北蒼術(shù)炮制工藝研究

柏 陽(yáng)，趙雪岑，逄 健，徐小穎，才 謙

(遼寧中醫(yī)藥大學(xué) 藥學(xué)院，遼寧 大連 116600)

中藥材蒼術(shù)的主要入藥部位是蒼術(shù)的干燥根莖，來(lái)自于菊科植物北蒼術(shù)(Atractybodeschinensis(DC.) Koidx)或茅蒼術(shù)(Atractylodeslancea(Thunb.)DC.)。蒼術(shù)中含有多種化學(xué)成分，主要活性成分為聚乙烯炔類、倍半萜類及倍半萜苷類，其中，聚乙烯炔類為蒼術(shù)的重要特征性成分[1]。中藥炮制是在中醫(yī)藥理論指導(dǎo)下，根據(jù)中醫(yī)辨證施治的需求，將中藥材切片、炮炙等，加工成為規(guī)格一定的飲片的技術(shù)[2]。蒼術(shù)在中國(guó)已有兩千多年的藥用歷史，其炮制方法可大致分為凈制、切制、加輔料制及不加輔料制等[3]，歷代沿用的蒼術(shù)炮制方法有炒焦、炒黃、炒炭、米泔水炒、麩炒、土炒、醋炒、鹽炒、酒制等20余種，而2020年版《中華人民共和國(guó)藥典》[4]僅收載了生品和麩炒品2種，蒼術(shù)生品為燥濕、祛風(fēng)佳品，治痰之本，治痞要藥；麩炒之后蒼術(shù)燥性緩和，健脾和胃的作用增強(qiáng)[5]。

北蒼術(shù)作為遼寧省的道地藥材是目前蒼術(shù)市場(chǎng)最主流的品種。盡管已有蒼術(shù)炮制工藝的相關(guān)研究，但所用藥材品種均為茅蒼術(shù)，且多為茅蒼術(shù)麩炒工藝的研究[6]，蒼術(shù)生品飲片加工工藝的研究較少[7]。本課題基于前人研究，以遼寧省道地藥材北蒼術(shù)為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，分別考察了北蒼術(shù)生品飲片和麩炒飲片的最佳加工工藝，優(yōu)化工藝參數(shù)，為工業(yè)化生產(chǎn)北蒼術(shù)飲片提供數(shù)據(jù)支持。

1 儀器、試劑與試藥

1.1 儀器

Agilent 1100 Series高效液相色譜儀(美國(guó)安捷倫公司)；Tigerkin C18(5 μm，4.6 mm×250 mm)色譜柱(大連思普精工有限公司)；KH-300P型超聲波清洗器(昆山禾創(chuàng)超聲儀器有限公司)；CP225D電子天平(十萬(wàn)分之一,德國(guó)Sartorius公司)；AR2140電子分析天平(上海奧豪斯公司)；DHG-9070A 型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司)。

1.2 試劑

乙腈(色譜純，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司)；純凈水(杭州娃哈哈集團(tuán)有限公司)。

1.3 試藥與藥材

蒼術(shù)素對(duì)照品(上海源葉科技有限公司，批號(hào)：B20128)、TDDA對(duì)照品(上海源葉科技有限公司，批號(hào)：B23334)。北蒼術(shù)藥材鮮品從遼寧省丹東市寬甸滿族自治縣大西岔村購(gòu)買，經(jīng)遼寧中醫(yī)藥大學(xué)植物教研室許亮教授鑒定為菊科植物北蒼術(shù)Atractylodeschinensis(DC.) Koidz．的根莖。

2 方法與結(jié)果

2.1 蒼術(shù)素和TDDA含量測(cè)定

2.1.1 色譜條件 色譜柱：Tigerkin C18(5 μm，4.6 mm×250 mm)；流動(dòng)相：乙腈-水(72∶28)；流速：1 mL/min；柱溫：25 ℃；進(jìn)樣量：10 μL；檢測(cè)波長(zhǎng)：340 nm。

2.1.2 對(duì)照品溶液制備 精密稱取適量蒼術(shù)素對(duì)照品和TDDA對(duì)照品置于棕色容量瓶中，分別加甲醇制備成0.203 5 mg/mL、0.109 8 mg/mL的對(duì)照品溶液，即得。

2.1.3 供試品溶液制備 取供試品粉末各(過(guò)60目篩)約0.5 g，置棕色錐形瓶中，向各瓶中精密加入甲醇溶液5 mL，密塞，稱定質(zhì)量，超聲處理(功率250 W，頻率50 kHz)30 min，放冷，再一次稱定質(zhì)量，用甲醇補(bǔ)足前后損失的質(zhì)量，搖勻，濾過(guò)，分別定容至10 mL棕色量瓶中，過(guò)0.45 μm微孔濾膜，即得。見圖1、圖2、圖3。

圖1 蒼術(shù)素對(duì)照品HPLC圖譜

圖2 TDDA對(duì)照品HPLC圖譜

圖3 供試品 HPLC圖譜

2.1.4 線性關(guān)系考察 精密吸取蒼術(shù)素對(duì)照品溶液(質(zhì)量濃度為0.203 5 mg/mL)1.0、3.0、5.0、7.0、9.0、11.0 μL分別注入高效液相色譜儀中，測(cè)定各色譜峰面積，以進(jìn)樣量X(μg)與蒼術(shù)素峰面積Y進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程為：Y=6 393.2X-48.888，r=0.999 8，提示蒼術(shù)素進(jìn)樣量在0.204～2.244 μg范圍內(nèi)進(jìn)樣量與峰面積的線性關(guān)系良好。

精密吸取TDDA對(duì)照品溶液(質(zhì)量濃度為0.109 8 mg/mL)1.0、3.0、5.0、7.0、9.0、11.0 μL分別注入高效液相色譜儀中，測(cè)定各色譜峰面積，以進(jìn)樣量X(μg)與TDDA峰面積Y進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程為：Y=3270.3X-49.168，r=0.999 6，提示TDDA進(jìn)樣量在0.110 μg～1.21 μg范圍內(nèi)進(jìn)樣量與峰面積的線性關(guān)系良好。

2.1.5 精密度試驗(yàn) 分別吸取對(duì)照品溶液(蒼術(shù)素對(duì)照品溶液，質(zhì)量濃度為0.203 5 mg/mL；TDDA對(duì)照品溶液，質(zhì)量濃度為0.109 8 mg/mL)，按“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣10 μL連續(xù)6次，測(cè)得峰面積的RSD分別為蒼術(shù)素1.9%、TDDA2.2%，表明本儀器精密度良好。

2.1.6 穩(wěn)定性試驗(yàn) 精密吸取同一份供試品溶液(麩炒方式：170 ℃下100 g北蒼術(shù)飲片加10 g麥麩炒制6 min)，按“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件，分別間隔 0、4、8、12、24、48 h 進(jìn)樣10 μL進(jìn)行測(cè)定，測(cè)得峰面積的RSD分別為蒼術(shù)素1.3%、TDDA 1.1%，表明樣品在48 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.1.7 重復(fù)性試驗(yàn) 精密稱量同一份供試品(麩炒方式：170 ℃下100 g北蒼術(shù)飲片加10 g麥麩炒制6 min)0.5 g 6份。按供試品方法測(cè)定，結(jié)果蒼術(shù)素和TDDA的平均含有量分別為0.86%(RSD為2.7%)、2.10%(RSD為2.5%)，表明本方法重復(fù)性良好。

2.1.8 加樣回收率試驗(yàn) 取已知含量的樣品(麩炒方式：170 ℃下100 g北蒼術(shù)飲片加10 g麥麩炒制6 min，蒼術(shù)素含有量為0.86%，TDDA的含有量為2.10%)粉末0.25 g 6份，按“2.1.3”項(xiàng)下供試品溶液制備方法進(jìn)行操作，測(cè)定其回收率。測(cè)定結(jié)果提示蒼術(shù)素和TDDA的回收率分別在95.8%～103.7%(RSD為2.7%)、97.7%～103.5%(RSD為2.3%)，符合有關(guān)規(guī)定。

2.2 生品飲片加工工藝研究

2.2.1 切制厚度考察 將北蒼術(shù)藥材除去雜質(zhì)、洗凈、潤(rùn)透后，取大小均勻的北蒼術(shù)藥材分成6份，每份500 g，3份切成厚度在1～2 mm的北蒼術(shù)飲片，另3份切成厚度在2～4 mm的北蒼術(shù)飲片，備用。將干燥后的飲片先后通過(guò)20目篩和2目篩。通過(guò)20目篩篩出的稱為碎屑，通過(guò)2目篩，篩出的稱為下料。將邊緣翹起、不平整的蒼術(shù)稱為翹片。碎屑率=碎屑的質(zhì)量/總質(zhì)量，下料率=下料的質(zhì)量/總質(zhì)量，翹片率=翹片的質(zhì)量/總質(zhì)量。另各取藥材100 g，加8倍量水在圓底燒瓶?jī)?nèi)，浸泡30 min后進(jìn)行回流提取30 min，得到的濾渣用3層紗布進(jìn)行過(guò)濾，再加6倍量水提取30 min，合并濾液，轉(zhuǎn)移到干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，于烘箱105 ℃干燥至恒重，出膏率計(jì)算公式為m/M×100%(m為浸膏質(zhì)量，M為藥材質(zhì)量)。各樣品的碎屑率、下料率、翹片率及出膏率的結(jié)果見表1。

由表1可知，碎屑率1～2 mm片>2～4 mm片；下料率1～2 mm片>2～4 mm片；翹片率1～2 mm片>2～4 mm片；出膏率1～2 mm片>2～4 mm片，1～2 mm北蒼術(shù)飲片除出膏率稍高于2～4 mm片外，其碎屑率、下料率、翹片率都高于2～4 mm片，綜合考慮，確定切制厚度為2～4 mm的厚片。

2.2.2 干燥方式考察 取大小均勻切制好的厚度為2～4 mm的北蒼術(shù)飲片，分成18份，每份500 g，分別采用陰干、曬干、50 ℃烘干、60 ℃烘干、70 ℃烘干、80 ℃烘干6種不同干燥方式進(jìn)行干燥，備用。分別記錄干燥前北蒼術(shù)飲片的質(zhì)量和經(jīng)6種不同干燥方式后北蒼術(shù)飲片的質(zhì)量，干燥前質(zhì)量-干燥后質(zhì)量為損失質(zhì)量，見表2。分別測(cè)定6種不同干燥方法后北蒼術(shù)飲片中蒼術(shù)素和TDDA的含量，見表3。

表3 6種不同干燥方法后北蒼術(shù)飲片中蒼術(shù)素、TDDA的含量 (n=3)

由表2、表3可知，蒼術(shù)素的含量依次為80 ℃烘干>70 ℃烘干>自然陰干>自然曬干>60 ℃烘干>50 ℃烘干；TDDA的含量依次為80 ℃烘干>70 ℃烘干>自然陰干>自然曬干>60 ℃烘干>50 ℃烘干；損失質(zhì)量依次為80 ℃烘干>70 ℃烘干>60 ℃烘干>自然曬干>50 ℃烘干>自然陰干。結(jié)合損失質(zhì)量、蒼術(shù)素含量和TDDA含量，確定干燥方式選用70 ℃烘干。

2.3 麩炒品飲片加工工藝研究

2.3.1 麥麩用量考察 2020年版《中華人民共和國(guó)藥典》記載的蒼術(shù)飲片麩炒方法中藥材和麥麩的用量為每 100 kg待炮炙品，用麩10～15 kg[4]。取大小均勻的北蒼術(shù)飲片分為9份，每份100 g，各與10 g、12 g、15 g麥麩170 ℃炒制6 min至飲片呈深黃色取出備用。分別測(cè)定3種不同麥麩用量條件下北蒼術(shù)飲片中蒼術(shù)素、TDDA的含量見表4。

表4 3種不同麥麩用量條件下北蒼術(shù)飲片中蒼術(shù)素、TDDA的含量 (n=3)

由表4可知，蒼術(shù)素的含量依次為用麩量10 g>12 g>15 g；TDDA的含量依次為用麩量10 g>12 g>15 g，綜合考慮蒼術(shù)素和TDDA的含量，確定每1 kg飲片用麩量100 g為宜。

2.3.2 炒制溫度考察 取大小均勻的北蒼術(shù)飲片分成24份，每份100 g，各與10 g麥麩在140 ℃、150 ℃、160 ℃、170 ℃、180 ℃、190 ℃、200 ℃、210 ℃炒至飲片呈深黃色取出備用。分別記錄麩炒前北蒼術(shù)飲片的質(zhì)量和經(jīng)不同溫度炮制后北蒼術(shù)飲片的質(zhì)量，干燥前質(zhì)量-干燥后質(zhì)量為損失質(zhì)量，見表5。分別測(cè)定各不同麩炒溫度條件下北蒼術(shù)飲片中蒼術(shù)素、TDDA的含量見表6。

表5 8種不同麩炒方法下的麩炒條件

表6 8種不同麩炒溫度條件下北蒼術(shù)飲片中蒼術(shù)素、TDDA的含量 (n=3)

由表5、表6可知蒼術(shù)素的含量依次為炒制溫度170 ℃>160 ℃>150 ℃>180 ℃>190 ℃>200 ℃>210 ℃>140 ℃；TDDA的含量依次為炒制溫度170 ℃>160 ℃>150 ℃>180 ℃>190 ℃>200 ℃>210 ℃>140 ℃，損失質(zhì)量依次為170 ℃>150 ℃>160 ℃>200 ℃>190 ℃>180 ℃>210 ℃>140 ℃，結(jié)合損失質(zhì)量、蒼術(shù)素含量和TDDA含量，確定麩炒溫度為150～180 ℃。

3 討論

規(guī)范飲片的炮制工藝，不斷完善炮制規(guī)范，一直是中藥炮制研究領(lǐng)域的重要內(nèi)容。中藥所含的化學(xué)成分復(fù)雜，中藥炮制涉及的工藝也多種多樣，因此在研究炮制工藝時(shí)應(yīng)同時(shí)考慮中藥的化學(xué)成分及工業(yè)化生產(chǎn)的需求，綜合選擇出最佳的炮制工藝。

切制作為北蒼術(shù)飲片炮制的一個(gè)中間環(huán)節(jié)，對(duì)飲片的質(zhì)量有一定影響，本課題基于相關(guān)資料，設(shè)置了1～2 mm和2～4 mm兩種厚度，以碎屑率、下料率、翹片率及出膏率為指標(biāo)，優(yōu)選出適合工業(yè)化生產(chǎn)的最佳切制工藝。由結(jié)果可知，隨著北蒼術(shù)飲片厚度增加，其碎屑率、下料率及翹片率總體為下降趨勢(shì)，當(dāng)北蒼術(shù)飲片在1～2 mm厚度時(shí)，翹片率高就易破碎，會(huì)進(jìn)一步增加成本，不適用于產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)。雖然1～2 mm厚度的北蒼術(shù)飲片出膏率高，但在生產(chǎn)中可通過(guò)增加煎煮時(shí)間提高出膏率，因此北蒼術(shù)飲片的切制工藝應(yīng)在2～4 mm為宜。

在考察北蒼術(shù)飲片干燥方式上，本課題參照《中華人民共和國(guó)藥典》規(guī)定設(shè)置了6種干燥方式，以損失質(zhì)量、蒼術(shù)素含量及TDDA含量為考察指標(biāo)，結(jié)果表明，80 ℃烘干后其蒼術(shù)素含量最高，且質(zhì)量損失也最大，不利于飲片企業(yè)效益提升，自然陰干質(zhì)量損失最小，其蒼術(shù)素含量與TDDA含量較低，干燥時(shí)間長(zhǎng)耗時(shí)久，因此最終選用的干燥方式為70 ℃烘干，適用于工業(yè)化生產(chǎn)。在研究麩炒工藝時(shí)，參照傳統(tǒng)麩炒工藝考察了起煙時(shí)的溫度為140 ℃，210 ℃時(shí)北蒼術(shù)飲片極易焦糊，因此設(shè)置的考察溫度為140～210 ℃。

本課題考察了麥麩的用量，以蒼術(shù)素及TDDA的含量為考察指標(biāo)，從結(jié)果可知，隨著麥麩用量的增加，這兩項(xiàng)指標(biāo)的含量呈下降趨勢(shì)，因此選擇了每1 kg飲片用麩量100 g；隨后考察了炒制溫度，以損失質(zhì)量、蒼術(shù)素的含量及TDDA的含量為考察指標(biāo)，結(jié)果表明，在170 ℃時(shí)蒼術(shù)素含量和TDDA含量最高，其質(zhì)量損失也最大，且在工業(yè)生產(chǎn)中保持在某一特定的溫度麩炒北蒼術(shù)飲片很難實(shí)現(xiàn)，綜合考慮質(zhì)量損失、蒼術(shù)素含量及TDDA含量，選出的既有利于企業(yè)效益，又可保證北蒼術(shù)飲片質(zhì)量的麩炒溫度為150～180 ℃。本課題為北蒼術(shù)飲片規(guī)范化生產(chǎn)奠定了良好基礎(chǔ)。