精液各項(xiàng)參數(shù)與精液不液化不育患者DFI的關(guān)系研究

李迎歌

河南省洛陽(yáng)市婦幼保健院男科實(shí)驗(yàn)室 471000

精液不液化不育約占男性不育的42.65%以上，是造成男性不育的重要因素之一，是影響夫妻與家庭生活和諧的社會(huì)問(wèn)題。精液常規(guī)檢測(cè)是對(duì)男性不育診斷的主要生理指標(biāo)，但臨床研究發(fā)現(xiàn)，精液常規(guī)參數(shù)正常者中約有15%者為不育，難以對(duì)男性生育能力做出全面評(píng)判，臨床應(yīng)用受到一定限制[1-2]。精子脫氧核糖核酸(Deoxyribonucleic acid，DNA)損傷涉及胚胎發(fā)育、受精率、妊娠率、種植率、流產(chǎn)率等生育有關(guān)的各個(gè)階段[3]。精子DNA碎片(DNA fragmentation index，DFI)檢測(cè)是一項(xiàng)能對(duì)精液質(zhì)量做出判斷并預(yù)測(cè)生育能力的新型評(píng)價(jià)手段，逐漸應(yīng)用于臨床。為此，本研究選擇2018年1月—2019年12月就診于我院的60例精液不液化不育患者為研究對(duì)象，并選擇同期60例近期有正常健康生育史男性作為對(duì)照，旨在分析精液各項(xiàng)參數(shù)與精液不液化不育患者DFI的關(guān)系。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2018年1月—2019年12月就診于我院的60例精液不液化不育患者，設(shè)為試驗(yàn)組，年齡21～44歲，平均年齡(30.59±4.32)歲；不育時(shí)間2～5年，平均不育時(shí)間(3.28±0.32)年。選擇同期在我院體檢的60例近期有正常健康生育史男性為對(duì)照組，年齡23～45歲，平均年齡(31.05±4.27)歲。兩組基本資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，存在可比性。

1.2 入選標(biāo)準(zhǔn) (1)納入標(biāo)準(zhǔn)：身體健康；體格檢查正常；生殖器、睪丸、男性性征、生殖器、附屬性腺、附睪發(fā)育正常；認(rèn)知功能正常；簽署知情同意書；Y染色體長(zhǎng)臂的無(wú)精子因子(AZF)微缺失檢測(cè)正常；染色體檢查為正常核型(46，XY)；正常性生活1年以上且未行避孕措施。(2)排除標(biāo)準(zhǔn)：女方因素致不孕；精神異常；惡性腫瘤；肝腎等重要臟器功能不全；自身免疫系統(tǒng)疾病；傳染性疾病。

1.3 方法

1.3.1 精子形態(tài)分析：入組患者均禁欲72h，將小便排凈，陰莖與雙手潔凈后，對(duì)尿道口使用新潔爾滅溶液消毒，以手淫法收集精液。使用以色列SQA-Ⅴ型精子常規(guī)自動(dòng)分析系統(tǒng)檢測(cè)精液濃度、液化狀態(tài)、正常形態(tài)率等，并實(shí)施雙檢測(cè)人員單份標(biāo)本重復(fù)測(cè)定校正和人工檢測(cè)雙重校正。正常精子判定標(biāo)準(zhǔn)：精子寬2～3μm，長(zhǎng)3～5μm，頭部呈光滑卵圓形，頂體占頭部40%～70%，頭寬為頭長(zhǎng)2/3～3/5；中部與頭縱軸成一直線，且須細(xì)長(zhǎng)；中部寬≤1μm，與頭寬的1/2相近；尾部(末段、主段)長(zhǎng) 45μm，必須無(wú)卷曲現(xiàn)象，規(guī)則的，稍細(xì)于中部。若存在胞漿小滴，須≤頭部的1/2。臨界形態(tài)精子、頭部空泡、不規(guī)則頭、梨形頭、圓形頭、長(zhǎng)形頭、頂體過(guò)大或過(guò)小、尾連接異常、彎折(超過(guò)90°)、卷曲均視為異常。

1.3.2 DFI檢測(cè)：取3ml精液待測(cè)樣本，以精子染色質(zhì)結(jié)構(gòu)分析法(Sperm chromatin structure assay，SCSA)檢測(cè)DFI。用A液稀釋至100μl，終濃度為(1～2)×106/ml的精子細(xì)胞，滴加B液200μl，30s后加入C液600μl，流失細(xì)胞儀分析。以DFI表示DNA的完整性。

1.4 觀察指標(biāo) (1)對(duì)比兩組受檢者精液參數(shù)差異，即正常形態(tài)率、向前活動(dòng)精子、精子密度、DFI。(2)分析DFI與正常形態(tài)率、向前活動(dòng)精子、精子密度相關(guān)性。

2 結(jié)果

2.1 精液參數(shù) 試驗(yàn)組正常形態(tài)率、向前活動(dòng)精子、精子密度低于對(duì)照組，DFI高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組精液參數(shù)對(duì)比

2.2 DFI與正常形態(tài)率、向前活動(dòng)精子、精子密度相關(guān)性 DFI與正常形態(tài)率、向前活動(dòng)精子、精子密度相關(guān)性均呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)。見表2。

表2 DFI與正常形態(tài)率、向前活動(dòng)精子、精子密度相關(guān)性分析

3 討論

一般情況下，男性精液射出體外時(shí)處于液化狀態(tài)，并在短時(shí)間內(nèi)凝固呈凝塊狀或膠凍狀，10～30min后會(huì)逐漸液化成水樣液體，屬于正常生理現(xiàn)象。當(dāng)精液排出體外60min以上仍不液化，即為精液不液化，屬于病理情況。男性精液不液化可對(duì)精子的運(yùn)動(dòng)形成束縛，降低精子運(yùn)動(dòng)速度，呈原地?cái)[動(dòng)或緩慢移動(dòng)，導(dǎo)致精子授精能力受到顯著影響，是造成男性不育的主要因素之一，其發(fā)生與前列腺炎、精囊炎、病原微生物感染、缺乏微量元素以及焦慮、抑郁、恐懼等不良心理有關(guān)[4-5]。若能準(zhǔn)確、有效鑒別診斷男性精液不液化，對(duì)指導(dǎo)臨床及時(shí)實(shí)施針對(duì)性的干預(yù)措施至關(guān)重要。精液常規(guī)檢查是臨床對(duì)男性生育能力評(píng)估的主要方式，但僅能對(duì)精子形態(tài)、活力、數(shù)量做出初步判斷，無(wú)法提供精子功能相關(guān)的有效信息，臨床應(yīng)用具有局限性[6-7]。

DFI是評(píng)估精子質(zhì)量的有效生物指標(biāo)，是造成精子受精能力下降的主要因素，對(duì)妊娠結(jié)局與胚胎質(zhì)量會(huì)造成負(fù)面影響。本文中，試驗(yàn)組正常形態(tài)率、向前活動(dòng)精子、精子密度低于對(duì)照組，DFI高于對(duì)照組，提示男性精液不液化不育患者正常形態(tài)率、向前活動(dòng)精子、精子密度明顯下降，而DFI顯著提高。DFI與正常形態(tài)率、向前活動(dòng)精子、精子密度相關(guān)性均呈負(fù)相關(guān)，提示DFI與男性精液不液化不育發(fā)生密切相關(guān)。精子DNA屬于人類異常物質(zhì)的載體，其完整性是受精、發(fā)育的重要前提[8-9]。DFI是多種因素共同作用引起的結(jié)果，是指精子生成、成熟過(guò)程中損害DNA完整性所產(chǎn)生的斷裂碎片，可涉及生育各個(gè)環(huán)節(jié)，如受精、著床、胚胎存活等，目前尚不十分清楚其產(chǎn)生機(jī)制，可能與以下幾點(diǎn)有關(guān)：(1)精子發(fā)生過(guò)程中，精子染色質(zhì)重建期間會(huì)產(chǎn)生DNA鏈斷裂；(2)精子產(chǎn)生過(guò)程中細(xì)胞異常凋亡；(3)精子經(jīng)附睪、曲細(xì)精管轉(zhuǎn)運(yùn)期間，氧自由基損傷會(huì)誘發(fā)DNA片段化；(4)環(huán)境毒物損傷；(5)內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶和半胱天冬酶誘發(fā)DNA片段化[10-12]。本研究使用SCSA檢測(cè)DFI，能準(zhǔn)確、穩(wěn)定的反映DNA損傷的真實(shí)狀態(tài)。

綜上所述，男性精液不液化不育患者精液參數(shù)與DFI明顯異常，正常形態(tài)率、向前活動(dòng)精子、精子密度與DFI存在負(fù)相關(guān)性，檢測(cè)DFI可對(duì)男性生育能力進(jìn)行評(píng)估。