分析酶聯(lián)免疫法篩查人類免疫缺陷病毒抗體在艾滋病診斷中的應(yīng)用

羅大泉

【摘要】目的 以膠體金法作為對照，分析采用酶聯(lián)免疫法（ELISA）對人類免疫缺陷病毒（HIV）抗體進(jìn)行篩查對艾滋病診斷的價值。方法 回顧性分析2020年1月至2020年12月我市645例艾滋病高危且疑似感染的受檢者的臨床資料，采集645例受檢者的血液標(biāo)本分別進(jìn)行ELISA、膠體金法檢測，并以蛋白印跡檢測法作為金標(biāo)準(zhǔn)，對比分析ELISA、膠體金法檢測HIV抗體在艾滋病診斷中的價值。結(jié)果 在645例受檢者中，采用蛋白印跡檢測法最終確認(rèn)共有54例HIV抗體陽性患者，檢出率為8.37%（54/645）;膠體金法共檢出HIV抗體陽性患者45例，檢出率為6.98%（45/645）;ELISA共檢出HIV抗體陽性患者52例，檢出率為8.06%（52/645）;與膠體金法比較，ELISA檢出率明顯升高（X2=4.960，P=0.026）。與膠體金法比較，ELISA準(zhǔn)確度、敏感度、特異度、陽性預(yù)測值以及陰性預(yù)測值均升高（P<0.05）。結(jié)論 ?采用ELISA進(jìn)行HIV抗體篩查可提升檢出率，與膠體金法比較，其敏感度、特異度、準(zhǔn)確度等指標(biāo)均升高，是診斷艾滋病較有效的方法。

【關(guān)鍵詞】人類免疫缺陷病毒;篩查;酶聯(lián)免疫法;艾滋病;診斷

艾滋病是由人類免疫缺陷病毒（HIV）引發(fā)的一種慢性免疫性疾病，其具有較強(qiáng)的傳染性，HIV進(jìn)入人體后，將與免疫細(xì)胞結(jié)合并快速、大量的復(fù)制，從而導(dǎo)致患者免疫系統(tǒng)遭到嚴(yán)重破壞，進(jìn)而降低其機(jī)體各項(xiàng)功能。HIV感染過程中患者將經(jīng)歷急性期、潛伏期和艾滋病期三個時期，急性期患者癥狀與感冒類似，具有較強(qiáng)的隱匿性，并不容易被察覺，過后就是處于較長的潛伏期，盡管該時期患者無明顯的癥狀，但HIV仍然存在于各種體液中，同樣具較強(qiáng)的傳染性，因此為了阻斷艾滋病的擴(kuò)散，進(jìn)行HIV篩查是很有必要的。HIV抗體篩查是艾滋病診斷中常用的方式，其可以作為判斷個體是否感染艾滋病的依據(jù)，為了加強(qiáng)對我市艾滋病的防控工作，本研究通過分析酶聯(lián)免疫法（ELISA）篩查HIV抗體的有效性，以為艾滋病的診斷提供依據(jù)。

1資料與方法

1.1臨床資料

回顧性分析2020年1月至2020年12月我市645例艾滋病高危且疑似感染的受檢者的臨床資料，納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）所有患者存在艾滋病高危風(fēng)險;（2）疑似被感染;（3）為合并其他傳染性疾病，如肺結(jié)核等。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）合并惡性腫瘤患者;（2）伴有機(jī)體嚴(yán)重感染患者;（3）合并血液系統(tǒng)疾病患者;（4）存在認(rèn)知功能障礙或者精神系統(tǒng)疾病患者;（5）臨床資料不完整者。645例受檢者中，男294例，女351例;年齡10-87歲，平均（57.44±3.52）歲。

1.2方法

收集645例受檢者的晨起空腹靜脈血5ml，以3000r/min的轉(zhuǎn)速離心10 min，分離上層血清，所有血液樣本分別采用ELISA（試劑來源：北京萬泰）、膠體金法（試劑來源：英科新創(chuàng)）進(jìn)行HIV抗體篩查，所有操作嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行，并將645例血液樣本送至百色市疾病預(yù)防控制中心采用蛋白印跡檢測法進(jìn)行結(jié)果統(tǒng)一復(fù)核，最終確定患者是否感染HIV。

1.3觀察指標(biāo)

分別分析三種方法的HIV抗體檢測結(jié)果，計算645例受檢者的HIV抗體采用三種方法檢測的檢出率，并以蛋白印跡檢測法結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn)，對比分析ELISA、膠體金法的診斷價值（具體指標(biāo)包括檢測方式的準(zhǔn)確度、敏感度、特異度、陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值）。

1.4統(tǒng)計學(xué)處理

采用SPSS22.0統(tǒng)計軟件對問卷及量表數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計。計量資料如年齡組成等采用（ ±s）描述，行t檢驗(yàn)，計數(shù)資料如性別構(gòu)成、檢測方法各指標(biāo)等采用（%）描述，行卡方檢驗(yàn)，檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)設(shè)置為α=0.05。

2結(jié)果

2.1 645例受檢者不同檢測方法HIV抗體檢出率比較

在645例受檢者中，采用蛋白印跡檢測法最終確認(rèn)共有54例HIV抗體陽性患者，檢出率為8.37%（54/645）;膠體金法共檢出HIV抗體陽性患者45例，檢出率為6.98%（45/645）;ELISA共檢出HIV抗體陽性患者52例，檢出率為8.06%（52/645）;與膠體金法比較，ELISA檢出率明顯升高（X2=4.960，P=0.026）。

2.2 ELISA與膠體金法的診斷價值比較

與膠體金法比較，ELISA準(zhǔn)確度、敏感度、特異度、陽性預(yù)測值以及陰性預(yù)測值均升高（P<0.05）。見表1、表2。

3討論

HIV存在與人體的各種體液中，可對人體免疫系統(tǒng)中的CD4 T淋巴細(xì)胞進(jìn)行攻擊，致使該類細(xì)胞失去免疫功能，同時，HIV是一種單鏈RNA病毒，具有較強(qiáng)的不可逆復(fù)制能力，當(dāng)患者病情發(fā)展至艾滋病期將引發(fā)各種并發(fā)癥，直至患者死亡。目前，由于HIV突變率較高，臨床缺乏有效的艾滋病疫苗，一旦個體感染HIV只能通過逆轉(zhuǎn)錄病毒療法減緩HIV的復(fù)制，導(dǎo)致艾滋病死亡率較高，因此對HIV的篩查并加以盡早干預(yù)以控制艾滋病的傳播具有重要的意義。HIV在患者體內(nèi)很難做到被有效清除，絕大多數(shù)患者一旦感染即是終生攜帶，HIV抗體的檢出就意味著HIV病毒的存在，因此進(jìn)行HIV抗體篩查可以作為診斷艾滋病的指標(biāo)。HIV抗體檢測結(jié)果準(zhǔn)確與否直接關(guān)系到艾滋病診斷的正確與否，采用不同的檢測方法以確保HIV抗體檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性已成為臨床難題。

膠體金法用于HIV抗體檢測具有操作簡單、檢測速度快、方便攜帶等優(yōu)勢，已在HIV篩查中逐漸被推廣使用，但該方法對艾滋病的診斷價值還有待進(jìn)一步提高。本研究中，膠體金法的敏感度、特異度以及準(zhǔn)確度等指標(biāo)均低于ELISA檢測，也證實(shí)膠體金法診斷價值并不理想。ELISA是一種將明確的HIV抗原固定于固相載體表面，使其與新加入的酶標(biāo)記HIV抗原及待檢血液樣本發(fā)生反應(yīng)，通過觀察底物是否顯色判定抗體性質(zhì)，并以酶標(biāo)儀測定具體結(jié)果的檢測方法，該方法一方面可以通過酶催化底物反應(yīng)的放大作用，提高抗原抗體反應(yīng)的敏感度，從而可以提高HIV抗體陽性檢出率;另一方面該檢測方法整個檢測過程是在一個封閉的流動系統(tǒng)中進(jìn)行，這可以極大地降低交叉污染，也不受血液樣本中脂血、溶血以及外部溫度等因素的影響，測定結(jié)果準(zhǔn)確、可靠。同時，ELISA檢測無需特殊設(shè)備，對操作環(huán)境也無要求，一次性可檢測多份血液樣本，操作更加方便，檢測效率也更高。此外，相比傳統(tǒng)的檢測方法，ELISA檢測可以更早的發(fā)現(xiàn)HIV早期感染，從而可以縮短艾滋病診斷的窗口期。值得注意的是，與金標(biāo)準(zhǔn)蛋白印跡檢測法結(jié)果比較，ELISA檢測同樣存在一定的假陽性病例，需要通過金標(biāo)準(zhǔn)蛋白印跡檢測法復(fù)核確認(rèn)，說明ELISA檢測也有待完善;同時，ELISA檢測成本相對較高，很難在基層醫(yī)院普及使用。

綜上所述，ELISA檢測用于HIV抗體篩查具有快速、方便的優(yōu)勢，同時可提高檢測的敏感度、特異度以及準(zhǔn)確度，能夠?yàn)榘滩〉脑\斷提供較為可靠的依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

[1]何小清，沈銀忠，張仁芳，等.未啟動抗反轉(zhuǎn)錄病毒治療的人類免疫缺陷病毒/艾滋病患者發(fā)生心血管疾病的風(fēng)險評估[J].中華傳染病雜志，2020，38（10）：640-645.

[2]劉穎，咸慶飛，藍(lán)怡，等.人類免疫缺陷病毒致腸道免疫異常的研究進(jìn)展[J].中華中醫(yī)藥雜志，2020，35（8）：4036-4039.

[3]周瑩瑩，胡榮華，陳鐵龍，等.長鏈非編碼RNA在人類免疫缺陷病毒感染中的作用[J].中華傳染病雜志，2021，39（2）：125-128.

[4]陳麗，唐卓蕓，張可依，等.人類免疫缺陷病毒抗原抗體篩查聯(lián)合免疫印跡或核酸補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)的臨床應(yīng)用[J].華西醫(yī)學(xué)，2020，35（8）：930-935.

[5]王菲菲.溶血對ELISA與化學(xué)發(fā)光免疫檢測HIV抗體的影響[J]. 醫(yī)藥論壇雜志，2019，40（9）：98-100.

[6]杜萍萍，李芳.酶聯(lián)免疫吸附測定與免疫印跡試驗(yàn)檢測人類免疫缺陷病毒抗體的差異性分析[J].實(shí)用臨床醫(yī)藥雜志，2020，24（13）：13-15，19.

[7]羅慧景，李晶，范文成，等.兩種早期診斷嬰兒HIV-1感染方法的一致性評價[J]中國艾滋病性病，2015，4（21）：280-283.