院外感染性肺炎分子檢測技術的應用進展

丁洪鋒

（天等縣疾病預防控制中心，廣西 崇左，532800）

院外感染性肺炎（ZCP）已成為公共衛生問題，其是指除院內感染以外的感染性肺炎，主要由多類病原體所導致[1]。目前，臨床將ZCP可歸納為兩大類：一類為自然疫源性疾病原誘發肺炎，另一類為社區獲得性肺炎（CAP）[2]。CAP發病率逐年呈上升趨勢，已成為全球范圍內高經濟負擔疾病，以小兒、老年患者最為多見，且伴有不同程度的地區分布差異。而自然疫源性病源誘發的ZCP則以青壯年最為多見，且男性占比例較多[3]。而我國CAP患者只能培養常規病原體，且培養陽性率相對免疫學檢測較低，一般為50%左右。同時部分對培養較高的細菌、病毒，無法通過常規分離培養進行判斷[4]。現階段，臨床多以病原常規分離培養、血清學檢測實施診斷，分子檢測應用地區較為少見。但臨床醫師判斷ZCP患者病原學相關信息相對較為困難，治療時存在一定局限性，使其通常在等待結果期間，實施光譜抗生素及抗病毒治療，進而直接增加抗生素濫用現象[5]。因此本文對ZCP實施分子檢測技術進行分析，現綜述如下：

1 細菌性、支原體、衣原體感染ZCP分子檢測現狀

細菌感染屬于諸多地區，誘發CAP的關鍵因素。現階段，以呼吸道致病菌的實時熒光定量聚合酶鏈式反應（PCR）的方案已產生，能夠在較短時間內，檢測多類常見致病菌，具有較佳的特異性及敏感度，特別是肺炎克雷伯菌、肺炎鏈球菌等[6]。而對呼吸道標本分別實時熒光PCR檢測和細菌培訓，將兩者實施聯合試驗，則可有效提高金黃色葡萄球菌、流感嗜血桿菌、銅綠假單胞菌等檢出率[7]。

1.1 嗜肺軍團菌感染的ZCP分子檢測嗜肺軍團菌的分子檢測技術具有多種，其暴露核酸分型鑒別技術、PCR相關技術、分子雜交的探針技術，其中以熒光定量PCR最為多見[8]。相關學者，將熒光定量PCR應用于肺炎患者呼吸道、血清標本的檢測，也有學者，通過多重熒光定量PCR技術檢測不同團菌屬[9]。而我國也具有嗜肺軍團菌檢測方法的報道，通過嗜肺軍團菌mip基因，制定相關引物，該技術具有安全性高、靈敏度高等優勢[10]。

1.2 肺炎支原體感染ZCP分子檢測PCR檢測技術已在肺炎支原體疾病中得到廣泛應用，其安全性、準確度以及靈敏度明顯優于血清抗體檢測[11]。相關學者，選擇220例肺炎患兒肺泡灌洗液實施PCR檢測，結果顯示，肺炎支原體陽性率可達到50%。而實時熒光定量PCR與傳統PCR相比較，更加簡便[12]。

1.3 肺炎衣原體感染ZCP分子檢測PCR技術能夠準確、快速檢測肺炎支原體。有關學者選擇PCR技術篩選93例感染肺炎患者，其中肺炎衣原體感染率可達到32.6%[13]。而實時熒光定量PCR法與熒光抗體法，具有更高的檢出率，能夠用于臨床診斷[14]。

2 病毒感染ZCP分子檢測現狀

而由病毒所誘發的ZCP，其流行特點、感染癥狀與細菌較為相似，故單一依據臨床癥狀、分離培養進行檢測病毒，存在明顯局限性[15]。國內外諸多學者顯示，通過分子診斷技術，對不同病毒實施檢測方法，PCR技術已在應用于病毒性肺炎檢測，以逆轉錄一聚合酶鏈式反應(RT—PCR)使用較多，可適用于多類病毒，但檢測非典（SARS）病毒時，疾病早期RT—PCR敏感性較低[16]。

3 寄生蟲造成的ZCP分子檢測

寄生蟲誘發ZCP于臨床較為少將，該癥狀、影響以及生化檢查表現，與細菌或病毒造成的肺炎差異較低，故極易增加誤診風險。而造成肺炎的寄生蟲包括多類，如溶組織阿米巴、瘧原蟲、利什曼原蟲、弓形蟲、蛔蟲等[17]。在檢測蛔蟲時，一般選擇Western blot技術，而隨著分子生物學檢測技術的完善，諸多寄生蟲檢測已逐步實施PCR技術[18]。

4 真菌造成的CAP分子檢測

近年來，全國真菌感染發病率逐年呈上升趨勢，一般以假絲酵母菌、毛霉、新生隱球菌、曲霉等，被公認為主要的機會致病菌，但目前在淺白隱球菌等不常見的真菌感染，明顯呈上升趨勢，故受到諸多醫學者的廣泛關注。相關研究發現，基于核酸的探究，能夠補充常規真菌檢測方案。目前，用于診斷真菌性疾病分子手段以PCR最為常見，其特異性、靈敏度均需有待上升。通常PCR局限性，無法合理分辨定植真菌和致病真菌，而實時熒光定量PCR則可進行[19]。大量文獻證實，實時熒光定量PCR能夠替代免疫熒光法。但現階段，分子方案于檢測真菌感染方面，伴有不同程度的缺陷性，如真菌細胞壁無法穿透，獲得完整真菌難度系數較大，諸多商業生成的試劑和血管，伴有真菌DNA污染，造成實驗誘發假陽性結果，同時真菌分子檢測技術現階段，尚未統一標準[20]。

5 小結

綜上所述，于我國醫療系統中，臨床專注于治療，雖診斷屬于最佳有效的前提，但受到多類因素的干擾，部分更先進、更準確、更快速的診斷措施，無法在臨床得到廣泛應用。同時疾控部分致力于疾病的檢測，雖研究部分更先進的方案，但缺乏與臨床的充分銜接。故疾控部門需與臨床緊密結合互動，進而為診斷及治療ZCP奠定一定基礎。