胃癌血清標志物與人表皮生長因子受體2、Ki-67表達及臨床病理特征的關系

趙榮榮，張倩

胃癌是常見的惡性腫瘤之一，早期臨床癥狀較少，往往發現時已經是晚期，其發生率在所有腫瘤中排第五，而死亡率在全球排第三。胃癌發病原因至今仍不明確，但是與幽門螺旋桿菌感染和飲食習慣等環境影響以及基因異常表達有關，其臨床分期較晚且預后不良。目前越來越多的人表皮生長因子受體2（HER-2）陽性晚期胃癌病人受益于曲妥珠單抗，因此對于胃癌病人來說，做HER-2 檢查非常有必要。胃癌的檢測方法有很多，而血清學腫瘤標志物的檢查逐步廣泛應用于臨床上，其與胃癌的預后、轉移等密切相關。然而，目前對于胃癌病人檢測癌胚抗原、糖類抗原125（CA125）、糖類抗原19-9（CA19-9）血清表達與HER-2、Ki-67蛋白表達相關性以及對臨床診斷意義還沒有明確結論，本研究主要是探索胃癌病人手術前血清學生物標志物癌胚抗原、CA125 和CA19-9 表達與HER-2 和Ki-67 蛋白表達的相關性，以及與臨床病理特征的相關性分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2017年10月至2018年12月在安徽醫科大學第一附屬醫院高新院區治療的132例胃癌手術病人，男性95 例，女性37 例。所有研究對象手術前均未進行化療，手術切除的腫瘤組織對其進行病理檢查，確診為胃癌。病人或其近親屬知情同意，本研究符合《世界醫學協會赫爾辛基宣言》相關要求。

1.2 方法

1.2.1

血清學檢測 所有病人術前空腹抽血3 mL，離心取上清液，保存于-20 ℃環境中。采用羅氏的全自動生化分析儀E170 模塊和上海酶聯生物科技有限公司的試劑盒檢測癌胚抗原、CA125、CA19-9水平。正常值范圍：癌胚抗原為0～5.0 μg/L，CA125為0～35.0 kU/L，CA19-9 為0～27.0 kU/L，超出正常范圍視為陽性。

1.2.2

免疫組織化學檢測 病人手術取下的組織立即用固定液固定，取材，脫水，包埋，制片，蘇木精-伊紅（HE）染色，鏡下觀察選取具有代表性的腫瘤組織蠟塊，再切片（3 μm），進行免疫組織化學染色（IHC）。IHC 檢測使用的儀器購自羅氏公司，使用的一抗均是羅氏公司購買的即用型抗體，HER-2（4B5）和Ki-67（30-9）。

1.2.3

免疫組織化學判讀 HER-2：細胞膜表達呈棕黃色，當未染色或膜染色＜10% 腫瘤細胞時為（0）；當≥10% 腫瘤細胞膜弱染色或部分細胞膜染色時為（+）；當≥10% 腫瘤細胞弱至中度的基底側膜、側膜或完全膜染色時為（2+）；當≥10% 腫瘤細胞基底側膜、側膜或完全膜強染色為（3+）。Ki-67：細胞核表達呈棕黃色，隨機選擇5個高倍視野，陽性腫瘤細胞比例≤10% 者為陰性，＞10%～25% 為弱陽性，＞25%～50%判為中度陽性，＞50%則為強陽性。

1.3 統計學方法

所有數據使用SPSS 16.0 軟件統計，計數資料以例數或者百分比表示，組間比較采用

χ

檢驗或Fisher 確切概率法，等級資料指標兩組間比較采用Wilcoxon 秩和檢驗，HER-2 和Ki-67 的相關性檢驗采用Spearman 相關性分析。

P

＜0.05 表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 癌胚抗原、CA125、CA19-9與HER-2表達的相關性

HER-2蛋白在胃癌中表達于細胞膜，Ki-67蛋白表達于細胞核。132 例胃癌病人中，癌胚抗原陽性率為34.8%（46/132）；CA125 陽性率為15.2%（20/132）；CA19-9 陽性率為10.6%（14/132）；HER-2（0）陽性率為37.2%（49/132），（+）為34.8%（46/132），（2+）為15.9%（21/132），（3+）為12.1%（16/132）；Ki-67 陰性為1.5%（2/132），弱陽性為0.8%（1/132），中度陽性為47.7%（63/132），強陽性為50%（66/132）。癌胚抗原與HER-2 表達無相關性（

P

＞0.05）；CA125、CA19-9與HER-2表達有相關性（

P

＜0.05）。見表1。

表1 胃癌132例癌胚抗原、CA125、CA19-9與HER-2表達的相關性/例

2.2 癌胚抗原、CA125、CA19-9 與臨床病理特征的相關性

癌胚抗原表達與年齡（

P

=0.016）、腫瘤大?。?p>P

=0.046）以及腫瘤分期（

P

=0.03）有關，CA125 表達與脈管侵犯有關（

P

=0.026）。見表2。

表2 胃癌132例癌胚抗原、CA125、CA19-9與臨床病理特征的相關性/例

2.3 HER-2 和Ki-67 表達的相關性

132 例胃癌標本中發現，HER-2 與Ki-67 蛋白表達呈負相關（

r

=-0.274，

P

=0.007），詳情見表3。

表3 胃癌132例HER-2和Ki-67表達的相關性

3 討論

胃癌屬于消化道腫瘤，其發生主要受環境和基因改變影響。在我國胃癌是僅次于肺癌和肝癌的三大惡性腫瘤之一，男性發病多見于女性。胃癌早期，常見的腫瘤標志物未發生明顯的表達異常，所以目前還沒有用于胃癌特異性診斷的腫瘤標志物。但是早日發現胃癌特異性腫瘤標志物對于其診斷以及后期治療具有重要意義。

本研究首先主要探討癌胚抗原、CA125、CA19-9三種腫瘤標志物在胃癌病人手術前血清中的表達情況，以及與臨床病理特征的相關性。癌胚抗原在正常情況下產生于胚胎時期，出生后水平逐漸降低。成人癌胚抗原體內水平穩定且微量。但是大多數腫瘤病人癌胚抗原表達增高，其被認可為廣譜性腫瘤標志物，濃度異常增高多見于消化系統腫瘤和肺癌。本研究數據結果顯示，132 例胃癌病例中，術前血清癌胚抗原表達陽性率為34.8%。有研究發現，在消化道腫瘤中癌胚抗原水平升高時，肝臟轉移、腹膜轉移的機會明顯升高，其表達與腫瘤分化類型（尤其是差分化）明顯相關。而本研究結果發現癌胚抗原表達陽性病人中，年齡高于65歲者明顯多于年齡低于65歲者，腫瘤最大徑大于5 cm者多于小于5 cm 者，且進展期病人多于早期病人，這表明越是晚期的胃癌病人癌胚抗原表達陽性率越高。CA19-9是一種新的腫瘤標志物，且是胰腺癌敏感性最高的標志物，消化道炎癥時輕度升高，但是明顯升高時多見于消化道腫瘤。有文獻研究報道，對胃癌病人分別進行術前和術后癌胚抗原和CA19-9 抽血檢測，發現手術前后其表達差異有統計學意義，且癌胚抗原和CA19-9表達水平升高與腫瘤浸潤深度、淋巴結轉移和pTNM分期等臨床病理特征有關。本研究結果顯示CA19-9 的陽性表達率為10.6%，與臨床病理特征無相關性，可能是樣本數量的局限性。CA125表達異常也是與多種惡性腫瘤有關，其是一種與腫瘤相關的糖蛋白抗原。對于進展期和根治術后胃癌病人，血液檢測發現CA125 水平升高，常提示發生腹膜轉移和胃癌預后不良。本研究結果表明，CA125 陽性胃癌病人的脈管侵犯率要高于陰性者。 大量文獻表明，癌胚抗原、CA125、CA19-9 腫瘤標志物聯測檢測對于胃癌臨床診斷、病理特征以及腫瘤復發與預后有著重要的影響意義。 本研究結果也證實了癌胚抗原和CA125 的血清學檢測與胃癌臨床病理特征密切相關，這對于胃癌病人的預后和復發有重要指導意義。

胃癌是起源于正常胃黏膜上皮，經過逐步發展不斷演變的一個慢性過程。在胃癌的早期，由于臨床癥狀不明顯以及沒有高效率的檢測方法，導致很多病人在確診時已經進入了進展期，不再適合手術治療。近年來隨著生物醫療技術的不斷發展，越來越多的胃癌病人獲益于鉑類和曲妥珠單抗藥物。但是研究發現在對胃癌病人使用曲妥珠單抗藥物之前，對病人腫瘤組織中HER2 表達進行檢測對于后期臨床治療效果至關重要，對于接受曲妥珠單抗治療的HER2 陽性病人與陰性病人相比，生存期更長。Ki-67 檢測用來評估腫瘤細胞的增殖情況。因此，在國際指南中均建議對胃癌病人進行HER2檢測。而胃癌病人的血清學腫瘤標志物檢測與HER-2 蛋白相關性分析仍不明確。本研究發現，胃癌病人血清標志物CA125、CA19-9 表達與HER-2 蛋白表達有關，這也為胃癌病人在使用鉑類和曲妥珠單抗之前提供了參考因素。同時HER-2 與Ki-67 的蛋白表達呈負相關，這表明在使用鉑類和曲妥珠單抗藥物之前，檢測HER-2 和Ki-67 的表達是十分有必要的，除了藥物的使用效果外，腫瘤細胞的增殖狀態對于后期治療也是至關重要的。

綜上所述，胃癌病人的血清學標志物癌胚抗原與年齡、腫瘤大小、腫瘤分期有關，CA125 與脈管侵犯有關，而CA125、CA19-9 表達與HER-2 的蛋白表達有關，HER-2 表達與Ki-67 表達呈負相關。胃癌病人的標志物癌胚抗原、CA125、CA19-9、HER-2、Ki-67 檢測對于病人臨床用藥和病理特征分析具有重要意義。