無針多防：非洲豬瘟常態下動物疫病防控新策略

林文耀，陳炳全，尚 策，高日明，劉國民

（金宇保靈生物藥品有限公司，內蒙古 呼和浩特 010030）

非洲豬瘟（African Swine fever, ASF）是由非洲豬瘟病毒（African Swine fever virus, ASFV）感染家豬和野豬引起的一種急性、出血性、烈性傳染病。世界動物衛生組織（OIE）將其列為法定報告動物疫病，該病也是我國重點防范的一類動物疫病。其特征是發病過程短，最急性和急性感染死亡率高達100%，臨床表現為發熱（達40～42 ℃），心跳加快，呼吸困難，部分咳嗽，眼、鼻有漿液性或黏液性膿性分泌物，皮膚發紺，淋巴結、腎、胃腸黏膜明顯出血，非洲豬瘟臨床癥狀與豬瘟癥狀相似[1-2]。自2018年8月傳入我國以來，非洲豬瘟給我國養豬生產造成了巨大的經濟損失，成為我國養豬業的頭號大敵。在非洲豬瘟1周年之際，農業農村部表示要“堅決打好打贏非洲豬瘟防控攻堅戰、持久戰”。近幾年的防非經驗告訴我們，依靠生物安全防控非洲豬瘟是可行的，但是對其他重要烈性傳染病的防控也不能掉以輕心。臨床上也經常發生非瘟防控很好的豬場暴發藍耳病或偽狂犬病等疾病，說明疫苗免疫仍然是防控重大傳染病的有效手段。

無針注射器（Needle-free Injection device）是一種不需要通過針頭實施給藥的新型注射器，基本結構主要包括動力源、動力儲存裝置、傳動裝置以及制動部件。其工作原理首先經過動力源，通過傳動裝置將能量輸送到動力存儲裝置中，制動部件鎖緊動力存儲裝置，待收到觸發信號后，制動裝置瞬間釋放，動力存儲裝置中的動力撞擊存藥腔內的活塞桿，將藥物以注射流的形式噴射出去，穿透皮膚形成超微細射流，持續射流的停滯壓力使藥液在孔洞末端以近似球狀的形式向孔洞四周擴散，從而實現皮下或肌肉注射[3-4]，有效杜絕針頭傳播疫病的風險。

實際的養豬生產中，仔豬在60～70日齡左右會進行豬瘟二免，及偽狂犬病和口蹄疫的首次肌肉注射，提示豬瘟、偽狂犬病、口蹄疫疫苗聯合免疫在生產上是可行的，可有效降低免疫次數，免疫效果確實[5]。本研究比較針頭注射和無針注射的不同免疫方式，評估“口蹄疫+豬瘟+偽狂犬病”組合免疫的效果，為非洲豬瘟常態化下豬群的疫病防控提供新的思路。

1 材料與方法

1.1 疫苗

豬口蹄疫O型、A型二價滅活疫苗（Re-O/MYA98/JSCZ/2013株+Re-A/WH/09，某生物藥品有限公司生產，批號20139002），豬偽狂犬病活耐熱保護劑活疫苗（國內最新分離株C株，江蘇某生物藥品有限公司生產，批號19225012），豬瘟活疫苗（傳代細胞源，遼寧某生物股份有限公司生產，批號19335029）。

1.2 無針注射器

無針注射器由武漢市正華精機技術發展有限公司提供，以CO2為動力，采用壓力射流技術，將疫苗通過高壓和微孔形成很大動能的射流直接將疫苗注射到體內。

1.3 試驗豬場

某母豬存欄2 000頭自繁自養豬場，試驗周期：2020年6月20日開始，7月20日結束。

1.4 試驗設計

選取180日齡的后備母豬200頭，隨機分為2組，每組100頭，試驗分組見表1。具體操作為：口蹄疫滅活疫苗作為稀釋液稀釋豬瘟活疫苗，然后再稀釋豬偽狂犬病活耐熱保護劑活疫苗。通過使用方法創新形成口蹄疫-豬瘟-偽狂犬病三聯苗。首次免疫前、免疫后30 d每組隨機采血15頭，分離血清，-20 ℃冷凍保存備用，分別進行豬口蹄疫O型抗體、豬偽狂犬病gB抗體、豬瘟抗體的檢測。

表1 試驗分組

1.5 統計副反應豬只數量

記錄疫苗注射2小時內副反應：可視黏膜發紺，體溫升高，采食量下降，呼吸急促，站立不穩，肌肉震顫，倒地，口吐白沫等。

1.6 血清抗體檢測

血清抗體檢測均按照相應檢測試劑盒說明書。FMD O 型病毒抗體液相阻斷ELISA試劑盒：內蒙古金邁詩生物科技有限公司產品；豬瘟（CSFAb）病毒抗體檢測試劑盒：美國IDEXX公司產品；豬偽狂犬病病毒gB抗體ELISA試劑盒：荷蘭百測BioChek公司產品。FMD O 型抗體判斷標準：對照臨界值，抗體效價＜1∶64時判為陰性，≥1∶64時判為陽性。CSF抗體判定標準：阻斷值＜40% 時判為陰性，≥40% 時判為陽性。豬偽狂犬病gB抗體判定標準：效價范圍≥1 071判為陽性。

2 結果

2.1 針頭注射與無針注射的副反應比例

針頭注射與無針注射組的豬只均未出現可視黏膜發紺，體溫升高，采食量下降，呼吸急促，站立不穩，肌肉震顫，倒地，口吐白沫等副反應現象。

2.2 針頭注射與無針注射各疫苗抗體陽性率的檢測結果

如表2所示，針頭注射組與無針注射組豬瘟抗體、口蹄疫O型抗體、偽狂犬病gB抗體的陽性率均為100%。

表2 比較不同免疫方式各疫苗的抗體陽性率

2.3 針頭注射與無針注射豬瘟疫苗的抗體檢測結果

如表3所示，針頭注射組的豬瘟抗體平均阻斷值為88.37%，無針注射組為86.53%，均大于40%。

表3 比較不同免疫方式豬瘟疫苗的抗體檢測結果

2.4 針頭注射與無針注射偽狂犬病疫苗的gB抗體檢測結果

如表4所示，針頭注射組的偽狂犬病gB抗體平均值為9 243.42，無針注射組為9 228.64，均達到優良的免疫效果。

表4 比較不同免疫方式偽狂犬病疫苗的gB抗體檢測結果

3 分析與討論

非洲豬瘟的暴發，使我國養豬業面臨“老病未除，又添新病”的嚴重挑戰。非洲豬瘟常態化使得疫病越來越復雜，為減少人豬接觸，減少免疫次數導致的免疫應激及針頭傳播疫病的風險，需要重構現有的免疫程序及應用新的免疫方式。與傳統的針頭注射器相比，無針注射可以阻斷病原微生物交叉感染、有效防止胴體損傷和針頭斷裂等風險的發生，從而避免注射針折斷留在動物體內造成食品安全事故[6]、減少動物創傷疼痛，符合動物福利要求、提高肉品質等。

本研究比較針頭注射或無針注射兩種不同的免疫方式，評估“口蹄疫+豬瘟+偽狂犬病”組合免疫的效果及副反應比例，發現針頭注射或無針注射的豬只均未出現副反應，說明無針多防是安全的。在抗體陽性率方面，針頭注射組與無針注射組的豬瘟抗體、口蹄疫O型抗體、偽狂犬病gB抗體陽性率均為100%。比較兩種不同免疫方式的豬瘟免疫效果，針頭注射組與無針注射組的豬瘟抗體平均阻斷值分別為88.37% 及86.53%，均大于40%，而且變異系數均小于20%，說明達到了良好的群體免疫效果。偽狂犬病疫苗的gB抗體檢測結果也提示兩種不同免疫方式同樣產生較高的gB抗體，說明無針注射器+組合免疫的“無針多防”方式免疫效果確實，可以在生產臨床推廣。“無針多防”成為疫病防控的重要手段，同時可以降低工人的勞動強度，提高養殖效益，實現減負增效的目標，應對豬價低迷的寒冬。