯的抑制效果。RNAi 技術防治蜂群CSBV 具有創新性，但RNAi 技術的成本較高。

5 展望

目前，研究者對中囊病的致病機理已經有了較為清晰的認知，廣大研究者與養蜂者針對防治中囊病展開了大量的試驗與研究，形成了常規防治、藥物防治以及生物技術防治等一系列方法。這些方法在一定程度上對防治中囊病起到了效果。但是，蜜蜂作為社會性昆蟲，群體之力是其種群繁衍的策略，對于患病的蜂群，單純的藥物干預對蜜蜂個體的毒性不可忽視，即使病癥得以控制，蜜蜂的群勢也會被削減。中華蜜蜂是我國珍貴的本土蜜蜂種質資源，對于中囊病的防治應以預防為主，治療為輔，重視蜜蜂福利，減少藥物的使用，這對蜜蜂的健康高效養殖以及保障蜂蜜的安全生產均具有積極意義。