溶菌酶牙膏美白牙齒的臨床試驗研究

徐天生 褚夫江 耿帥峰

(1.好易康生物科技(廣州)有限公司，廣東 廣州 510700；2.廣東藥科大學，廣東廣州 510006)

牙齒表面存在多種細菌群體，形成細菌性生物膜[1]，其表面分泌許多黏性物質，日常飲食如喝茶、飲咖啡、吸煙等外源性色素常粘附在這些黏性物質上，逐步使牙齒表面變黃或變黑，形成色斑，不僅影響美觀，對患者的容貌、心理和生活帶來諸多不利影響，又能引起牙體組織和牙周組織的疾病。目前市面上去除牙齒外源性色素的牙膏主要通過三種途徑起效。第一種為物理美白法，使用高清潔類磨料美白牙齒，其機理是通過增強磨料與牙齒表面的磨擦，從而去除色素，但該方法為較為單一的物理去除方法，能起到一定的功效，但效果往往在復配化學美白物會更佳，例如復配磷酸鹽類化合物，協同增效。第二種為化學美白法，主要通過使用磷酸鹽類化合物和過氧化物類化合物美白牙齒，磷酸鹽類化合物作用機理是通過磷酸根抑制生物膜的形成，從而抑制色素的附著，同時絡合鈣離子，進一步降低茶漬、咖啡漬等色素吸附到牙齒表面的概率；過氧化物類化合物的作用機理是通過過氧化物的強氧化性，氧化去除色素。胡德渝等人研究了含有磷酸鹽、氟化鈉和高清潔二氧化硅的牙膏去除外源性色斑的八周效果，結果可以有效減少外源性色斑[2]。趙曉一等人研究了一種含過氧化物的美白牙膏對外源性色素的去除效果，結果在一定程度上可以去除外源性色素，并且與使用時間成正相關[3]。第三種為生物美白法，以應用酶技術為主，酶是一種安全、高活性生物制劑，近年來，已被逐漸應用于許多牙膏產品，起殺菌消炎、防齲齒、減輕牙齦出血、美白等作用，但目前應用的報告較少。李娜等人研究了右旋糖酐酶、月桂醇硫酸鈉和檸檬酸鋅抑制牙齒色斑附著效果，結果為右旋糖酐酶有一定的效果，但是沒有同比的檸檬酸鋅溶液效果好[4]。

溶菌酶(Lysozyme)是唾液中的一種非特異性物質成分，可以抑制微生物生長，與抗生素或其他抑菌物質對比，長期使用溶菌酶不易出現抗藥性[5]。溶菌酶能有效地水解細菌細胞壁的肽聚糖，其水解位點是N-乙酰胞壁酸(NAM)的1位碳原子和N-乙酰葡萄糖胺(NAG)的4位碳原子間的β-1.4糖苷鍵。肽聚糖是細菌細胞壁的主要成份，它是由NAM、NAG和肽“尾”(一般是4個氨基酸)組成，NAM與NAG通過β-1.4糖苷鍵相連，肽“尾”則是通過D-乳酰羧基連在NAM的第3位碳原子上，肽尾之間通過肽“橋”(肽鍵或少數幾個氨基酸)連接，NAM、NAG、肽“尾”與肽“橋”共同組成了肽聚糖的多層網狀結構，作為細胞壁的骨架，上述結構中的任何化學鍵斷裂，皆能導致細菌細胞壁的損傷[6]。

基于溶菌酶有良好的溶菌能力，是人體唾液中的成分之一，具有天然，安全的特性，可以有效溶解牙菌斑中的細菌，瓦解牙菌斑的構造從而使其易于被清除，進而達到美白牙齒的功效。著重研究含我司特制溶菌酶的牙膏在去除牙齒外源性色素上的功效情況。

1 方法

1.1 病例選擇

本研究采用隨機、平行對照、雙盲的臨床研究方法。篩選80例符合納入標準、不屬排除標準的受試者。

納入標準：①同意參加本臨床試驗并簽署書面知情同意書者；②身體健康，年齡在18周歲～65周歲(含18周歲和65周歲)，性別不限，對市售口腔產品或化妝品無過敏史；③口內有12顆天然前牙，且無大面積的充填或冠等修復體；④牙齒有外源性色斑存在。

排除標準：①已知或懷疑對試驗藥及其輔料由過敏史或嚴重不良反應，或過敏體質者；②受試者有嚴重的口腔疾病、慢性病；③目前正參加其他的臨床試驗；④正在進行正畸治療或戴有可摘式局部義齒；⑤有晚期的牙周疾病；⑥妊娠或準備妊娠婦女，哺乳期婦女。

1.2 試驗方法

本試驗采用隨機雙盲平行對照設計方法，受試者在基線、使用4周、使用8周回訪進行口腔情況評估。

1.2.1 試驗分組：篩選80例符合要求的受試者，試驗組和對照組各40例。

1.2.2 盲法：采用同樣白色管進行包裝。兩組牙膏在外觀上一致，用不同的編號區分。牙膏編號由Microsoft Excel軟件“=Rand()”函數方法得到的隨機數字產生。

1.2.3 牙膏：試驗組牙膏為好易康生物溶菌酶牙膏；對照組為不含生物溶菌酶普通牙膏。

1.2.4 使用方法

整個實驗期間要求受試者只能用提供的牙膏和牙刷刷牙，根據醫生知道的方法每天進行口腔護理，不得使用其他牙膏、牙刷或口腔衛生用品，如漱口水、牙線等。受試者均發給同樣的軟毛牙刷。要求受試者每天刷牙兩次(早晚各1次)，每次刷牙至少3分鐘，每次刷牙擠約1cm長牙膏。并要求受試者保持平時日常飲食、飲茶、喝咖啡及吸煙等習慣。臨床檢查于基線、第4周及第8周進行，并由同一名檢查者完成。

1.3 評價指標

牙齒色斑采用Lobene色斑指數(Lobene stain index method)進行評價，用0～3數字來評價牙面色斑面積和色斑程度，如表1。

表1 Lobene色斑指數計分原則

檢查牙位為下頜前牙的唇、舌面及上頜前牙的唇面。每個牙面色斑指數計分為該牙面的色斑面積計分和色斑程度計分的乘積。每個受試者的色斑指數計分為各牙面色斑指數計分的平均值，即：

1.4 統計方法

采用SPSS統計軟件進行統計分析。所有統計推斷均采用雙側檢驗，具有統計學意義的檢驗水準定為0.05，參數的置信區間估計采用95%置信區間。

2結果

80例受試者參與試驗，其中3人失訪，中途退出試驗(試驗組2例，對照組1例)。完成試驗的77例受試者中有6例與方案偏離，這6例參與人口學資料分析、安全性分析，不參與療效指標分析，其中試驗組2例，對照組4例。

2.1 兩組基線比較

80例受試者參與試驗，77例受試者完成試驗，試驗組38例，對照組39例。所有參與試驗的受試者未發現由牙膏引起不良反應或嚴重事件。研究人群基本信息如表2以及基線期療效指標如表3。

表2 研究人群的基線檢查情況

表3 試驗組和對照組療效指標基線期分布情況(n=40)

基線期試驗組與對照組相比較，牙齒色斑指數不具有顯著性差異(P>0.05)。

2.2 臨床效果

表4 基線、4周、8周色斑指數比較

基線檢查中，試驗組和對照組間無統計學差異。4周后，試驗組牙齒色斑指數明顯低于對照組，相對于對照組色斑指數減少了51.04%，且具有統計學差異(P<0.05)；8周后，試驗組牙齒色斑指數顯著低于對照組，相對于對照組色斑指數減少了76.03%，且具有統計學差異(P<0.05)。

2.3 依從性

80例受試者參與試驗，77例完成試驗，有4例未按要求使用牙膏，其中對照組2例，試驗組2例。對照組依從性為94.87%，試驗組依從性為94.74%。有4例受試者訪視超窗，對比4例受試者的療效指標數據進行了剔除前后的統計分析，發現剔除后與剔除前的統計結論一致

2.4 臨床安全性分析

完成試驗的77例受試者中發生不良事件4例、嚴重事例0例，其中對照組4例，試驗組0例。經分析評價，此4例不良事件與所使用牙膏可能無關。

3 討論

3.1 臨床試驗顯示:基線檢查中，試驗組和對照組間無統計學差異。4周后，試驗組牙齒色斑指數明顯低于對照組，相對于對照組色斑指數減少了51.04%，且具有統計學差異(P<0.05)；8周后，試驗組牙齒色斑指數顯著低于對照組，相對于對照組色斑指數減少了76.03%，且具有統計學差異(P<0.05)。因此，好易康生物溶菌酶牙膏與不含溶菌酶的普通牙膏相比， 具有去除牙齒外源性色斑的效果，使用簡單方便，有良好的臨床適用性。

3.2 溶菌酶作為一種天然蛋白質，存在于人的眼淚、唾液和乳汁中[7]，安全性高，對人體無毒性，也不會在體內殘留。隨著社會的不斷進步以及人們對健康生活的追求越來越高的今天，我們從最初的疾病治療，亦已慢慢轉變為對疾病的預防，所以倡導綠色、安全的功效物質是社會發展所趨，相信生物溶菌酶的應用前景是相當廣闊的。