一例豬流行性腹瀉的診斷與防控

李天芝，于新友

（山東綠都生物科技有限公司，山東 濱州 256600）

豬流行性腹瀉（Porcine epidemic diarrhea viruse, PED）是由豬流行性腹瀉病毒（Porcine epidemic diarrhea, PEDV）引起的一種以嘔吐、水樣腹瀉、嚴(yán)重脫水為特征的豬消化道傳染病[1]。各日齡豬均可感染發(fā)病，哺乳仔豬死亡率高，病死率可達(dá)100%[2]。成年豬死亡率低，大部分可耐過，但會導(dǎo)致生長緩慢，飼料報(bào)酬率降低。豬場感染后可反復(fù)發(fā)病，病毒一旦進(jìn)入豬場很難清除，主要通過糞口途徑傳播。一年四季均可發(fā)病，冬春寒冷季節(jié)高發(fā)。PED已經(jīng)成為危害我國養(yǎng)豬業(yè)最嚴(yán)重的疾病之一，給我國養(yǎng)豬業(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失[3]。筆者曾接診一例湖北省某規(guī)模化豬場腹瀉病例，據(jù)臨床觀察、病理剖檢及實(shí)驗(yàn)室檢測，確診為豬流行性腹瀉，并提出了一系列的防治措施，使疫情得到控制，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 發(fā)病情況

2021年3月，魯北地區(qū)某規(guī)模化豬場哺乳仔豬精神沉郁、食欲減退，出現(xiàn)水樣腹瀉，肛門周圍被糞便污染，體溫正常，嘔吐，迅速脫水，3 d內(nèi)死亡。1周齡豬死亡嚴(yán)重，10日齡以上豬死亡率低，死亡豬消瘦、脫水嚴(yán)重。圈舍內(nèi)有腥臭味，耐過仔豬生長發(fā)育不良。頭胎母豬所產(chǎn)仔豬發(fā)病率高，其余豬群母豬、保育和肥育豬均未見發(fā)病，豬場母豬產(chǎn)前未注射豬流行性腹瀉疫苗。自行抗生素治療無效，送山東綠都生物科技有限公司獸醫(yī)診斷中心進(jìn)行確診。

2 剖檢病變

剖檢可見腸壁變薄，腸黏膜充血、出血，腸管腫脹，腸內(nèi)充滿氣體和黃色液體，腸黏膜脫落，腸系膜淋巴結(jié)腫大。胃內(nèi)有干酪樣凝乳塊，胃黏膜脫落。肝臟黃染，膽囊萎縮，膽汁稀薄。

3 實(shí)驗(yàn)室檢測

3.1 細(xì)菌檢測

無菌采取病死豬肝臟、脾臟涂片，革蘭氏染色、鏡檢，未發(fā)現(xiàn)細(xì)菌。將病料劃線接種于血瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱瓊脂培養(yǎng)基，37 ℃下培養(yǎng)24 h，均未見細(xì)菌生長。

3.2 病毒檢測

無菌采集病死豬腸道及內(nèi)容物樣品作病料，稱重，按1∶10比例加入無菌生理鹽水，研磨破碎，12 000 r/min離心2 min，取上清液采用AxyPrep體液病毒DNA/RNA小量提取試劑盒提取病毒核酸，按豬流行性腹瀉病毒熒光RT-PCR檢測試劑盒說明書操作，進(jìn)行熒光RT-PCR檢測反應(yīng)。反應(yīng)程序?yàn)椋?0 ℃逆轉(zhuǎn)錄10 min，95 ℃預(yù)變性2 min，然后進(jìn)入95 ℃ 5 s、55 ℃ 10 s、72 ℃ 15 s，40個(gè)循環(huán)。結(jié)果顯示：豬流行性腹瀉病毒核酸陽性（圖1），表明豬死于豬流行性腹瀉。

圖1 PEDV熒光RT-PCR擴(kuò)增檢測結(jié)果

4 診斷結(jié)果

結(jié)合發(fā)病豬的臨床癥狀、剖檢病變和實(shí)驗(yàn)室熒光RT-PCR病原學(xué)檢測結(jié)果，確診該場仔豬死于PEDV感染。

5 綜合防控措施

5.1 生物安全防范

豬場內(nèi)人員固定圈舍，禁止串舍和不必要的操作。強(qiáng)化消毒，提高消毒頻率，每天消毒1次，豬舍可用干粉消毒劑消毒，病豬用干粉消毒劑涂抹全身，并在母豬躺臥區(qū)和仔豬休息區(qū)投撒干粉消毒劑。道路通道鋪撒生石灰，各圈舍器具固定。及時(shí)清理糞便，病死豬無害化處理，7日齡發(fā)病豬及早淘汰處理，進(jìn)出圈舍嚴(yán)格消毒。

5.2 強(qiáng)化飼養(yǎng)管理

提高豬舍內(nèi)溫度，圈舍內(nèi)溫度維持在26～28 ℃，保證豬群環(huán)境舒適，圈舍保持干燥。提供優(yōu)質(zhì)全價(jià)飼料，禁止飼喂霉變飼料。補(bǔ)充維生素和微量元素，保證仔豬營養(yǎng)，以提高機(jī)體抗病力，降低豬群密度，加強(qiáng)通風(fēng)，豬只飲用溫水，水中添加電解質(zhì)多維。

5.3 緊急疫苗接種和對癥治療

豬場發(fā)病后，可緊急接種疫苗，母豬后海穴接種2頭份滅活疫苗，并肌肉接種1頭份滅活疫苗；仔豬后海穴接種2頭份滅活疫苗，并肌肉接種1頭份滅活疫苗。口服補(bǔ)液鹽（氯化鈉3.5 g、氯化鉀1.5 g、碳酸氫鈉2.5 g、葡萄糖20 g，加溫水至1 000 mL），以糾正脫水，防止酸中毒，提供充足干凈溫水供豬飲用。每噸飼料分別添加30% 阿莫西林180 g+50% 復(fù)方黃芪多糖250 g+電解質(zhì)多維1 000 g，防止細(xì)菌病繼發(fā)感染的發(fā)生；或添加益生菌，以促進(jìn)胃腸蠕動，平衡腸道細(xì)菌，增強(qiáng)機(jī)體免疫力，提升豬群健康水平。如果患病嚴(yán)重豬采取200 mL 5% 的葡萄糖氯化鈉溶液與15 g蒙脫石粉，混合均勻后灌服，每頭劑量為5～10 mL。

1個(gè)月后回訪，豬場病豬腹瀉停止，豬群健康狀況好轉(zhuǎn)。

6 討論

PEDV是冠狀病毒科、冠狀病毒屬。病毒粒子呈球形，有囊膜，核酸為單股正鏈RNA[4]。PEDV只有一個(gè)血清型，不同毒株毒力不同，毒株之間交叉保護(hù)力弱。PEDV對外界抵抗力弱，紫外線照射6 h可殺滅病毒[5]，對多種消毒劑敏感，如干粉消毒劑、碘制劑、季氨類消毒劑和過氧化物消毒劑等。低溫下PEDV存活時(shí)間長，病毒對高溫耐受性差，70 ℃熱水處理10 min可殺滅病毒。PED發(fā)生后豬場要選用相應(yīng)消毒劑強(qiáng)化消毒，降低環(huán)境中病毒載量，減少豬群感染幾率，也可以采用70 ℃熱水沖洗圈舍。PED自然感染潛伏期為5～8 d，人工感染潛伏期為24～48 h，受感染豬8 h后開始排毒[6]。發(fā)病豬糞便中含大量病毒粒子，1 g糞便溶解在100 m3水中，口服后仍可致豬發(fā)病。對發(fā)病豬和病死豬一定要及時(shí)清除，徹底消毒，并無害化處理，防止病原擴(kuò)散。

疫苗接種是防控PED的有效措施，本案例養(yǎng)豬戶并未接種腹瀉疫苗。當(dāng)前豬流行性腹瀉疫苗品種眾多，有滅活疫苗和活疫苗，活疫苗更適合緊急接種，產(chǎn)生效果快，要選擇正規(guī)廠家生產(chǎn)、口碑好的疫苗，活疫苗和滅活疫苗配合使用效果更好。免疫母豬可以使仔豬獲得保護(hù)抗體，減少發(fā)病，減輕病豬臨床癥狀，降低死亡率，減少排毒，但不能阻止病毒感染。PEDV屬RNA病毒，基因組變異程度大，選用相應(yīng)毒株疫苗免疫保護(hù)性效果更好。PEDV病原分離培養(yǎng)為疾病診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，但PEDV因其自身特性培養(yǎng)較困難，時(shí)間長、操作繁瑣，很難成功，臨床最快速、實(shí)用的診斷方法為熒光RT-PCR方法，通過對基因的檢測，確診疾病，速度快、操作簡單，可以及時(shí)采取相應(yīng)防控措施，減少豬場損失。