胰腺癌患者手術前后血清S100A9、MMP-9變化及其相關性

朱曉龍 張光亮 裴建灰 朱樂恒

作者單位：平煤神馬醫療集團總醫院普外科，河南，平頂山467000

胰腺癌是消化道常見惡性腫瘤，轉移快，患者生存時間短，病死率高。據統計大部分胰腺癌患者在1年左右死亡，5年生存期患者不超過4%［1］。手術是治療胰腺癌的首選方式，然而相關研究顯示胰腺癌患者手術及周圍淋巴結清掃后，生存時間一般約為11～20 個月，5年存活率不超過25%［2］。鈣結合蛋白A9 復合物（S100 calciumbinding protein A9，S100A9）可促進免疫與炎癥修復，其異常表達上調和多種惡性腫瘤的發生及發展有關，具有促癌作用［3］。基質金屬蛋白酶9（Matrix Metalloprotein-9，MMP-9）由結締組織細胞分泌，參與細胞外基質降解過程，使內皮細胞遷移增殖，促進新血管和基底膜形成，在腫瘤周圍組織浸潤、遠隔轉移中發揮重要作用［4］。本研究將比較手術前后胰腺癌患者血清S100A9、MMP-9 含量差異，分析兩項指標的相關性，分析其與臨床病理與預后的關系。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院2016年5月至2018年2月原發性胰腺癌行手術治療的患者60 例作為胰腺癌組，其中男性34 例，女性26 例；平均年齡（60.25±6.04）歲；腫瘤位置：胰頭25 例，胰體11 例，胰尾24 例；腫瘤大小：≤4 cm 者28 例，＞4 cm 者例32例；腫瘤分化：高分化26 例，中分化22 例，低分化12 例；臨床分期［5］：Ⅰ期8 例，Ⅱ期11 例，Ⅲ期20 例，Ⅳ期21 例。納入標準：①符合《胰腺癌診治指南（2014）》胰腺癌診斷標準［6］；②Karnofsky評分［7］＞60 分；③術前未接受過放化療以及其他生物治療。排除標準：①合并自身免疫或血液疾病；②合并感染性疾病；③合并重要臟器功能障礙；④合并手術相關禁忌癥；⑤妊娠或哺乳期婦女；⑥合并認知障礙或精神疾病。另選取30 例同期于本院進行健康體檢者作為對照組，其中男性16 例，女性14 例；平均年齡（60.87±5.95）歲。兩組患者性別、年齡資料比較差異無統計學意義（P＞0.05）。本研究經醫院倫理委員會批準，患者或家屬簽署知情同意書。

1.2 方法

對照組于體檢當日、胰腺癌組于術前、術后7 d、術后1 個月抽取空腹靜脈血4 mL，室溫下離心分離血清，用于S100A9 測定的血清置于-20℃條件下保存待檢，用于MMP-9 測定的血清置于-8℃條件下保存。S100A9 試劑盒來源于上海滬震實業有限公司，MMP-9 試劑盒來源于上海瑞齊生物科技有限公司，酶聯免疫吸附法操作按試劑盒說明書進行。對胰腺癌組患者進行隨訪，隨訪時間為術后2年，隨訪方式為電話隨訪和門診復查，隨訪周期為3 個月，生存起始時間為胰腺癌手術后，主要終點事件為死亡時間，次要終點事件為隨訪結束。生存期的計算方法為術后到死亡或隨訪結束所歷經的時間。

1.3 統計學方法

采用SPSS 20.0 統計軟件進行統計分析，計量資料采用（）表示，組間比較行t檢驗；采用Pearson 相關性分析血清指標之間的關系，以P＜0.05 為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 血清S100A9、MMP-9 含量比較

血清S100A9、MMP-9 含量：術前＞術后7 d＞術后1 個月＞對照組，差異均有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 血清S100A9、MMP-9 含量比較（±s）Table 1 Comparison on contents of serumS100A9 and MMP-9（±s）

表1 血清S100A9、MMP-9 含量比較（±s）Table 1 Comparison on contents of serumS100A9 and MMP-9（±s）

注：與對照組比較，aP＜0.05；與術前比較，bP＜0.05。

組別對照組胰腺癌組術前術后7 d術后1 個月n 30 60 60 60 S100A9（μg/L）150.08±14.88 211.06±20.94a 197.46±18.33ab 169.64±15.40ab MMP-9（ng/mL）18.29±1.73 91.06±8.14a 82.33±7.04ab 40.71±4.25ab

2.2 胰腺癌組患者血清S100A9、MMP-9 含量相關性分析

胰腺癌組患者術前、術后7d、術后1 個月血清S100A9水平與血清MMP-9 含量呈現正相關（r=0.341、0.314、0.303，均P＜0.05）。

2.3 胰腺癌組患者術前血清S100A9、MMP-9 含量與臨床病理特征的關系分析

胰腺癌組患者術前腫瘤＞4 cm、腫瘤分化程度低、臨床分期Ⅲ期或Ⅳ期、淋巴結轉移患者血清S100A9、MMP-9 含量高于腫瘤≤4 cm、腫瘤分化程度高、臨床分期Ⅰ期或Ⅱ期、未發生淋巴結轉移者，差異均有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 患者術前血清S100A9、MMP-9 含量與臨床病理特征的關系分析（±s）Table 2 Relationship between preoperative serum S100A9，MMP-9 levels and clinicopathological features（±s）

表2 患者術前血清S100A9、MMP-9 含量與臨床病理特征的關系分析（±s）Table 2 Relationship between preoperative serum S100A9，MMP-9 levels and clinicopathological features（±s）

臨床病理特征性別年齡（歲）腫瘤位置腫瘤大小腫瘤分化臨床分期淋巴結轉移男女≤60＞60胰頭胰體胰尾≤4 cm＞4 cm低分化中分化高分化Ⅰ期Ⅱ期Ⅲ期Ⅳ期無有n 34 26 29 31 25 11 24 28 32 12 22 26 8 11 20 21 28 32 S100A9（μg/L）209.77±20.06 212.75±20.98 208.05±19.97 213.88±20.43 209.98±18.77 211.03±19.43 212.20±17.05 205.11±17.73 216.27±18.43 218.96±16.33 214.63±16.75 204.39±15.64 197.41±18.30 200.71±17.95 214.30±15.40 218.60±16.63 201.73±14.95 219.22±20.66 t/F 值0.559 1.109 0.091 2.382 4.170 5.363 3.708 P 值0.548 0.272 0.913 0.021 0.020 0.008 0.001 MMP-9（ng/mL）90.80±8.03 91.40±9.05 89.05±8.71 92.94±8.08 90.76±7.05 91.21±8.46 91.30±9.01 86.11±7.84 95.39±8.28 96.77±7.46 94.06±8.43 85.89±7.01 81.64±7.41 84.25±6.95 93.07±7.77 96.30±8.08 83.13±8.01 98.00±8.44 t/F 值0.271 1.768 0.029 4.439 10.981 11.333 6.971 P 值0.787 0.082 0.971＜0.001＜0.001＜0.001＜0.001

2.4 手術后1 個月血清S100A9、MMP-9水平與預后的關系分析

60 例患者依照術后1 個月血清S100A9、MMP-9水平，將大于等于平均值的患者納入高表達組，將小于平均值的患者納入低表達組，其中S100A9 高表達患者2年生存率6.45%（2/31）低于S100A9 低表達患者的27.59%（8/29），中位生存時間14.7 個月短于S100A9 低表達患者的19.1 個月，差異均有統計學意義（P＜0.05）。MMP-9 高表達患者2年生存率8.57%（3/35）低于MMP-9 低表達患者的28.00%（7/25），中位生存時間15.3 個月短于MMP-9低表達患者的18.6 個月，差異均有統計學意義（P＜0.05）。見圖1。

圖1 手術后1 個月血清S100A9、MMP-9 不同表達狀態患者2年總生存曲線Figure 1 The 2-year overall survival curves of patients with different expressions of serum S100A9 and MMP-9 at 1 month after surgery

3 討論

胰腺癌的早期診斷仍缺乏客觀有效的指標，探尋胰腺癌有效診斷標志物是臨床重要難題之一。近年來，關于胰腺癌發生發展機制研究有了較大進展，多種蛋白或基因均參與其發生及發展過程［8］。

S100A9 是鈣結合蛋白S100 家族的重要成員之一，參與多種癌細胞初始發育和轉移性疾病發展過程［9］。胰腺癌患者S100A9 可能通過TGF-β/SMAD4 信號通路影響腫瘤的生長及遷移，同時S100A9 作用于遠處部位，如肝臟、肺等，通過改變微環境，創造一個有利于轉移細胞粘附及生長的條件，這說明S100A9 在胰腺癌的發生、遷移、侵襲中具有重要作用［10］。MMP-9 是研究廣泛的基質金屬蛋白酶之一，參與多種生物過程，通過降解細胞外基質蛋白使得細胞外基質重構，調節細胞黏附性，降解血管基底膜和血管周圍基質，促進癌細胞侵襲及轉移，在新的腫瘤血管系統生成中具有不可或缺的作用［11］。相關文獻報道顯示，MMP-9蛋白在人類多種惡性腫瘤如肝癌、食管癌、胃癌、結腸癌、腎癌等均呈現高表達，并與腫瘤的侵襲、生長、轉移等不良預后相關［12］。

臨床上可通過檢測癌癥患者血清S100A9、MMP-9 表達水平，依照其濃度變化來判斷患者手術治療后病情變化，預測患者預后狀態，發揮病情監測作用。郭濤弦等［13］研究比較癌癥患者手術前后S100A9、MMP-9 表達水平變化，結果顯示患者手術后S100A9、MMP-9 表達水平明顯降低。本研究中胰腺癌患者手術后1 個月血清S100A9、MMP-9表達水平均明顯低于治療前，患者術后血清S100A9、MMP-9 表達趨勢與上述研究結果一致，說明手術治療可有效降低患者S100A9、MMP-9 表達水平，改善患者疾病與預后。Mroczko 等［14］研究顯示胰腺癌患者S100A9、MMP-9 表達水平與其病理分期及淋巴結轉移相關。本研究中，隨著腫瘤直徑增大、臨床分期升高、出現淋巴結轉移，患者血清S100A9、MMP-9 表達水平也隨之增高，這一結果更加證實了血清S100A9、MMP-9 與胰腺癌增殖及轉移有密切關系，其表達水平的升高，可作為胰腺癌診斷、預測預后的重要生物學標志，這與劉翔等［15］研究報道中顯示的胰腺癌患者血清S100A9、MMP-9 高表達與其臨床病理特征相關的結論相吻合。本研究進一步分析術后1 個月患者血清S100A9、MMP-9 含量與患者生存期的關系，結果顯示S100A9、MMP-9 高表達患者生存時間短于低表達患者，進一步說明血清S100A9、MMP-9含量可對胰腺癌患者的預后進行判斷，Liao 等［16］研究結果支持本結論。

綜上所述，S100A9、MMP-9 在胰腺癌的發生、發展、轉移與預后評估等方面具有較大的潛在價值，但其是否能夠作為胰腺癌患者預后評估的可靠指標，還需要多中心，大樣本的臨床數據和研究支持，S100A9、MMP-9及其相關信號通路可能是胰腺癌治療中的潛在目標之一。