胎兒頸項透明層厚度與胎兒染色體畸變的關聯性分析

陸 屹

（無錫市第八人民醫院醫學影像科，江蘇 無錫 214011）

胎兒在母體內的異常發育或者發育遲緩，臨床上稱之為發育障礙，若經確診發育障礙的胎兒未經干預而出生，則稱之為出生缺陷。目前，出生缺陷在臨床上的發生率為5.6%左右，而胎兒自身的染色體核型異常是誘發出生缺陷的關鍵因素[1]。隨著近年來優生優育理念的普及，產婦在圍產期介入各項產前檢查，可對胎兒的染色體情況開展遺傳物質剖析，及早發現、干預染色體畸變胎兒，從而有效提高胎兒出生存活率與人口質量[2]。針對胎兒染色體畸變的檢查，目前主要采取羊膜腔穿刺取樣、臍帶血采集、絨毛活檢等方式，但此類檢查措施均為創傷性操作，若操作不當，易引起胎兒死亡、流產等風險，因此不能將上述檢查視為常規性檢查[3]。超聲檢查大多是從胎兒在宮腔內的外觀輪廓畸形及“軟指標”作為染色體畸變的風險預測指標，可有效對胎兒染色體畸變進行篩查及預測，且由于其具有經濟、便捷、無創等優點，已成為目前臨床常用的胎兒畸變的篩查方式[4]。研究發現，妊娠早期階段的頸項透明層（NT）厚度增厚，則表明胎兒的染色體可能存在結構異常的危險性，且該特異性較妊娠中期階段的血清學篩查更具特異性[5]?；诖耍狙芯恐荚谶M一步分析NT厚度增厚與胎兒染色體畸變之間的關聯性，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年2月至2020年10月無錫市第八人民醫院接診的106例行超聲胎兒NT厚度檢查的孕婦作為研究對象，對所有孕婦開展胎兒NT篩查，并通過產前診斷介入方法對胎兒染色體核型進行鑒別。孕婦年齡20～41歲，平均（36.32±1.35）歲；體質量指數（BMI）17～26 kg/m2，平均（22.14±3.85） kg/m2；檢測孕周11+3～13+2周，平均（12.13±0.57）周；胎兒頂臀長44～83 mm，平均（65.36±4.89） mm。診斷標準：參照《產前遺傳病診斷》[6]中妊娠的診斷標準。納入標準：符合上述診斷標準者；NT ≥2.5 mm的孕婦；單胎妊娠者，既往未伴有不良妊娠史；在孕婦分娩前能與醫務人員保持通話聯系者等。排除標準：既往患有心血管疾病、肝腎功能不全等疾??；血流動力學不穩定患者；患有癲癇、中風等精神類疾?。辉袐D或配偶染色體易位、倒位者等。研究經無錫市第八人民醫院醫學倫理委員會批準，且孕婦及其家屬均自愿簽署知情同意書。

1.2 研究方法

1.2.1 NT篩查方法與NT增厚的評定標準 使用四維彩超機（美國通用電氣公司，型號：Voluson E8）、彩色多普勒超聲系統（深圳邁瑞生物醫療電子股份有限公司，型號：Resona 7S）作為檢查設備，上述設備的經腹部檢測超聲探頭與儀器設置參數均一致，探頭的頻率介于2～5 MHz。根據英國胎兒醫學基金會（FMF）[7]制定的胎兒NT厚度測量規范和準則進行檢查：①胎兒的頭臂長（RCL）介于45～84 mm；②孕婦在檢查時取仰臥體位，超聲所截取的胎兒圖像是在胎兒自然屈曲狀態下的正中矢狀切面；③利用影像設備的放大功能，將胎兒頭部與上胸處予以放大，使其占據整個圖像的75%范圍；④對胎兒的羊膜與皮膚進行辨別；⑤對胎兒頸部軟組織與皮膚之間的半透膜組織的厚度進行測量；⑥在檢查操作過程中，標尺的橫線要與NT厚度的界限相疊加；⑦對患者展開3次檢查，并選擇數值最高的記錄。在妊娠期11～13+6周的階段，若胎兒NT ≥2.5mm，則判定為NT增厚；需要求孕婦予以胎兒染色體核型分析，在妊娠中期階段再次開展超聲檢查，以排除胎兒存在畸形的可能。

1.2.2 產前診斷介入方法 根據孕婦的生理狀況選擇如下幾類方法進行介入診斷。①穿刺取絨毛組織：在妊娠期11～14周，經超聲引導行腹部穿刺取胎兒絨毛組織予以送檢。②穿刺取羊水：在妊娠期18～24周，經腹部超聲引導穿刺羊膜腔取20 mL羊水予以送檢。③穿刺取臍帶血：在妊娠期24～32周，在腹部超聲引導下穿刺臍帶取2 mL臍帶血予以送檢。

1.2.3 胎兒染色體核型分析方法 采取G顯帶320條帶染色和熒光原位雜交（FISH）方法對胎兒染色體核型展開分析。FISH方法：取5 mL羊水進行FISH分析，常規樣本玻片制備，經過預處理、變性、探針變形及雜交、玻片洗滌、復染后，暗處放置20 min后，在Olympus BX-51正置熒光顯微鏡下觀察，通過FITC/TRITC/DEAC三色濾光片觀察不同顏色的熒光信號。GLP探針：同時出現2綠2紅信號為13及21二倍體；GSP探針：若同時出現2藍1綠1紅記為18二倍體和XY，若同時出現2藍2綠為18二倍體和XX。羊水細胞核型分析方法：首先進行羊水細胞培養，然后制備染色體，G顯帶，并根據人類細胞遺傳學國際命名體制（ISCN）2009版標準進行核型分析和描述[8]。

1.3 觀察指標 ①統計各孕婦NT厚度，并統計胎兒染色體核型異常者的異常類型。②統計并比較不同NT厚度孕婦的胎兒染色體核型異常率。③對胎兒的染色體核型異常情況與NT厚度、孕婦年齡、胎兒畸形發生率、胎兒性別等因素展開關聯性分析。

1.4 統計學方法 采用SPSS 22.0統計軟件進行數據處理，計數資料用[ 例(%)]表示，兩組間比較采用χ2檢驗；多組間比較采用χ2趨勢檢驗；計量資料用(±s)表示，采用t檢驗。以P＜ 0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 NT厚度與染色體核型分析結果 106例孕婦經介入性產前診斷檢查以及胎兒染色體核型分析，其中19例胎兒（NT ≥3.0 mm）出現染色體核型異常，染色體核型異常檢出率為17.92%（19/106）。染色體核型異常分別為：13三體2例（10.53%）、18三體1例（5.26%）、21三體 10例（52.63%）、45，X 1例（5.26%）、47，XXX 5例（26.32%），見表1。

表1 19例染色體核型異常胎兒NT厚度與染色體核型分析結果

2.2 NT厚度與胎兒染色體核型異常的關聯性分析 隨著NT厚度的增加，染色體核型異常率也逐漸升高，差異有統計學意義（P＜ 0.05），見表2。

表2 NT厚度與胎兒染色體核型異常檢的關聯性分析

2.3 胎兒染色體核型異常與NT厚度、孕婦年齡、胎兒畸形及胎兒性別的關系 正常染色體核型組的NT厚度低于異常染色體核型組，且分娩年齡＜35歲、胎兒性別為男性、胎兒無畸形的占比均高于異常染色體核型組，差異均有統計學意義（均P＜ 0.05），見表3。

表3 胎兒染色體核型與NT厚度、孕婦年齡、胎兒畸形及胎兒性別的關系[ 例(%)]

3 討論

NT厚度是指胎兒頸部皮下所存在的無回聲帶，其位于皮膚高回聲帶、深部軟組織高回聲帶的中間，NT厚度通常是妊娠早期超聲影像檢查的重要指標。在胎兒的正常生長發育階段，胎兒頸部位置的頸靜脈竇與頸部淋巴管在母體妊娠10～14周階段會出現相連通的表現，頸部位置可出現少許淋巴液積蓄，胎兒可出現淋巴液與靜脈血短暫性回流異常，經超聲影像檢查可出現短暫性頸部透明帶[9-10]。若胎兒出現染色體核型異常，將影響胎兒在母體內的生長發育，頸部靜脈竇與頸部淋巴管的液體流通出現延后致使頸部淋巴液無法順利回流，使液體相對較多地積蓄在頸部，導致NT增厚[11]。有學者指出，NT數值增厚是臨床上借助超聲影像來評估胎兒外觀體征的重要指標[12]。

有研究指出，在孕婦妊娠11～13+6周階段，NT增厚的胎兒中，12%胎兒會出現一定程度的發育異常，包括頸部透明層增加，且隨著NT數值的增加，其畸形異常度將更嚴重[13]。NT增厚除可作為胎兒染色體核型異常與否判斷指征外，同時還具有評估胎兒是否存在解剖形態學畸形或者死胎的價值[14]。因此，在孕婦妊娠周期11～13+6周階段，通過NT篩查能有效評判出胎兒是否存在高風險因子，以便在后續的產前疾病與胎兒畸形篩查中做出參考性診斷。目前，國外已將NT ≥3.0 mm視為胎兒染色體核型異常篩查的主要評價標準[15]，但國內尚無統一的標準。本研究對106例孕婦進行介入性產前診斷檢查，并對胎兒染色體核型展開分析，其中19例胎兒（NT ≥3.0 mm）出現染色體核型異常，其中21三體染色體核型異常所占比例最高，與馬瑩等[16]的研究結果基本相符。本研究中，隨著NT厚度的增加，胎兒出現染色體核型異常的風險概率也隨之升高，表明胎兒NT厚度與染色體核型異常的風險呈正相關，NT篩查可作為孕婦妊娠早期胎兒染色體核型異常篩查的主要手段之一，同時可作為孕婦開展介入式產前篩查的主要指征。但NT厚度介于2.5～2.9 mm時胎兒未出現染色體核型異常，這可能與本研究納入的樣本量相對較少有關，因此，上述的研究數值能否作為判定處于該NT數值范圍內的胎兒是否會出現染色體核型異常的標準還需進一步進行研究。

相關研究表明，高齡孕婦是出現胎兒染色體核型異常的危險群體，不僅妊娠期并發癥風險較高，胎兒染色體風險也將增加，因此需重視產前篩查和診斷，但由于高齡孕婦經唐氏篩查顯示假陰性的概率相對較高，因此易造成臨床誤診[17]。有研究顯示，若對高齡孕婦直接實施介入性產前診斷檢查，可能存在一定的危險性，若由此導致產婦流產，可能對再次妊娠產生負面影響[18]。胎兒NT增厚是孕中期篩查胎兒染色體核型異常較為敏感的指標，大量研究報道，胎兒NT增厚且并發其他解剖結構畸形時，其并發染色體核型異常的危險性將有所遞增[19-20]。因此，對于高齡孕婦進行超聲NT篩查，是一項相對安全、可行的產前篩查方案，對胎兒NT值較高者進行胎兒染色體分析對減少缺陷新生兒的出生具有積極的臨床價值，但關于女性胎兒的染色體核型異常檢出率高于男性胎兒這一結果并未深入研究，未來還需進一步進行探討。最后，及時開展介入性產前診斷予以進一步篩查，還需在孕婦妊娠20～24周階段予以胎兒畸形B超檢查，做好圍產期篩查保健工作，以有效減少新生兒發育不良或新生兒缺陷事件的發生。

綜上，超聲檢查作為胎兒NT篩查的有效手段，對高齡孕婦具有積極的產前診斷價值，對于妊娠周期介于11～13+6周，且NT ≥2.5 mm孕婦，需要求產婦接受胎兒染色體檢查，以便進一步明確診斷，規避新生兒發育不良或者缺陷事件的發生。但本研究納入的樣本量相對較少，未來還需進一步進行大樣本的臨床研究。