自身抗體及生化指標(biāo)在成人隱匿性自身免疫性糖尿病診斷中的檢驗(yàn)效果分析

王佳佳，林潔，肖小芬

廈門大學(xué)附屬中山醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心，福建廈門 361004

在2019年，世界衛(wèi)生組織對糖尿病分型標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行重新界定，將成人隱匿性自身免疫性糖尿病（LADA）命名為“成人緩慢進(jìn)展的免疫介導(dǎo)性糖尿病（slowly evolving,immune-mediated diabetes of adults）[1]”，屬于混合型糖尿病的一個亞型（不同于之前定義的“屬于1型糖尿病的1個亞型”）。為了幫助LADA患著制定適合其機(jī)體情況的糖尿病治療方案，首先需要確定其疾病類型。目前，臨床診斷LADA疾病的方法為：根據(jù)患者服藥一段時間后出現(xiàn)的有別于1型糖尿病的反應(yīng)，將懷疑重點(diǎn)調(diào)整為LADA。基于此種方式確診LADA的準(zhǔn)確性雖然較高，但容易錯過最佳治療時間，進(jìn)而造成患者胰島β功能衰退速度更加迅速[2]。除了上述方式之外，檢測患者的胰島自身抗體及相關(guān)生化指標(biāo)具備可行性。該研究以該院2019年1月—2020年12月收治的70例LADA患者為例，重點(diǎn)分析胰島自身抗體及生化指標(biāo)在成人隱匿性自身免疫性糖尿病診斷中的檢驗(yàn)效果，現(xiàn)整理研究過程，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇該院內(nèi)分泌科70例已經(jīng)確診為LADA的患者全部納入觀察組，男女比為41∶29，年齡41～58歲，平均（43.29±8.67）歲；另選取同時期在該院接受治療，且已經(jīng)確診為2型糖尿病的患者70例，全部納入對照組，男女比為40∶30，年齡42～59歲，平均（43.37±8.91）歲。經(jīng)比對，兩組患者的性別、年齡的分布情況差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。具有可比性。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①起病階段被診斷為2型糖尿病，初期口服降糖藥物能夠有效控制自身血糖，但在連續(xù)服藥6～12個月后，在無其他誘因出現(xiàn)時，感到原有治療方案無法有效控制血糖，前來該院接受檢查，最終確診為LADA（自身免疫功能和胰島β細(xì)胞功能進(jìn)行性、緩慢減退）的患者；②所有患者（及家屬）均知悉該研究，自愿參與并簽署知情同意書；③研究開展期間，能夠遵從醫(yī)護(hù)人員指引行事的患者；④具備良好的溝通能力，能夠及時將機(jī)體所有與LADA疾病有關(guān)的信息向醫(yī)護(hù)人員清晰反饋的患者；⑤該院醫(yī)學(xué)倫理委員會對該研究予以支持[3]。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①確診為1型、2型糖尿病（相關(guān)治療方案連續(xù)使用1年以上，在無其他誘因出現(xiàn)時，能夠?qū)C(jī)體血糖水平控制在良好范圍內(nèi)）的患者；②確診為妊娠期糖尿病、特殊原因糖尿病的患者；③因多種原因（如頭部遭受鈍器擊打、患有精神分裂癥等）導(dǎo)致思維意識混亂、喪失，無法與醫(yī)護(hù)人員有效交流的患者；④患有艾滋病等其他免疫系統(tǒng)缺陷疾病的患者；⑤對該研究不予認(rèn)可，無法有效配合的患者[4]。

1.2 方法

兩組患者均接受胰島素自身抗體及生化指標(biāo)檢測，具體流程如下。

1.2.1 胰島自身抗體檢測 免疫印跡法，使用深圳伯勞特生物制品有限公司生產(chǎn)的糖尿病自身抗體免疫印跡試劑盒。①取患者靜脈血2～5 mL，放置于試管，待凝固后進(jìn)行離心作業(yè)，成功分離處血清后，放置于2～8℃的環(huán)境下存放備用；若24 h內(nèi)無法測試，則應(yīng)放置于-20℃的冰箱內(nèi)保存。使用前，應(yīng)注意觀察標(biāo)本內(nèi)是否出現(xiàn)絮狀物或霉變、溶血現(xiàn)象，避免測試結(jié)果受影響[5]。②配置洗滌應(yīng)用液。向25 mL濃縮洗滌液內(nèi)加入適量蒸餾水或離子水，稀釋至500 mL后放入試劑瓶中備用。③選取樣品稀釋液1 mL和10μl待檢血清，放入帶有印跡膜條的反應(yīng)槽之中。④將反應(yīng)槽放置于搖床上，在室溫（25℃）環(huán)境下?lián)u動30 min。⑤向反應(yīng)槽內(nèi)加入1 mL洗滌用應(yīng)用液，經(jīng)過1 min后，去除反應(yīng)槽液體，該過程持續(xù)4次，最后在吸水紙上拍干液體。⑥相反應(yīng)槽中加入20μl酶聯(lián)試劑和1 mL樣品稀釋液，重復(fù)步驟④、⑤。⑦相反應(yīng)槽中加入兩種顯色劑A和B，均為0.5 mL。⑧在搖床上搖動5 min，顯色。⑨等待待質(zhì)控帶和陽性區(qū)帶顯色清洗后，加入0.5 mL終止液，搖動2 min。⑩使用自來水沖洗槽中的液體，取出印跡膜條，放在吸水紙上，干后進(jìn)行對照觀察。

1.2.2 生化指標(biāo)檢測 抽取患者的靜脈血后：①使用Beckman coulter貝克曼庫爾特公司生產(chǎn)的型號為AU5800的全自動生化分析儀檢測患者的血糖；②使用東曹株式會社生產(chǎn)的型號為HLC-723G8的全自動糖化血紅蛋白分析儀檢測患者的檢測糖化血紅蛋白項(xiàng)目；③使用Roch羅氏公司生產(chǎn)的型號為cobas 8000 e601的全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀進(jìn)行C肽檢測[6]。

1.3 觀察指標(biāo)

①胰島素自身抗體檢測：共計(jì)3項(xiàng)內(nèi)容：①胰島素自身抗體（IAA）；②谷氨酸脫羧酶抗體（GADA）；③抗胰島素細(xì)胞抗體（ICA）[4]。基于3項(xiàng)指標(biāo)的具體值，評估患者是否為LADA陽性[7]。

②生化指標(biāo)檢測具體內(nèi)容：3項(xiàng)血糖常規(guī)檢測，即空腹血糖、餐后2 h血糖、糖化血紅蛋白。在上述3項(xiàng)指標(biāo)的基礎(chǔ)上，還需增加空腹C肽和餐后2小時C肽兩項(xiàng)指標(biāo)，分別進(jìn)行組間和組內(nèi)比對[8-9]。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 23.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)量資料以（x±s）表示，組間差異比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以[n（%）]表示，組間差異比較采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者基于胰島自身抗體的LADA陽性檢出情況對比

觀察組患者IAA、GADA、ICA，3項(xiàng)指標(biāo)的陽性檢出率分別為34.29%、47.14%、42.86%，均高于對照組的1.43%、0.00%、1.43%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=25.760、43.178、38.845，P＜0.001），見表1。

表1 兩組患者基于胰島自身抗體的LADA陽性檢出情況對比[n（%）]

2.2 兩組患者生化指標(biāo)檢測結(jié)果對比

觀察組患者的空腹血糖和餐后2 h血糖相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=0.056，P=0.956）；對照組患者的空腹血糖水平顯著低于餐后2 h血糖，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=5.403，P＜0.05）。觀察組患者的空腹血糖、餐后2 h血糖、糖化血紅蛋白水平均高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。觀察組患者的空腹C肽及餐后2 hC肽水平均明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 兩組患者生化指標(biāo)檢測結(jié)果對比（x±s）

3 討論

成人隱匿性自身免疫性糖尿病（LADA）的臨床特征介于1型及2型糖尿病之間，起病初期的相關(guān)癥狀、治理方法等均類似于2型糖尿病；隨著疾病的進(jìn)展，由于患者機(jī)體的胰島β細(xì)胞功能發(fā)生進(jìn)行性退化，相關(guān)特征會偏向1型糖尿病。因此，該病被形象地稱為“1.5型糖尿病”[10]。目前可知，①與其他糖尿病患者相同，LADA患者也具備多飲、多食、多尿、體重減少等典型的“三多一少”癥狀[11]。②由于自身免疫功能對胰島β細(xì)胞的破壞，故患者機(jī)體內(nèi)會產(chǎn)生大量胰島自身抗體[11-12]。該特點(diǎn)與1型糖尿病相似，即患者機(jī)體無法分泌充足的胰島素，隨著病情的進(jìn)展，治療方案需要調(diào)整，最終必須接受胰島素治療[13-14]。③LADA患者的胰島β細(xì)胞功能減退速度存在差異，故不同個體之間在臨床表現(xiàn)方面存在較大的異質(zhì)性。如部分患者按照常規(guī)2型糖尿病方案服藥6個月后，血糖水平便無法得到有效控制；而另一些患者可能在數(shù)年時間內(nèi)都無需改變初始的治療方案。④LADA患者的胰島素抵抗類似于2型糖尿病。由此可見，LADA兼具1型、2型糖尿病的特點(diǎn)。由于胰島β細(xì)胞會受到持續(xù)性破壞，故LADA患者血糖的波動性普遍高于2型糖尿病[15-16]。

該研究結(jié)果顯示：①觀察組患者IAA、GADA、ICA，3項(xiàng)指標(biāo)的陽性檢出率分別為34.29%、47.14%、42.86%，與對照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001）；②觀察組患者的空腹血糖和餐后2 h血糖相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；對照組患者的空腹血糖水平顯著低于餐后2 h血糖（P＜0.05）；③觀察組患者的空腹血糖、餐后2 h血糖、糖化血紅蛋白水平均高于對照組（P<0.05）；④觀察組患者的空腹C肽及餐后2 hC肽水平均明顯低于對照組（P<0.05）。上述結(jié)果與山東省淄博市市立醫(yī)院檢驗(yàn)科醫(yī)師李秀平[17]的結(jié)果類似。其研究報(bào)告中，LADA患者共計(jì)39例，納入LADA組；2型糖尿病患者51例，納入2型糖尿病組。檢測結(jié)果顯示：2型糖尿病組FPG、2 hPG、HbA1c、空腹C肽、餐后2 hC肽分別為（9.09±2.13）mmol/L、（12.18±1.25）mmol/L、（8.64±1.28）%、（1.26±0.29）ng/mL、（3.46±1.83）ng/mL；LADA組FPG、2 hPG、HbA1c、空腹C肽、餐后2 hC肽分別為（13.15±3.07）mmol/L、（13.20±1.17）mmol/L、（9.55±1.57）%、（0.41±0.24）ng/mL、（1.43±0.11）ng/mL，兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）[18]。

綜上所述，針對LADA疾病的治療除了控制血糖之外，還需對患者胰島β細(xì)胞功能的衰退速度進(jìn)行抑制。因此，早發(fā)現(xiàn)、早治療十分關(guān)鍵。該研究結(jié)果顯示，單獨(dú)進(jìn)行胰島自身抗體時，檢測陽性率均未超過50%；生化指標(biāo)檢測結(jié)果顯示，LADA患者的空腹及餐后2 h血糖水平明顯有別于2型糖尿病患者。基于此，將兩種檢測方式聯(lián)合使用，有助于提高檢測準(zhǔn)確率。