經(jīng)方青蛾丸防治絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的基礎(chǔ)及臨床研究進(jìn)展*

李 晶 ，李建國，謝興文 ，黃 晉

1 甘肅省中醫(yī)藥研究院，甘肅 蘭州 730050；2 甘肅省中醫(yī)院；3 甘肅中醫(yī)藥大學(xué)；4 甘肅省第二人民醫(yī)院

絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥（postmenopausal osteoporosis，PMOP）是中老年女性常見病，是雌激素水平缺乏導(dǎo)致骨吸收大于骨形成的高轉(zhuǎn)化型全身代謝性骨病［1］。目前我國 50 歲人群 PMOP 的發(fā)病率高達(dá)14.2%，有相關(guān)統(tǒng)計指出到2050年將高達(dá)50%～70%［2］。祖國醫(yī)學(xué)認(rèn)為腎精虧虛、脾不運(yùn)化、肝氣郁結(jié)等與PMOP 的發(fā)病關(guān)系密切。青娥丸以其補(bǔ)腎壯骨的功效臨床常用以治療腰痛。筆者檢索近幾年經(jīng)方青娥丸治療PMOP 的研究文獻(xiàn)，發(fā)現(xiàn)其治療PMOP 臨床效果明確，同時現(xiàn)代藥理研究亦表明該方在臨床中具有良好的療效［3］。

1 青蛾丸藥效學(xué)分析

青娥丸首載于《太平惠民和劑局方》，《中華人民共和國藥典》記載其由杜仲（鹽炙）、補(bǔ)骨脂（鹽炙）、核桃仁（炒后搗爛）、大蒜（蒸熟粉碎成細(xì)粉）4味藥組成，為臨床常用的補(bǔ)腎壯骨名方，具有補(bǔ)腎健骨的功效［4-5］。現(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)其能夠通過調(diào)節(jié)鈣、磷平衡，促進(jìn)骨形成及抑制骨吸收，維持穩(wěn)定的骨代謝及調(diào)節(jié)雌激素代謝而發(fā)揮防治PMOP 的作用［6］。孫冠蕓等［7］研究表明，經(jīng)方青娥丸主要通過結(jié)合雌激素β-受體發(fā)揮雌激素樣作用，增加雌激素分泌并增加子宮質(zhì)量。劉玲等［8］對青娥丸中部分化學(xué)成分進(jìn)行藥代動力學(xué)與抗骨質(zhì)疏松作用相關(guān)性的研究，應(yīng)用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（UHPLC-MS）測定藥物濃度并繪制藥-時曲線；采用MTT 法對成骨細(xì)胞增殖率測定及繪制時-效曲線，兩者比較發(fā)現(xiàn)具有較好的相關(guān)性，且鹽炙品相關(guān)性更高。王恒等［9］采用高效液相色譜法對青娥丸中12 種化學(xué)成分含量變化進(jìn)行測定，發(fā)現(xiàn)每種化學(xué)成分分離度均良好。于文玫等［10］對青娥丸君藥杜仲中5 種黃酮類成分進(jìn)行含量測定，發(fā)現(xiàn)含量差異較小，得出青娥丸質(zhì)量穩(wěn)定。馬改霞等［11］指出，應(yīng)用超聲提取比較加熱回流提取效果更佳，同時指出LC-MS/MS 法能夠快速、準(zhǔn)確地測定青娥丸中藥效成分的含量，能夠有效地控制藥物質(zhì)量。

2 青蛾丸對骨代謝的調(diào)節(jié)機(jī)制

隨著雌激素水平下降，成骨細(xì)胞活性減弱，破骨細(xì)胞活性增強(qiáng)，骨吸收增加而發(fā)生PMOP，此過程受多種因子的調(diào)控［12］，同時研究表明雌激素能夠作用于骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞、成骨細(xì)胞、破骨細(xì)胞及骨細(xì)胞上雌激素受體而發(fā)揮促進(jìn)成骨的作用［13-14］。翁澤斌等［15］研究發(fā)現(xiàn)，不同炮制方法組成的青娥丸均能夠顯著提高人成骨細(xì)胞活性，促進(jìn)其增殖、分化與礦化，能夠有效防治PMOP，且鹽炙品青娥丸效果最佳。熊志立等［16］應(yīng)用不同青娥丸的提取液對成骨樣細(xì)胞UMR106 的增殖分化研究發(fā)現(xiàn)，青娥丸中乙醇提取在4.8×10-3mg/mL 及4.8×10-4mg/mL 濃度時顯示出最強(qiáng)的活性，能夠顯著促進(jìn)細(xì)胞增殖及分化，改善異常的骨代謝，促進(jìn)骨的形成，延緩PMOP 的發(fā)病。楊榮平等［17］研究發(fā)現(xiàn)，青娥丸不同部位提取物均能通過提高成骨細(xì)胞內(nèi)堿性磷酸酶活性及抑制破骨細(xì)胞抗酒石酸酸性磷酸酶活性來有效促進(jìn)骨形成。王度等［18］等探討發(fā)現(xiàn)青娥丸含藥血清可通過激活MMP3-OPNP53 信號通路來有效抑制破骨細(xì)胞活性，抑制骨量流失并維持正常的骨代謝，發(fā)揮防治PMOP 的作用。

3 青蛾丸對去勢大鼠骨代謝的調(diào)節(jié)機(jī)制

馮瀟雨［19］對雙側(cè)卵巢切除大鼠應(yīng)用青娥丸治療，發(fā)現(xiàn)其能夠顯著增加骨密度并改善骨小梁結(jié)構(gòu)，延緩 PMOP 的發(fā)病。王曉燕等［20-21］等對去卵巢大鼠進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，青娥丸能增加骨髓灌注參數(shù)、血小板-內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子（platelet endothelial cell adhesion molecule-1），血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）等血管內(nèi)皮標(biāo)志物，提高骨髓灌注來調(diào)節(jié)骨代謝、改善骨微結(jié)構(gòu)。顏翠萍等［22］用不同炮制品配伍青娥丸給大鼠灌胃12 周，評價對子宮的刺激作用，大鼠骨小梁的微結(jié)構(gòu)改變及對大鼠骨密度的影響，發(fā)現(xiàn)青娥丸配伍生品及鹽炙品均能有效防治骨質(zhì)疏松，鹽炙品配伍效果更加明顯。王金蘊(yùn)等［23］對去卵巢大鼠模型研究發(fā)現(xiàn)，青娥方能夠顯著的增加大鼠體內(nèi)的血清雌二醇（estradiol，E2）水平高，降低基質(zhì)金屬蛋白酶9（matrix metalloproteinase 9，MMP-9）的合成及抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate resistant acid phosphatase，TRACP）分泌，有效延緩骨吸收速率。

4 青蛾丸防治PMOP的作用機(jī)制

陳娟等［24］研究發(fā)現(xiàn)，青娥丸能夠明顯增加PMOP 患者降鈣素、堿性磷酸酶、骨鈣素及骨密度水平，并降低抗酒石酸酸性磷酸酶水平，從而發(fā)揮治療PMOP 的作用。馬陳等［25］研究發(fā)現(xiàn)，青娥丸能夠顯著提高患者血清β-catenin 蛋白和癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞黏附分子1（carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 1，CEACAM1）水平，從而有效增加及維持患者的骨密度水平。余海等［26］研究指出，青娥丸能夠通過骨降低吸收標(biāo)志物血清Ⅰ型膠原交聯(lián)C-末端肽（serum C-terminal telopeptide of typeⅠcollagen，SCTX）及骨橋蛋白水平有效發(fā)揮骨吸收作用來延緩PMOP 的發(fā)生及發(fā)展。趙光等［27］用青娥丸治療PMOP 24 周后發(fā)現(xiàn)，患者骨密度（bone mineral density，BMD）、骨鈣素（osteocalcin）、骨堿性磷酸酶（bone alkaline phosphatase，BAP）明顯升高。沈霖等［28］研究表明，青娥丸可通過提高患者β-鏈蛋白（β-catenin）表達(dá)及抑制重組DKK1 蛋白水平來增加BMD，進(jìn)而有效發(fā)揮防治PMOP的作用。劉景科等［29］研究發(fā)現(xiàn)，青娥方可能通過調(diào)高促生長因子（insulin-like growth factors-1，IGF-1）及降低白細(xì)胞介素6（interleukin-6，IL-6）、腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）水平發(fā)揮治療PMOP 的作用。馬陣［30］研究絕經(jīng)后女性血清發(fā)現(xiàn)，青娥丸能夠增加骨小梁數(shù)、骨小梁厚度、骨體積分?jǐn)?shù)、骨表面與骨體積比及骨小梁的結(jié)構(gòu)，同時β-catenin 表達(dá)亦顯著増加，效果與E2相仿。周廣文［31］等以加味青娥丸治療PMOP 患者，發(fā)現(xiàn)患者血清基質(zhì)GLA蛋白（matrix gla protein，MGP）水平及MGPmRNA 表達(dá)升高，同時血清Ⅰ型前膠原N-端前肽（N-terminal propeptide of typeⅠprecollagen，PINP）、血清Ⅰ型膠原羧基端肽（serum carboxy-terminal peptide of procollagen typeⅠ，ICTP）等骨代謝指標(biāo)降低。夏雪等［32］等研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)方青娥丸能夠增加BMD 水平，效果優(yōu)于鈣爾奇D片。

5 討論

治療PMOP 需要長時間的藥物治療，研究表明青娥丸能夠有效增加患者的BMD，改善患者的骨結(jié)構(gòu)，維持有效的骨代謝水平，同時能夠明顯緩解腰膝酸軟、腰背疼痛等臨床癥狀。目前臨床研究中療效觀察指標(biāo)及試驗時間尚不夠規(guī)范；為能按照隨機(jī)、雙盲等嚴(yán)格的科研設(shè)計方法，研究結(jié)果重復(fù)性較差，同時對藥物安全性研究資料較少，對組方中藥材來源、活性成分及含量研究尚不十分明確。望在今后的研究中充分利用現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中免疫、分子生物學(xué)學(xué)中蛋白質(zhì)組學(xué)、基因組學(xué)及網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)等技術(shù)，明確青娥丸在細(xì)胞、分子、蛋白及基因方面的作用靶點、活性成分及相關(guān)通路，為今后青娥丸的臨床用藥及進(jìn)一步研發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。