血管內皮生長因子、乳酸脫氫酶和β2-微球蛋白在急性白血病診斷及預后中的價值

李云 段相會 朱映霞 李苗 黃麗珍 符美華

白血病是一組威脅生命的血液和骨髓惡性疾病。在青少年(AYA)人群中,急性白血病最為普遍,而慢性粒細胞白血病則很少見［1］。隨著年齡的增長,與更具侵略性的疾病生物學相關的因素傾向于頻率增加,臨床中常見的急性白血病有急性淋巴細胞白血病(ALL)和急性非淋巴細胞白血病(ANLL)［2］。準確地診斷血液系統(tǒng)惡性腫瘤對臨床管理至關重要。急性白血病是一組具有各種臨床表現(xiàn)、預后和優(yōu)選治療方案的惡性腫瘤。有研究顯示［3］,VEGF、LDH 及β2-MG 水平在患者實體腫瘤及淋巴增值性疾病中數(shù)值顯著升高,可見該指標可能與血液系統(tǒng)腫瘤存在密切關聯(lián),因此本文通過檢測急性白血病患者中的VEGF、LDH 及β2-MG水平變化情況來探究其在臨床診斷及預后中的價值,現(xiàn)將結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 將2018 年1 月～2020 年1 月期間本院血液科治療的急性白血病患者55 例作為觀察組,健康體檢者55 例作為對照組,觀察組又分為化療緩解組(35 例)及未緩解組(20 例)。觀察組中,男29 例,女26 例；年齡16～70 歲,平均年齡(45.1±9.8)歲。對照組中,男30 例,女25 例；年齡17～70 歲,平均年齡(46.5±9.9)歲。觀察組和對照組研究對象的性別、年齡一般資料比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),具有可比性。本研究獲得本院倫理委員會批準,研究對象及其家屬均知情同意簽署同意書,研究過程嚴格遵循倫理學原則,保障研究對象隱私和安全。急性白血病納入標準：①經骨髓細胞形態(tài)學、骨髓細胞免疫表型、染色體核型分析確診；②具有完整的臨床資料；③隨訪到完整的遠期生存數(shù)據(jù)。

1.2 方法 觀察組患者在進行化療前1 d 清晨需進行無菌促凝管靜脈血采集,告知患者夜間10:00 之后禁食禁水,空腹完成標本采集工作,采集數(shù)量為4 ml。將血清先離心后分離,操作轉數(shù)設置為3800 r/min,離心時間為8 min。將分裝后的標本存放在冰箱中,溫度設置為-80℃,便于日后進行實驗。應用酶聯(lián)免疫吸附法進行VEGF 檢測,酶標儀測量波長吸光度,將吸光度數(shù)值及不同濃度的VEGF 數(shù)值整合并繪制成標準的曲線,根據(jù)繪制的曲線找出對應的VEGF 質量濃度。試劑來自北京健平金星生物科技有限公司。LDH 檢測應用全自動生化分析儀進行檢測。β2-MG 應用化學發(fā)光法完成檢測,試劑來自深圳市新產業(yè)生物醫(yī)學工程股份有限公司,以上三種檢測均應控制在4 h 內。

觀察組患者按照中國急性白血病診療規(guī)范進行標準化的誘導化療治療,其中急性淋巴細胞白血病患者采用VDCLP 方案或HyperCVAD-A 方案,根據(jù)費城染色體結果陽性與否決定是否聯(lián)合伊馬替尼治療。急性非淋巴細胞白血病患者采用標準DA、IA、HA 方案等誘導治療。在化療期間應對患者進行保護肝臟、胃黏膜、止吐等藥物干預,減輕患者臨床不適癥狀。同時每日使用淡鹽水漱口,防止唾液感染,密切觀察患者的各項臨床指標,出現(xiàn)個別患者嚴重感染時應及時給予相應的急救治療。

治療19～35 d 后,根據(jù)患者化療后復查的骨髓細胞學結果緩解與否,得到化療緩解組和未緩解組。

1.3 觀察指標 對比化療緩解組和未緩解組患者治療前后及對照組的VEGF、LDH、β2-MG 水平,判斷其在診斷急性白血病及判斷預后中的價值。

1.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS21.0 統(tǒng)計學軟件進行統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標準差()表示,采用t檢驗；計數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 三組VEGF 水平對比 化療緩解組和未緩解組治療前后的VEGF 水平均高于對照組,化療緩解組治療前后的VEGF 水平均低于未緩解組,化療緩解組治療后的VEGF 水平低于本組治療前,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；未緩解組治療前后的VEGF 水平對比,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 三組VEGF 水平對比(,pg/ml)

表1 三組VEGF 水平對比(,pg/ml)

注：與對照組對比,aP<0.05；與未緩解組對比,bP<0.05；與治療前對比,cP<0.05

2.2 三組LDH 水平對比 化療緩解組和未緩解組治療前后的LDH 水平均高于對照組,化療緩解組治療前后的LDH 水平均低于未緩解組,化療緩解組治療后的LDH 水平低于本組治療前,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；未緩解組治療前后的LDH 水平對比,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表2。

表2 三組LDH 水平對比(,IU/L)

表2 三組LDH 水平對比(,IU/L)

注：與對照組對比,aP<0.05；與未緩解組對比,bP<0.05；與治療前對比,cP<0.05

2.3 三組β2-MG 水平對比 化療緩解組和未緩解組治療前后的β2-MG 水平均高于對照組,化療緩解組治療后的β2-MG 水平低于本組治療前及未緩解組治療后,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；化療緩解組和未緩解組治療前及未緩解組治療前后的β2-MG 水平對比,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表3。

表3 三組β2-MG 水平對比(,mg/L)

表3 三組β2-MG 水平對比(,mg/L)

注：與對照組對比,aP<0.05；與未緩解組對比,bP<0.05；與治療前對比,cP<0.05

3 討論

急性白血病是一種惡性疾病,源于造血干細胞克隆,其發(fā)生、發(fā)展、轉移、惡化均在新生血管中完成。血管生成是從已建立的血管中形成新的毛細血管,并且是生長發(fā)育、傷口愈合和生殖的重要過程［4］。但是,它為惡性細胞提供了比正常細胞更大的生存優(yōu)勢,并具有轉移潛力。腫瘤相關血管生成的主要正調節(jié)劑之一是VEGF［5］。據(jù)報道［6］,腫瘤組織內、尿液、血清和血漿的VEGF 水平在許多實體瘤患者中均有升高趨勢,并具有預后意義。VEGF 以高親和力結合到VEGFR-1受體酪氨酸激酶(RTK)的FLT-1 和VEGFR-2 的Flk-1,KD 中,在配體結合成為酪氨酸磷酸化并激活細胞底物［7］。VEGF 和VEGFR-2 在新生血管生成和實體瘤生長過程中起著重要作用。

VEGF,也稱為VEGF-A,是生理和病理性血管生成的最重要的積極介體之一［8］。VEGF 傳統(tǒng)上在發(fā)育和病理環(huán)境中均被認為是旁分泌因子。它促進血管生長和重塑的過程,并為內皮細胞提供有絲分裂和生存刺激［9］。它已被證明與人類各種癌癥的進展和腫瘤血管生成密切相關。本研究結果顯示,化療緩解組和未緩解組治療前后的VEGF 水平均高于對照組,化療緩解組治療前后的VEGF 水平均低于未緩解組,化療緩解組治療后的VEGF 水平低于本組治療前,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。提示了血管生成在許多不同的血液系統(tǒng)惡性腫瘤的發(fā)病機理中至關重要,包括急性淋巴細胞白血病,急性非淋巴細胞白血病,慢性淋巴細胞性白血病,慢性髓細胞性白血病和多發(fā)性骨髓瘤［10］。VEGF 及其受體在急性白血病細胞中的高表達均會促進病情的發(fā)展及發(fā)生,可將其含量水平作為后續(xù)的診斷及預后判斷的重要因素［11］。

血清β2-MG 水平可以幫助預測急性白血病患者的結局,建議臨床上使用。β2-MG 是一種12-kDa 的輕鏈蛋白結合Ⅰ類MHC(MHCⅠ)分子,它在MHCⅠ分子中起雙重作用。是組裝的復合體的結構子單元。已知血清β2-MG 水平可反映腎功能和膜更新,這與腫瘤的大小和生長速率有關［12］。在包括多發(fā)性骨髓瘤、非霍奇金淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、急性淋巴細胞白血病、費城染色體陽性的慢性髓性白血病、慢性淋巴細胞性白血病和骨髓增生異常綜合征等幾種惡性血液病中,升高的血清β2-MG 水平能夠預測比較差的存活率。本研究結果顯示,化療緩解組和未緩解組治療前后的β2-MG 水平均高于對照組,化療緩解組治療后的β2-MG 水平低于本組治療前及未緩解組治療后,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。提示了β2-MG 與急性白血病的活動呈正相關,與急性白血病病情密切相關,在整個治療過程中應密切觀測其數(shù)值,針對性的進行治療。在急性白血病患者血清中β2-MG 水平高于對照組,但治療后其含量明顯下降。

LDH 以5 種同工酶LDH-1-5 的形式出現(xiàn)在不同的細胞系統(tǒng)中。LDH-1 和LDH-5 的產生受兩個基因的作用控制,而中間部分(LDH-2-4)被認為是LDH-1和LDH-5 的雜合形式,通過肽的締合形成LDH-1 和LDH-5 的四聚體。在正常人血漿中,同工酶1 和2 占主導地位,但這種活性的來源尚未明確。在具有組織損傷和快速細胞更新的情況下,例如惡性腫瘤,血清LDH 可能升高,同工酶分布通常反映了受損器官和細胞的分布。本研究結果顯示,化療緩解組和未緩解組治療前后的LDH 水平均高于對照組,化療緩解組治療前后的LDH 水平均低于未緩解組,化療緩解組治療后的LDH 水平低于本組治療前,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。可看出急性白血病患者LDH 初發(fā)病和未緩解時均比正常人含量高,可能與患者體內存在腫瘤負荷有一定的關聯(lián),LDH 含量水平的升高因素主要因為白血病細胞的數(shù)量,可見腫瘤負荷與其之間有良好的相關性,故可動態(tài)觀察LDH 含量的變化用來預測急性白血病的治療效果及預后。

綜上所述,VEGF、LDH 及β2-MG 水平與急性白血病的診斷及預后息息相關,能夠反映患者體內的腫瘤負荷情況,三者之間相互促進,均參與了發(fā)病的過程,可通過實時監(jiān)測血清中VEGF、LDH、β2-MG 水平來作為急性白血病診斷、判斷預后及指導治療的經濟便捷的科學依據(jù),建議在臨床上廣泛應用。