Tim-3血清水平對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎疾病進(jìn)展與免疫功能的影響

鄒曉軍

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎是臨床較為常見(jiàn)的自身免疫性疾病，其常常合并有間質(zhì)性肺炎以及慢性心功能不全[1]，臨床特征主要包括滑膜炎性反應(yīng)以及增生。研究發(fā)現(xiàn)，類風(fēng)濕性疾病的進(jìn)展與機(jī)體的T細(xì)胞活化顯著相關(guān)[2]。T細(xì)胞免疫球蛋白及黏蛋白域分子-3（T cell immunoglobulin and mucin-domaincontaining molecule-3，Tim-3）是機(jī)體重要的負(fù)性共刺激性分子，主要在患者的Th1細(xì)胞中表達(dá)，與機(jī)體的半乳糖凝集素（Galectin9）共同參與適應(yīng)性負(fù)性調(diào)節(jié)的免疫調(diào)節(jié)作用[3，4]。多種動(dòng)物模型研究發(fā)現(xiàn)[5]，在自身免疫性疾病的進(jìn)展中，通過(guò)對(duì)Tim-3/Galectin9信號(hào)通路的顯著性激活，誘導(dǎo)Th17的顯著凋亡，刺激T細(xì)胞的增殖，維持T細(xì)胞的平衡，進(jìn)一步對(duì)Th1/Tc1平衡進(jìn)行調(diào)控[6]。但是目前對(duì)于類風(fēng)濕性疾病的進(jìn)展與血清學(xué)Tim-3之間的相關(guān)性研究較少[7]。本研究主要分析Tim-3血清水平對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎疾病進(jìn)展與免疫功能的影響，為臨床提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 一般資料本研究采取前瞻性研究，選取我院2017年2月～2021年2月收治的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者120例作為研究對(duì)象，其中男69例，女51例，年齡31～69歲，平均（59.11±1.09）歲，根據(jù)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者病情評(píng)價(jià)（DAS28評(píng)分）[8]，其中低度活動(dòng)患者41例，中度活動(dòng)患者35例，高度活動(dòng)患者44例。另選取同期進(jìn)行健康體檢的志愿者120例作為對(duì)照組，兩組一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見(jiàn)表1。患者均簽署知情同意書(shū)，且本研究經(jīng)倫理委員會(huì)論證通過(guò)。

表1 兩組患者的一般資料比較

患者入選標(biāo)準(zhǔn)：①符合類風(fēng)濕的診斷標(biāo)準(zhǔn)[9]；②均知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：①肝腎功能異常；②其他自身免疫性疾病；③精神或認(rèn)知功能障礙；④合并惡性腫瘤等。

1.2 研究方法對(duì)所有研究對(duì)象肘靜脈采血4ml，采用酶聯(lián)免疫法對(duì)患者的Galectin9水平進(jìn)行檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)試劑來(lái)自上海羅氏，操作流程嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū) 進(jìn)行。

1.3 觀察指標(biāo)①比較兩組患者的CD4+Tim-3、CD8+Tim-3水平。②比較不同嚴(yán)重程度患者的CD4+Tim-3、 CD8+Tim-3水平。③比較兩組CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平。④比較不同嚴(yán)重程度患者的CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平。⑤分析CD4+Tim-3、CD8+Tim-3與CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水 平以及疾病進(jìn)展的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法數(shù)據(jù)均采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行匯總分析。其中計(jì)量資料以±s表示，采用t檢驗(yàn)或者方差分析，計(jì)數(shù)資料以率表示，采用卡方檢驗(yàn)，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者的CD4+Tim-3、CD8+Tim-3水平比較觀察組患者的CD4+Tim-3、CD8+Tim-3顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表2。

表2 兩組患者的CD4+Tim-3、CD8+Tim-3水平比較

2.2 不同嚴(yán)重程度患者的CD4+Tim-3、CD8+Tim-3水平比較不同嚴(yán)重程度患者的CD4+Tim-3、CD8+Tim-3水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），經(jīng)過(guò)兩兩比較，隨著疾病進(jìn)展，患者的CD4+Tim-3、CD8+Tim-3水平顯著升高，見(jiàn)表3。

表3 不同嚴(yán)重程度患者CD4+Tim-3、CD8+Tim-3水平比較

2.3 兩組患者的免疫功能比較觀察組患者的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平顯著低于對(duì)照組，CD8+水平顯著高于對(duì)照組，見(jiàn)表4。

表4 兩組患者的免疫功能比較

2.4 不同嚴(yán)重程度患者的CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/ CD8+水平比較不同嚴(yán)重程度患者的CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），隨著疾病的進(jìn)展，患者的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平顯著降低，CD8+水平顯著升高，見(jiàn)表5。

表5 不同嚴(yán)重程度患者的CD3+、CD4+、CD8+、 CD4+/CD8+水平比較

2.5 相關(guān)性分析通過(guò)相關(guān)性分析，患者的CD4+Tim-3、CD8+Tim-3與CD3+、CD4+、CD4+/CD8+呈負(fù)相關(guān)，與CD8+和疾病進(jìn)展呈正相關(guān)，見(jiàn)表6。

表6 相關(guān)性分析

3 討論

Tim-3又被稱之為T細(xì)胞免疫球蛋白粘蛋白分子-3，其主要在成熟的Th2細(xì)胞內(nèi)分化成熟[10]，同時(shí)在CD8+T細(xì)胞、NK細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞、肥大細(xì)胞以及內(nèi)皮細(xì)胞中表達(dá)。在基因的多態(tài)性分析中[11]， Tim-3的多態(tài)性與類風(fēng)濕性疾病呈現(xiàn)顯著的相關(guān)性。國(guó)外研究已證實(shí)[12]，在Tim-3的基因多態(tài)性分析中，其包含的6個(gè)單核苷酸的結(jié)合位點(diǎn)可能與類風(fēng)濕性疾病的發(fā)病呈現(xiàn)顯著的相關(guān)性。而在基因多態(tài)的分析中，-574T>G以及4259G>T多態(tài)性與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的疾病進(jìn)展顯著相關(guān)[13]。

本研究中，通過(guò)對(duì)患者的CD4+T細(xì)胞以及CD8+T細(xì)胞的Tim-3水平的分析，可知在CD4+T細(xì)胞以及CD8+T細(xì)胞中Tim-3均呈較高水平表達(dá)。提示Tim-3在類風(fēng)濕疾病的進(jìn)展中發(fā)揮重要的調(diào)控作用[14]。國(guó)內(nèi)研究已證實(shí)[15]，Tim-3與CD4+CD25+Foxp3+細(xì)胞呈現(xiàn)顯著的相關(guān)性。推測(cè)患者的Tim-3可能對(duì)于調(diào)節(jié)性T細(xì)胞具有顯著的抑制性作用，進(jìn)一步促進(jìn)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎疾病進(jìn)展。同時(shí)也有學(xué)者研究證實(shí)[16]，在CD4+T細(xì)胞以及CD8+T細(xì)胞中Tim-3 mRNA均表現(xiàn)為較高水平的表達(dá)，進(jìn)一步證實(shí)了Tim-3與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的疾病進(jìn)展顯著相關(guān)。病理學(xué)的研究證實(shí)[17]，Tim-3表達(dá)水平的顯著上升，可進(jìn)一步對(duì)患者的T細(xì)胞進(jìn)行活化，同時(shí)在炎性微環(huán)境的共同刺激下，將進(jìn)一步導(dǎo)致Tim-3的抑制性作用被顯著削弱。而在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)病的疾病進(jìn)展中，局部病灶部位的炎性反應(yīng)過(guò)程中，隨著細(xì)胞的不斷凋亡和炎性反應(yīng)的增強(qiáng)，患者的Tim-3/Galectin9信號(hào)通路進(jìn)一步激活，進(jìn)一步抑制機(jī)體的免疫功能[8]。而在本研究中，通過(guò)對(duì)患者免疫功能的分析，隨著疾病進(jìn)展，患者的免疫指標(biāo)呈現(xiàn)顯著下降趨勢(shì)，提示隨著患者病灶部位炎性反應(yīng)的不斷激活，患者的Tim-3水平顯著升高，而免疫功能則呈現(xiàn)顯著下降的趨勢(shì)。Tim-3還可通過(guò)對(duì)患者的Th1以及Th17的顯著下調(diào)作用，進(jìn)一步促進(jìn)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的免疫耐受作用。丁思思等[18]通過(guò)對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者的Tim-3水平分析表明，隨著疾病進(jìn)展，患者的Tim-3水平呈現(xiàn)顯著上升趨勢(shì)，與本研究一致。而在相關(guān)性的研究中，患者的免疫功能與Tim-3水平均呈現(xiàn)顯著的相關(guān)性，提示通過(guò)對(duì)患者Tim-3水平的檢測(cè)，可以對(duì)患者的疾病進(jìn)展以及免疫功能進(jìn)行預(yù)測(cè)。

本研究還存在一定的局限性，由于納入本研究的樣本量較小，所以在臨床的推廣意義還有待在日后的大樣本研究中進(jìn)行驗(yàn)證。

綜上所述，CD4+T細(xì)胞以及CD8+T細(xì)胞的Tim-3 水平的異常上調(diào)，進(jìn)一步導(dǎo)致疾病活動(dòng)度顯著升高，Tim-3水平可通過(guò)對(duì)體液免疫以及細(xì)胞免疫水平的調(diào)控作用，參與類風(fēng)濕性疾病的疾病進(jìn)展。