李美雎,劉 葉,尚 軍,陳海娟
(青海師范大學生命科學學院,青海 西寧 810008)
羌活為傘形科植物羌活(Notopterygiumincisum)或寬葉羌活(Notopterygiumforbesii)的干燥根莖和根。性味與歸經:辛、苦,溫,歸膀胱、腎經。功能與主治:散寒、驅風除濕、止痛。用于風寒感冒,頭痛項強,風濕痹痛,肩背酸痛[1]。羌活化學成分復雜,主要含有香豆素、揮發油、甾醇、氨基酸、有機酸等[2~7]。其中羌活含有2個活性成分falcarindiol(鐮葉芹二醇)和phenethyl ferulate(苯乙基阿魏酸酯),對金黃色葡萄球菌有明顯的抗菌活性[8,9]。
實驗通過天然藥物體外抗菌活性篩選方法,篩選出羌活抗菌活性部位,并以金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、產氣桿菌(Enterobacteraerogenes)、大腸桿菌(Escherichiacoli)、變形桿菌(Proteusvulgaris)、陰溝腸桿菌(Enterobactercloacae)、銅綠假單胞菌(Pseudomonasaeruginosa)、糞腸球菌(Enterococcusfaecalis)評價不同產地羌活抗菌活性,以期為羌活抗菌活性藥物開發提供基礎數據。
1.1.1 儀器 隔水恒溫培養箱、可調微量移液器(1 000 μL、200 μL、50 μL)、超聲波清洗器 (SB-5200TDT)、立式壓力蒸汽滅菌鍋(LS-35HD)、無菌操作臺、臺式低速離心機(TD5A)。
1.1.2 藥品與藥材 取采挖于青海省紅軍溝、松多、久治、大通、互助等地的羌活藥材,將其粉碎后過60目篩,密閉保存,備用。陽性藥物青霉素鈉購買于中諾藥業(石家莊)有限公司。
1.1.3 實驗菌株 金黃色葡萄球菌、產氣桿菌、大腸桿菌、變形桿菌、陰溝腸桿菌、銅綠假單胞菌、糞腸球菌這7株用于羌活活性部位篩選和抗菌活性比較的指示菌均來自于中國普通微生物菌種保藏中心,于-20 ℃低溫冰箱凍存,實驗前3~4 h復活使用。
1.2.1 羌活抑菌活性部位制備 將羌活藥材粉碎,過60目篩,以料液比1∶8,用無水乙醇超聲提取2 h,共3次,過濾,合并濾液,減壓濃縮,得羌活粗提取物浸膏。……