鼻腔鼻竇內翻性乳頭狀瘤組織中HPV/補體C3C4表達及意義

馬汝顯 周玲

作者單位：安徽省宿州市第一人民醫院耳鼻喉科，安徽，宿州234000

鼻腔鼻竇內翻性乳頭狀瘤（nasalcavity orparana-Sinonasalinvertedpapilloma，NIP）是一種具有潛在的復發和癌變傾向特征的良性腫瘤，其惡化大部分是由于人乳頭狀瘤病毒（human papillomavirus，HPV）HPV？感染所導致，以涕中帶血絲、膿性涕、反復頭疼為癥狀表現［1］。近些年來，隨著人們工作以及生活壓力的增大，該病的患病頻率逐漸升高，對患者的生活質量和生命健康影響巨大［2］。目前臨床治療該病的方法為鼻腔乳頭狀瘤摘除術，其治療效果隨著醫療水平的上升而提高，但有關文獻報道［3］，該病具有高復發率特點。HPV 是一種感染皮膚、黏膜的嗜皮性DNA 病毒，能夠引起機體免疫反應。而補體C3、C4 是補體系統中最常見的組分，在機體免疫反應中異常激活，從而導致其外周血中的表達升高。已有研究將補體C3C4 運用于紅斑狼瘡的診斷。但目前關于其在鼻腔鼻竇內翻性乳頭狀瘤中的診斷應用鮮有研究。基于此，本研究探討鼻腔鼻竇內翻性乳頭狀瘤組織中HPV/補體C3C4表達及意義。

1 一般資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年3月至2020年9月本院收治的鼻腔鼻竇內翻性乳頭狀瘤患者為觀察組（73例），選取同期收治的無鼻腔鼻竇內翻性乳頭狀瘤患者為對照組（32例）。兩組患者一般資料差異無統計學意義（P＞0.05）。本研究經醫院醫學倫理委員會批準。見表1。

表1 一般資料比較（±s）Table 1 Complement of Table 1 General information（±s）

表1 一般資料比較（±s）Table 1 Complement of Table 1 General information（±s）

組別觀察組對照組t/χ2值P 值n 73 32年齡（歲）57.14±7.23 57.18±7.25 0.026 0.979性別男/女38/35 17/15 0.010 0.919

1.2 診斷標準

參照《乳頭狀瘤。實用耳鼻咽喉頭頸外科學》［4］擬定：①單側病變，持續性鼻塞；②嗅覺退化；③面部僵硬；④涕血、頭部疼痛、鼻息肉、濃性涕；⑤經影像學確診。

納入標準：符合鼻腔鼻竇內翻性乳頭狀瘤的診斷標準；年齡20～64 歲；意識清醒并簽署同意書；排除標準：嚴重的基礎性疾病；患有精神疾病；同時患有其他鼻病；妊娠期婦女；月經期女性；依從性較差患者。

1.3 方法

①患者在檢查前不可食用高嘌呤、高蛋白食品，且抽取靜脈血必須要在空腹10 小時后的次日清晨。②補體C3、C4水平檢測：使用散射比濁法檢測。采集患者3 mL 的靜脈血液放入采血管，離心吸取外周血血清，放入冰箱保存待檢驗。血清補體C3、C4，應用全自動生化分析儀（山東科博有限公司，型號：BK-600）及原裝配套試劑檢測。正常范圍值：補體C3 為（0.85～2.00）g/L；C4 為（0.12～0.40）g/L。③HPV 檢測：取鼻腔鼻竇組織和局部粘液制作樣本進行檢測，標本常規經4%甲醛（規格：溶液劑20 mL 西安天正藥用輔料有限公司國字準號H53031618）固定石蠟（規格：500 mL 西安天正藥用輔料有限公司國字準號H49815831）包埋4 μm厚連續切片。采用免疫組織化學Envision 二步法染色。用山羊IgG（Normal Goat IgG）代替一抗作陰性對照，用抗體稀釋液作1∶100 稀釋。用DAB（北京紀寧生物工程有限公司）顯色后進行染色、封片。兩組切片在四百倍光學顯微鏡下觀察，陽性細胞為淺黃顆粒；陽性細胞數小于四分之一（-）；陽性細胞數大于四分之一（+）。感染率= 有/無鼻腔鼻竇內翻性乳頭狀瘤患者標本陽性數/總調查例數×100%。

1.4 統計學方法

使用軟件統計SPSS 22.0 處理數據。符合正態分布以及方差齊性的計量資用（）表示，行獨立樣本t檢驗；計數資料計數資料用n（%）表示，行χ2檢驗。采用ROC 曲線分析C3、C4 對其預測價值；P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組補體C3、C4水平比較

觀察組鼻腔鼻竇內翻性乳頭狀瘤患者的補體C3、C4水平較對照組明無鼻腔鼻竇內翻性乳頭狀瘤患者明顯更高，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 兩組補體C3、C4水平比較（±s）Table 2 The expression of two groups of complement C3 and C4（±s）

表2 兩組補體C3、C4水平比較（±s）Table 2 The expression of two groups of complement C3 and C4（±s）

組別觀察組對照組t 值P 值n 73 32--C3（g/L）1.03±0.24 0.85±0.22 3.626＜0.001 C4（g/L）0.28±0.05 0.17±0.06 9.751＜0.001

2.2 兩組HPV 陽性率表達

觀察組HPV 呈陽性表達患者較對照組明顯更多，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表3。

表3 兩組HPV 陽性表達［n（%）］Table 3 Positive expression of HPV levels in the two groups［n（%）］

2.3 補體C3、C4 診斷價值分析

ROC 分析結果顯示，補體C3、C4及兩項聯合指標的ROC 曲線下面積AUC 分別為0.701、0.739、0.919（P＜0.05）。由此可得，兩項聯合指標價值明顯更高，其敏感度分別為91.8%、75.3%、87.7%，特異度分別為50.0%、75.0%、87.5%，cut-off 值分別為0.760、0.235、0.708（P＜0.05）。見表4、表5、圖1。

圖1 補體C3、C4及聯合指標的ROC 曲線Figure 1 ROC curve of C3，C4 and combined indicators

表4 補體C3、C4 診斷價值分析ROC 曲線下面積AUC 分析Table 4 Complement C3，C4 diagnostic value analysis ROC area under the curve AUC analysis

表5 補體C3、C4 診斷效能分析Table 5 Efficacy analysis of C3 and C4 in diagnosing stroke outcome

3 討論

鼻腔鼻竇內翻性乳頭狀瘤是一種DNA 病毒，該病的發病機制尚未明確，但有研究表示可能與HPV、炎癥因子有關［5］；如不及時治療可能會發生惡化對人的危害嚴重影響鼻腔鼻竇內翻性乳頭狀瘤患者的生命安全［6］，也給家庭造成了巨大經濟負擔。目前，臨床治療該病的方法是鼻腔乳頭狀瘤摘除術，但其特點為高復發率，在手術的過程中盡量做到一次切除干凈，如術中未做到，必然會增加該病的復發率［7］。因此，鼻腔鼻竇內翻性乳頭狀瘤的早期診斷是提高預后的關鍵［8］。

補體是存于人體血清和組織液內免疫的一道重要的防線［9］。當補體系統被激活后各組分以酶原形式存在于血清中［10］，其具有殺菌、溶菌的免疫活性［11］。而補體C3、C4 是最為常見的補體組分［12］。在發生炎癥時，肝臟內會產生較多的補體C3、C4；但巨噬細胞在肝外也能產生，且補體C3、C4 大于肝內產生［13］。在本研究中，鼻腔鼻竇內翻性乳頭狀瘤患者的補體C3、C4水平高于無鼻腔鼻竇內翻性乳頭狀瘤患者，其原因可能與補體C3、C4大量激活有關［14］，當炎癥反應發生時，肝臟與巨噬細胞同時產生補體C3、C4 抵抗細菌侵入，而當微生物以及細菌過多且無外界干預時，體內的補體C3、C4 激活過度將會產生降低鼻腔鼻竇內翻性乳頭狀瘤患者抵抗細菌能力、加重炎癥、損傷組織等一系列危害［15］。在本研究中，使用散射比濁法檢驗補體水平，結果顯示觀察組鼻腔鼻竇內翻性乳頭狀瘤患者補體C3、C4水平較對與照組無鼻腔鼻竇內翻性乳頭狀瘤患者明顯更高。補體C3、C4 以及二者聯合預測ROC 曲線下面積AUC 分別為0.701、0.739、0.919；補體C3、C4 的二者聯合預測的敏感度分別為91.8%、75.3%、87.7%；特異度分別為：50.0%、75.0%、87.5%；臨界值分別為0.760、0.235、0.708，均具有良好的敏感度、特異性。提示補體C3、C4 以及二者聯合均可預測檢測鼻腔鼻竇內翻性乳頭狀瘤，且其預測效能由高到低依次為聯合檢測、補體C4、補體C3，這與有關研究報道內容一致。

HPV 是一種無囊膜的病毒，可通過母嬰感染，性交，公共泳池、浴室、馬桶等接觸感染身體表層皮膚、粘膜，其主要分布在口咽、肛周、生殖道［16］。有研究報道，百分之八十的女性都曾感染過HPV［17］，該病毒不僅潛伏期較長，而且感染率極高，當人體免疫力正常時其癥狀不顯，因自身免疫可把大多數病毒清除；但在免疫力下降時，開始顯現［18］，該病會引起呼吸道癌、子宮癌、宮頸癌等疾病。目前，治療該病的方式主要以切除術為主預防為輔，其具有易復發的特點［19］。但因早期HPV 癥狀不顯，所以檢測尤為重要。在本研究結果提示該HPV 陽性表達結果表示HPV可能與鼻腔鼻竇內翻性乳頭狀瘤的發生有關。

綜上所述，HPV 可能參與了鼻腔鼻竇內翻性乳頭狀瘤的發生；補體C4、補體C3及二者聯合均可作為鼻腔鼻竇內翻性乳頭狀瘤的診斷指標，值得臨床應用。但本研究屬于單中心小樣本研究，還需大樣本多中心研究、考證。同時隨訪觀察時間有限，故還有待進一步開展遠期觀察的研究檢驗。