江西九嶺山保護區毒蘑菇一新記錄種

穆新華 涂磊 吳小冬 趙寬

摘 要：通過詳細的外部形態觀察、內部顯微結構比對以及分子系統發育分析相結合的方法，鑒定出江西九嶺山國家級自然保護區毒蘑菇的一個新記錄種——日本紅菇（Russula japonica）。該種的鑒別特征為菌蓋乳白色，漏斗狀;菌肉潔白厚實，傷不變色;菌柄白色，圓柱形，向下漸細;孢子淡黃色，近球形，具刺，淀粉質。

關鍵詞：日本紅菇;毒蘑菇;新記錄種;九嶺山

紅菇屬是常見的外生菌根菌[1-4]，全球已知約有800個物種[5]，我國已報道160余種[6-7]，江西省已報道35種[8]。菌根菌在森林生態系統中，對于水分、碳素以及其他養分轉化和能量循環起著重要作用[9]。另外，紅菇屬真菌多數可食用，如正紅菇（R.vinosa）、美味紅菇（R.delica）在全國各地被廣泛食用，味道鮮美，富含蛋白質、脂肪酸、維生素等營養成分[10]。該屬也不乏毒菇，如亞稀褶紅菇（R.subnigricans），中毒事件時有發生[11]。同時，部分紅菇屬真菌，如血紅菇（R.sanguinea）、毒紅菇（R.emetica）則具有一定的藥用價值，具有抗腫瘤、抗病毒和促進免疫等功效[12]。

本文發現并描述了江西九嶺山國家級自然保護區（下稱九嶺山保護區）紅菇屬真菌一新記錄種——日本紅菇（Russula japonica），該物種為毒蘑菇，2020年被當地群眾誤食導致胃腸炎型中毒，患者在靖安縣中醫院就診后，因病情輕微自愈。

1 材料與方法

1.1 供試標本

標本于2020年10月采集于九嶺山保護區，拍攝新鮮標本生境照片，采樣時盡量保證其完整性。詳細記錄標本形態特征及生境后，將其放置于烘箱中，60 ℃烘干，經干燥后保存于中國科學院昆明植物研究所隱花植物標本館，同時保存與之配套的硅膠干燥材料，用于分子實驗。

1.2 研究方法

1.2.1 形態學鑒定

標本的外部形態特征根據野外發現的子實體觀察記錄，包括采集地點、生境特點、采集時間以及子實體各部位結構的特征等。

標本的內部顯微特征依據對烘干標本的徒手切片觀察，使用5%的氫氧化鉀溶液為載浮劑，在顯微鏡下放大100倍（油鏡）下觀察得到。分別隨機選取30個孢子和擔子進行測量，記錄其形狀、大小和顏色等。

1.2.2 分子系統學研究

采用生工生物工程（上海）股份有限公司生產的Ezup柱式真菌基因組DNA抽提試劑盒對硅膠干燥的分子材料進行DNA提取。在查閱相關的文獻資料和進行預實驗的基礎上[13-15]，本研究選用ITS4/ITS5引物對內轉錄間隔區（ITS）序列進行擴增。擴增產物經凝膠電泳檢測后送往生工生物工程（上海）股份有限公司進行測序。將測得的ITS序列采用BioEdit v7.0.9打開檢查序列峰形圖，核對堿基是否讀取正確，同時采用NCBI的在線軟件BLAST對所得序列與GenBank數據庫中的序列進行比對，以確保所得序列與研究對象相互對應，并按照BLAST比對結果選取重建系統發育樹的基因序列。采用MEGA v7.0以最大似然法（Maximum Likelihood）和鄰接法（Neighbor joining）進行系統發育分析，經1 000次重復獲得統計學支持[16-18]。

2 結果與分析

2.1 形態特征

日本紅菇（Russula japonica），子實體中到大型，菌蓋6～14 cm，初半球形，后呈漏斗狀，邊緣無條紋;乳白色，表面光滑，潮濕時略黏，常伴有淡黃色至褐色的污漬。菌褶近離生，密集，幼嫩時乳白色，成熟后淡赭色，有小菌褶。菌柄圓柱形，中生，長4～6 cm，粗1.5～2 cm，由上至下漸細，基部不膨大，內部白色，海綿質。孢子長5.5～7.5 μm，寬5.0～7.0 μm，淡黃色，近球狀，表面具刺，淀粉質。擔子長30～45 μm，寬7.0～11 μm，長棒狀，具4小梗。模式產地為日本，夏秋季散生或群生于闊葉林地上，分布于日本[19]、中國[20]。研究標本于2020年10月10日采于江西宜春、九嶺山保護區海拔300 m處。

2.2 分子系統發育分析

采自江西的標本ITS序列通過GenBank數據庫中BLAST序列比對，與Russula japonica序列同源性達97%。運用MEGA 7.0軟件，以最大似然法（Maximum Likelihood）和鄰接法（Neighbor Joining）構建系統發育樹，結果表明，兩種方法建立的系統發育樹型非常接近，圖2為采用最大似然法建立的系統發育樹。系統發育分析結果顯示，采自江西的標本與Russula japonica聚在同一分枝上，支持率為99%。

3 結論

結合形態特征比對和分子系統發育分析的結果，最終確定本研究采集的標本（HKAS 105290）為日本紅菇（Russula japonica），可導致腸胃型中毒。其與可食用的白乳菇（Lactarius piperatus）形態特征十分相似而容易被誤食，但后者傷后泌出白色乳液、味辣[21-25]。建議在當地開展較廣泛的科普宣傳教育，提升群眾食品安全認知，同時避免蘑菇中毒事件的發生。

參考文獻

[1]李國杰，李賽飛，趙東，等.紅菇屬研究進展[J].菌物學報，2015，34（5）：821-848.

[2]LOONEY B P，RYBERG M，HAMPE F，et al.Into and out of the tropics： global diversification patterns in a hyperdiverse clade of ectomycorrhizal fungi[J].Molecular Ecology，2016，25（2）：630-647.

[3]溫祝桂，陳亞華.中國外生菌根真菌研究進展[J].生物技術通報，2013，4（2）：22-30.

[4]BUYCK B，ZOLLER S，HOFSTETTER V.Walking the thin line… ten years later： the dilemma of above-versus below-ground features to support phylogenies in the Russulaceae （Basidiomycota）[J].Fungal Diversity，2018，89（1）：267-292.

[5]楊智，王華偉，沙濤.外生菌根真菌的研究進展[J].中國食用菌，2016，35（1）：1-7.

[6]李國杰，鄧春英，史路瑤，等.中國紅菇屬乳菇狀亞組的三個新種[J].菌物學報，2020，39（4）：618-636.

[7]姜旭萌，李楊坤，梁俊峰，等.中國紅菇屬2個新記錄種[J].福建農林大學學報（自然科學版），2017，46（1）：103-108.

[8]張俊波，宋海燕，胡殿明.江西大型真菌名錄調查初報[J].生物災害科學，2016，39（1）：1-13.

[9]楊云禮，徐明，鄒曉，等.我國南方地區外生菌根真菌研究進展[J].西部林業科學，2019，48（5）：131-142.

[10]戴玉成，周麗偉，楊祝良，等.中國食用菌名錄[J].菌物學報，2010，29（1）：1-21.

[11]LI H，ZHANG H，ZHANG Y，et al.Mushroom Poisoning Outbreaks—China， 2019[J].China CDC Weekly，2020，2（2）：19-24.

[12]趙永勛，吳晶.紅菇屬真菌研究進展[J].林業科技，2012，37（2）：47-49.

[13]ODA T，TANAKA C，TSUDA M.Molecular phylogeny of Japanese Amanita species based on nucleotide sequences of the internal transcribed spacer region of nuclear ribosomal DNA[J].Mycoscience，1999，40（1）：57-64.

[14]王向華.紅菇科可食真菌的若干分類問題[J].菌物學報，2020，39（9）：1617-1639.

[15]LEE H，PARK M S，Jung P E，et al.Re-evaluation of the taxonomy and diversity of Russula section Foetentinae （Russulales， Basidiomycota） in Korea[J].Mycoscience，2017，58（5）：351-360.

[16]趙寬，方潔鈺，曾青青.江西省毒蘑菇新記錄種：赤腳鵝膏[J].江西科技師范大學學報，2020，4（6）：85-88.

[17]馮云利，馬明，岳萬松，等.云南市場易混淆紅菇的系統發育分析[J].中國食用菌，2020，39（11）：78-82.

[18]LI G J，ZHAO R L，ZHANG C L，et al.A preliminary DNA barcode selection for the genus Russula （Russulales， Basidiomycota）[J].Mycology，2019，10（2）：61-74.

[19]李玉，李泰輝，楊祝良，等.中國大型菌物資源圖鑒[M].鄭州：中原農民出版社，2015.

[20]霍光華，顏俊清，張林平，等.江西大型真菌圖鑒[M].南昌：江西科學技術出版社，2020.

[21]圖力古爾，包海鷹，李玉.中國毒蘑菇名錄[J].菌物學報，2014，33（3）：517-548.

[22]張漢武，宋文霞.甘肅常見毒蘑菇及其中毒類型[J].食用菌，2017，39（4）：17-19.

[23]宋相金，黃秋菊，宋斌，等.車八嶺自然保護區大型食藥用菌及毒菇資源調查[J].食用菌，2018，40（2）：24-28.

[24]王和，徐康平，譚桂山.乳菇屬真菌研究概況[J].中南藥學，2018，16（4）：504-512.

[25]高曉燁，方潔鈺，溫怡琳，等.江西省大型真菌多樣性研究現狀[J].食藥用菌，2020，28（3）：166-169.