豉香型白酒中二元酸二乙酯含量的測定方法

◎ 招原春，曾莉雅

（1.廣東省食品工業研究所有限公司，廣東 廣州 511442；2.廣東省食品質量監督檢驗站，廣東 廣州 511442；3.廣東省食品工業公共實驗室，廣東 廣州 511442）

自1979年白酒的香型學說誕生以來，至今已經有12種白酒香型。豉香型的白酒起源于珠三角一帶，1996年豉香型白酒國家標準的制訂及實施，使得其成為繼濃香、清香、米香、鳳香4種香型白酒后成立的第5個香型白酒國家標準，豉香型白酒至今有近130年的生產歷史，是具有南國特色的地方性產品，以其獨特的豉味，及“玉潔冰清，豉香獨特，醇和甘滑，余味爽凈”的風格深受粵桂兩省、港澳及南陽華僑的青睞[1-3]。

二元酸二乙酯是豉香型白酒中重要的微量物質和特征成分之一，通過流入陳肥豬肉池中醞浸而產生[4]，它們在酒體中對豉香型白酒的口感與風味都有著非常大的促進作用。故此，二元酸二乙酯已成為國家標準《豉香型白酒》[5]（GB/T 16289—2018）規定例行檢驗的指標之一。其檢驗方法為《白酒分析方法[附修改單]》[6]（GB/T 10345—2007），取用十四醇作內標對豉香型白酒中的二元酸二乙酯進行檢測，但由于十四醇在低度酒中溶解度不高，出現渾濁情況，在氣相色譜的檢驗過程中常出現非線性分流，檢測的重現性不佳，不能滿足微量跟蹤分析的要求。余劍霞[7]選用肉桂酸乙酯作為內標物，直接進樣對白酒中的二元酸二乙酯進行檢測，但白酒內可能存在肉桂酸乙酯物質，導致檢測數據不準確。本文參考《白酒分析方法[附修改單]》（GB/T 10345—2007）二元二酸二乙酯含量的測定方法，內標采用十四醇，降低內標濃度，采用內標標準曲線方法進行校正，建立回收率高、穩定性強的豉香型白酒中二元酸（庚二酸、辛二酸、壬二酸）二乙酯的分析方法。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

二元酸（庚二酸、辛二酸、壬二酸）二乙酯的標準物質：辛二酸二乙酯，純度99.8%，庚二酸二乙酯，純度97.8%，壬二酸二乙酯，純度99.9%；內標物質：十四烷，純度99.5%；乙醇（色譜純）；標準物質均采購上海安譜公司。

實驗室用水為Milli-Q Tntegral 超純水；白酒樣品：廣州市市場上流通的10種豉香型白酒，酒精度在（30±2）%vol，生產日期在2018—2020年；安捷倫7890B氣相色譜儀（配氫火焰離子化檢測器FID，美國安捷倫公司）；電子天平（瑞士梅特勒-托利多公司）；移液器（0.1～1.0 mL，德國艾本德公司）。

1.2 試驗方法

1.2.1 溶液配制

30%乙醇溶液：量取30 mL乙醇，用水定容至100 mL，超聲混勻。

內標儲備液：稱取0.4 g（精確至0.01 mg）的十四醇至100 mL容量瓶中，用乙醇定容至100 mL，混勻。0～4 ℃低溫冰箱密封保存。

二元酸（庚二酸、辛二酸、壬二酸）二乙酯混合儲備液：分別移取1 mL的二元酸（庚二酸、辛二酸、壬二酸）二乙酯組分至100 mL容量瓶中，用乙醇溶液定容至100 mL，混勻。0～4 ℃冰箱密封保存。

1.2.2 氣相色譜條件

色譜柱：安捷倫DB-WAX UI聚乙二醇毛細管柱（60 m×0.25 mm×0.25 μm）。色譜柱溫度：初溫35 ℃，保持1 min，以3.0 ℃·min-1升到70 ℃，以3.5 ℃·min-1升到180 ℃，再以15 ℃·min-1升到210 ℃，保持15 min。檢測器溫度：250 ℃。進樣口溫度：250 ℃。恒壓模式-色譜柱壓力：165.47 kPa。進樣量：1.0 μL。分流比：10∶1。

2 結果與分析

2.1 配制標準溶液濃度的選擇

參考標準《白酒分析方法[附修改單]》（GB/T 10345—2007）中二元酸（庚二酸、辛二酸、壬二酸）二乙酯檢測方法，吸取二元酸（庚二酸、辛二酸、壬二酸）二乙酯混合儲備液0.100 mL，移入10 mL容量瓶，加入內標儲備液0.2 mL，分別加入25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%乙醇溶液，定容至刻度。搖勻，上機進行色譜分析，計算二元酸（庚二酸、辛二酸、壬二酸）二乙酯校正因子，結果見圖1。從圖1可以看出，隨著乙醇濃度的增大，校正因子不停變大，直到50%乙醇濃度，校正因子方趨于穩定，說明不同濃度的酒精度，對同一濃度的校正因子有一定的影響，特別樣品為低度豉香型白酒時，運用GB/T 10345—2007方法檢測二元酸二乙酯時，會出現較大的偏差。故本方法采用低度酒精度（30%vol）內標標準曲線方法進行校正，有效解決上述問題，

圖1 不同乙醇濃度的二元酸（庚二酸、辛二酸、壬二酸）二乙酯校正因子圖

2.2 方法的線性范圍及檢出限

分別吸取10 μL、20 μL、50 μL、80 μL、100 μL和120 μL二元酸（庚二酸、辛二酸、壬二酸）二乙酯混合儲備液移入10 mL容量瓶，分別加入0.1 mL十四醇內標，30%乙醇定容刻度線，得6個標準溶液濃度點，分別平行測定3次，取平均值；由圖2可知，標準品組分與內標物均得到完全的分離。以信噪比為3（S/N=3）計算檢出限，線性范圍、相關系數及檢出限見表1。結果表明目標物各成分都有很好的分離，標準曲線具有很好的線性關系。

圖2 標準物質圖譜圖

表1 線性范圍、相關系數及檢出限表

2.3 樣品前處理

吸取少量樣品至10 mL容量瓶中，加入0.1 mL內標儲備液，再加入樣品至刻度，充分渦旋搖勻，超聲至氣泡消失，上氣相色譜測試。由色譜圖3可知，白酒樣品中的待測組分、內標物均得到完全的分離，無干擾物。

圖3 豉香型白酒色譜圖

2.4 回收率及精密度試驗

稱取同一瓶豉香型白酒樣品，分別加入高中低3個濃度標準溶液進行加標試驗。每個濃度加標取6份平行樣，進行加標試驗，結果見表2。由表2可知，二元酸（庚二酸、辛二酸、壬二酸）二乙酯在豉香型白酒中的加標回收率86%～116%，RSD在1.03%～3.54%，該方法滿足試驗分析要求。

表2 回收率、精密度實驗結果表（n=6）

2.5 實際樣品測定

對市場上流通的10個豉香型白酒樣品進行檢測，結果見表3。結果表明，十四醇內標在低度酒溶解不佳，造成GB/T 10345—2007測定二元酸二乙酯的含量比本文方法測得二元酸二乙酯的含量偏大，根據國家標準《豉香型白酒》（GB/T 16289—2018）的要求，豉香型白酒二元酸（庚二酸、辛二酸、壬二酸）二乙酯的含量應≥1.0 mg·L-1，本次方法檢測市場上流通的10個豉香型白酒樣品，有3個不合格，合格率為70%。

表3 豉香型白酒檢測結果表

3 結論

通過優化標準溶液，采用30%乙醇內標標曲方法，建立了回收率高、穩定性強的豉香型白酒中二元酸（庚二酸、辛二酸、壬二酸）二乙酯的分析方法，解決了內標十四醇在低度酒中溶解度不高產生渾濁，使得氣相色譜的檢驗過程中常出現非線性分流造成檢測的重現性差問題，本方法滿足豉香型白酒中二元酸（庚二酸、辛二酸、壬二酸）二乙酯微量跟蹤分析的要求，本方法僅適用酒精度為（30±1）%vol的豉香型白酒樣品二乙酸二乙酯含量的測定。