高效液相色譜在食品農(nóng)獸藥殘留中的檢測(cè)應(yīng)用

鄭碧秋

（茂名市食品藥品檢驗(yàn)所，廣東茂名 525000）

高效液相色譜法（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）是在液相色譜+氣相色譜的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的色譜技術(shù)，具有高壓、高速、高效的特點(diǎn)。與液相色譜法相比，HPLC的柱內(nèi)徑僅為2～6 mm，固定相粒徑小于10 μm，利用高壓輸送流動(dòng)相進(jìn)行檢測(cè)，不僅能在線檢測(cè)，還能縮短整個(gè)試驗(yàn)的分析時(shí)間。與氣相色譜相比，HPLC法不易受樣品揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的影響，可用于多種有機(jī)物檢測(cè)，且HPLC法的選擇性大，操作簡(jiǎn)便，流動(dòng)相改變靈活，可廣泛應(yīng)用于谷物、蔬菜、水果和畜禽肉產(chǎn)品檢測(cè)。

1 食品中農(nóng)藥殘留的檢測(cè)

1.1 有機(jī)磷農(nóng)藥

有機(jī)磷農(nóng)藥是農(nóng)作物種植過程中病蟲害防治的主要?dú)⑾x劑，如敵百蟲、敵敵畏。有機(jī)磷農(nóng)藥具有藥效強(qiáng)、價(jià)格廉的優(yōu)點(diǎn)，深受廣大農(nóng)戶喜愛，但有機(jī)磷農(nóng)藥對(duì)人畜危害較大，容易產(chǎn)生急性、毒性中毒。郭愛靜等[1]通過高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（HPLC-MS/MS）對(duì)葡萄酒中4種不同有機(jī)磷農(nóng)藥進(jìn)行檢測(cè)，研究發(fā)現(xiàn)抑草磷、莎稗磷、哌草磷和甲基胺草磷回收率為69.3%～99.2%，5種檢測(cè)樣品的RSD值范圍在2.3%～8.1%，表明HPLC-MS/MS檢測(cè)葡萄糖樣品時(shí)具有準(zhǔn)確度和精準(zhǔn)度高的優(yōu)勢(shì)。俞寅等[2]對(duì)小麥中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)HPLC-MS/MS可同時(shí)檢測(cè)11種不同的有機(jī)磷農(nóng)藥，RSD值為0.24%～8.34%，且檢測(cè)速度快，樣品前處理簡(jiǎn)單，可以廣泛應(yīng)用于原糧中的有機(jī)磷農(nóng)藥檢測(cè)。

1.2 氨基甲酸酯類農(nóng)藥

氨基甲酸酯類農(nóng)藥是一種選擇性強(qiáng)、毒性低、防治效果好的植物性殺蟲劑，主要用于農(nóng)作物、蔬菜和水果等病蟲害防治。李婷婷等[3]以普通白菜為檢測(cè)對(duì)象，通過HPLC法分析氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留情況，發(fā)現(xiàn)HPLC能同時(shí)檢測(cè)涕滅威亞砜、涕滅威砜、涕滅威、三羥基克百威、滅多威、克百威和甲萘威7種農(nóng)藥，7種農(nóng)藥回收率為90%～110%，RSD值小于10%，研究發(fā)現(xiàn)HPLC檢測(cè)的準(zhǔn)確率和精密度較高。何家國(guó)等[4]以小麥、大米、玉米等糧食為檢測(cè)對(duì)象，通過HPLC法分析8種不同的氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留情況，研究發(fā)現(xiàn)不同樣本加標(biāo)回收率在77.9%～106.3%，RSD值小于6.7%，表明HPLC法檢測(cè)精準(zhǔn)度高，試驗(yàn)重現(xiàn)性好。余朝旭等[5]以草莓為檢測(cè)對(duì)象，通過HPLC法分析7種氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留情況，當(dāng)添加水平為0.05 mg/kg和0.10 mg/kg時(shí)，發(fā)現(xiàn)樣品回收率分別為81%～110%和87%～116%，表明HPLC法操作簡(jiǎn)單，耗時(shí)短，可提高食品中氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留檢測(cè)工作效率。

1.3 煙堿類農(nóng)藥

煙堿類農(nóng)藥是一種殘留量低、藥效持續(xù)長(zhǎng)、毒性低且殺蟲效果好的光譜殺蟲劑，可廣泛用于水稻、蔬菜和果樹病蟲害防治，如吡蟲啉、呋蟲胺、環(huán)氧蟲啶等。但煙堿類農(nóng)藥不易揮發(fā)，無法通過氣相色譜-質(zhì)譜法檢測(cè)，且熱穩(wěn)定性不強(qiáng)，而HPLC可以實(shí)現(xiàn)檢測(cè)。吳潔珊等以HPLC-MS/MS對(duì)陳皮進(jìn)行7種新煙堿類農(nóng)藥檢測(cè)，研究發(fā)現(xiàn)不同新煙堿類農(nóng)藥的檢出限為0.1～2.0 μg/kg，且不同農(nóng)藥間的線性關(guān)系良好，無干擾，樣本回收率為71%～117%，RSD值可低于1.8%，表明高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法不僅簡(jiǎn)單快速、準(zhǔn)確度高，還能滿足食品中新煙堿類農(nóng)藥殘留檢測(cè)，為食品安全提供保障。朱之烔等對(duì)蜂蜜進(jìn)行新煙堿類農(nóng)藥檢測(cè)，研究發(fā)現(xiàn)不同新煙堿類農(nóng)藥的檢出限為0.1～1.0 μg/kg，定量限為0.3～2.0 μg/kg，6種農(nóng)藥的RSD值為1.3%～14.3%，表明HPLC方法快速，分析簡(jiǎn)單，可以適用于大批量蜂蜜農(nóng)藥殘留的檢測(cè)。

2 食品中獸藥殘留的檢測(cè)

2.1 氯霉素

氯霉素是一種抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)合成的光譜抗生素，對(duì)G-和G+均有抑菌作用，但會(huì)影響動(dòng)物骨髓造血機(jī)能，2002年頒布的《動(dòng)物性食品中獸藥最高殘留限量》已經(jīng)明文規(guī)定食品動(dòng)物中不得檢出氯霉素。朱虹通過HPLC法對(duì)豬肉產(chǎn)品進(jìn)行抗生素檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)HPLC法可同時(shí)檢測(cè)氯霉素、土霉素、甲砜霉素、阿莫西林、四環(huán)素和氟苯尼考6種抗生素，且不同抗生素的線性關(guān)系良好，最低檢出限為8 μg/kg，定量限最高可達(dá)30 μg/kg，多次檢測(cè)的RSD值最高為4.3%，表明HPLC法是一種快速、高效、簡(jiǎn)便的肉源性食品中抗生素檢測(cè)方法。

2.2 四環(huán)素類

四環(huán)素類抗生素對(duì)G-和G+和立克次氏體均有較好的抑菌作用，畜牧養(yǎng)殖常用的是土霉素、四環(huán)素、金霉素和強(qiáng)力霉素等。呂振娥通過HPLC法對(duì)畜禽肉中四環(huán)素類抗生素殘留進(jìn)行檢測(cè)，以磷酸鹽緩沖液+乙腈提取的樣品具有檢出限低的優(yōu)勢(shì)，四環(huán)素和金霉素的檢測(cè)限發(fā)別為0.06 mg/kg和0.10 mg/kg，樣品回收率為79%～85%，并用該方法對(duì)烏魯木齊當(dāng)?shù)氐暮献魃珉u肉進(jìn)行檢測(cè)，雖未發(fā)現(xiàn)超標(biāo)禽，但發(fā)現(xiàn)該方法簡(jiǎn)便，準(zhǔn)確率高。

2.3 磺胺類

磺胺類對(duì)細(xì)菌葉酸代謝具有較強(qiáng)的抑制作用，臨床上用量較大的為磺胺甲基嘧啶、磺胺二甲嘧啶等。王依婷等通過HPLC-MS/MS對(duì)豬肉中的18種磺胺類藥物殘留進(jìn)行檢查，研究發(fā)現(xiàn)不同磺胺類藥物的線性關(guān)系良好（R值＞0.99），磺胺類藥物的檢出限為0.5 μg/mL，且多次檢驗(yàn)的RSD為0.17%～5.94%。

2.4 喹諾酮類

喹諾酮類對(duì)細(xì)菌DNA螺旋酶合成具有抑制作用，進(jìn)而發(fā)揮廣譜、高效的抑菌功能，常用藥物有環(huán)丙沙星、氟哌酸等。田雨超等以市面銷售豬肉為檢材，利用HPLC法對(duì)環(huán)丙沙星、沙拉沙星、恩諾沙星和達(dá)氟沙星4種不同的喹諾酮類藥物進(jìn)行檢查，研究發(fā)現(xiàn)4種不同的喹諾酮類藥物的線性關(guān)系良好，回收率為66.1%～107.9%，前3種藥物的檢出限均為5 μg/L，第4種為1 μg/L，不同批次豬肉組織檢測(cè)的變異系數(shù)值低，表明HPLC法是一種實(shí)用性強(qiáng)、操作簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確率高的喹諾酮類藥物殘留檢測(cè)方法。

3 結(jié)語(yǔ)

綜上所述，高效液相色譜法具有分析速度快、靈敏度和準(zhǔn)確度高的特點(diǎn)，尤其是能對(duì)高沸點(diǎn)的檢驗(yàn)材料進(jìn)行有效分析，可滿足不同類型的食品檢驗(yàn)材料的檢測(cè)，為食品安全質(zhì)量保障提供了新的分析和檢測(cè)途徑。由于農(nóng)戶農(nóng)作物種植和畜禽養(yǎng)殖過程中藥物應(yīng)用不合理，容易出現(xiàn)耐藥性和藥物殘留問題，高效液相色譜可以很好地檢測(cè)農(nóng)畜產(chǎn)品中農(nóng)獸藥殘留情況，進(jìn)而保障農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全。