三葉青種質資源及藥理作用的研究進展

葛佳麗，馬 揚，李慧琴，張 婷（通訊作者）

（浙江中醫藥大學 浙江 杭州 310000）

三葉青（Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg）學名為三葉崖爬藤，葡萄科崖爬藤屬植物，別名石猴子、石抱子、破石珠等。通常以野生塊根或者全草入藥，鮮用或曬干用藥，藥用價值很高。然而，三葉青地下塊根生長緩慢，加上人為的過度開發，使野生三葉青瀕臨滅絕。因此，為了使具有優質藥效的三葉青可以實現規模化生產，其藥性可以得到充分的開發利用，現對三葉青的種質資源、有效成分、藥理作用及臨床應用進行綜述。

1.三葉青的種質資源

目前，由于三葉青藥用價值日益提高，市場需求量逐漸擴增，而三葉青藥用部位地下塊根生長緩慢，人工栽培技術體系還不夠完善，造成三葉青資源緊缺。充分保護利用現有野生資源，培養高質量高產量的人工三葉青，是豐富三葉青種質資源亟待解決的。

1.1 三葉青的資源分布

三葉青多分布在我國南部地區，主要分布于浙江、廣西、江西。其多生長在蔭蔽度較高的山谷、灌叢等腐殖質處，生長情況與溫度、光照、蒸騰作用等多種因素密切相關。

1.2 三葉青的栽培技術

為了提高三葉青的產量，科研工作者根據三葉青的形態結構、生長條件等方面提高人工快繁優質三葉青的栽培技術。王靜等[1]發現帶腋芽上端半木質化莖段作為外植體建立的三葉青高效繁殖體系，適合其規模化栽培。史清英[2]通過實驗確定三葉青外植體組織培養的最佳條件。彭昕等[3]建立的三葉青愈傷組織顆粒狀懸浮培養體系，可以極大地縮短生產周期。陸飛彪等[4]發現在培養基中添加天然有機物培養三葉青愈傷組織可以提高培養物總黃酮的含量，證明了采用組織培養技術提高三葉青總黃酮產量的可行性。余樂等[5]通過測定12 批浙產三葉青，得出三葉青水分、總灰分、浸出物及活性成分的限度標準建議，崔偉亮等[6]得出70%乙醇是三葉青粉浸出物的最佳提取溶劑，為三葉青質量標準控制提供建議。

2.三葉青提取物的藥理作用及機制

2.1 抗腫瘤作用及機制

三葉青提取物抗腫瘤效果好，機制各不相同，主要通過抑制腫瘤細胞增殖，促進其凋亡或通過提高機體的免疫力，增強藥物敏感性來降低腫瘤細胞的存活率，達到抗腫瘤作用。

2.1.1 乙酸乙酯提取物抗腫瘤 三葉青乙酸乙酯提取物（ethyl acetateextract, EAE）可以誘導細胞凋亡，抑制肺癌、腸癌、肝癌等多種腫瘤的生長。李華美等[7]的研究發現三葉青EAE 可能是通過上調凋亡蛋白bax、caspaseˉ3 的表達對荷瘤小鼠Lewis 肺癌細胞生長起抑制作用，高劑量處理組抑瘤效果更好。林霜等[8]的研究也證實三葉青EAE 可以通過激活caspaseˉ3 表達，誘導結腸癌HT29 細胞凋亡。WANG 等[9]發現三葉青EAE 可以通過線粒體途徑介導的Caspase 依賴性誘導HepG2 細胞凋亡。

2.1.2 水提取物抗腫瘤 三葉青的水提物也有較好的抗腫瘤作用。丁麗等[10]發現三葉青水提物對人宮頸癌Hela229 細胞和人惡性黑色素瘤A375 細胞有增殖抑制作用，與濃度相關。袁雨等[11]通過實驗發現三葉青水提取物能通過促進NK 細胞增殖，增強其殺傷胃癌BGCˉ823 細胞活性，并猜測此現象可能與三葉青水提取物使NK 細胞PFP、GraB 和CD107a 表達上調相關。

2.1.3 石油醚提取物抗腫瘤 丁麗等[12]篩選三葉青不同溶劑萃取部分對不同腫瘤細胞進行體外抑制作用，發現石油醚部位提取物對AGS 細胞和5637 細胞均有較強的體外抑制作用，且有一定的濃度依賴，確定其為三葉青發揮抗腫瘤作用主要活性部位。同樣的，熊艷等[13]研究了三葉青石油醚萃取物對Hela 細胞的作用，石油醚萃取物通過阻滯hela細胞周期在G2/M期，影響酶活性變化，誘導腫瘤細胞凋亡，且與時間和劑量相關。

3.其他藥理作用及機制

三葉青同時還還具有明顯的抗炎解熱、保肝、抗病毒、抑菌等作用。如邢倩等[14]發現三葉青中牡荊苷可通過激活Nrf2 轉錄因子發揮抗炎作用；楊雄志等[15]發現三葉青提取物可以明顯下調下丘腦5ˉ羥色胺（5ˉHT）、去甲腎上腺素（NE）、多巴胺（DA）含量進行體溫調節的機制，也研究[16]證明了三葉青多糖能降低肝損傷小鼠血清中谷丙轉氨酶（ALT）、谷草轉氨酶（AST）、丙二醛（MDA）水平以及提高超氧化物歧化酶（SOD）水平而起到保肝作用；董宜旋[17]、周武[18]、許海順[19]、熊艷等分別研究發現三葉青抗病毒、化感自毒，抗氧化、抑菌作用。何文等[21]試驗發現三葉青乙酸乙酯提取物抗氧化能力最強。

4.總結與展望

三葉青雖為中國傳統中藥，早在治療小兒發熱、肺炎等方面有應用，但遺憾的是三葉青至今未被《中國藥典》收錄，關于其植物基原也未有官方定性，將三葉青收錄，納入行政管理范疇，更有利于三葉青藥性的規范開發和臨床的治療應用[21]。三葉青不同部位提取物的成分尚未完全鑒定，其活性成分和抗腫瘤作用機制仍不明確，限制了其在臨床的使用。三葉青作為天然植物，本身基本無毒，盡管不能完全根治腫瘤，但能有效緩解腫瘤帶來的疼痛，調節免疫力，降低化療所產生的副作用，被譽為“植物抗生素”。因此，對于三葉青藥性及機制的繼續研究非常具有臨床意義。