重度燒傷患者炎性因子與T淋巴細胞水平的相關性研究

蔚利納

(鄭州市第一人民醫院 干細胞中心，河南 鄭州 450000)

重度燒傷屬于臨床常見創傷性疾病，該病不僅會干擾機體內環境運作，還會導致機體繼發一系列病理變化，表現為炎性因子水平異常升高、免疫功能減退；隨著體外免疫屏障功能的持續減退，重度燒傷患者體內免疫因子或受到過度激活進而形成免疫過激或免疫抑制，同時并發應激反應、加劇病菌清除機制紊亂情況，導致炎性物質堆積[1]。由此可見，同時對以上兩個方面的波動情況進行分析有助于形成燒傷部位病情發展動態檢測結果，為臨床重度燒傷診治提供依據。關于監測重度燒傷肌膚病變部位炎性因子水平是否能夠反映免疫功能減退情況，而免疫功能減退是否推動機體炎癥介質增殖，本研究就重度燒傷患者炎性因子與其T淋巴細胞水平的相關性進行研究后，得出以下結論，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2020年1月至2021年1月在鄭州市第一人民醫院進行治療的43例重度燒傷患者作為研究對象納入觀察組，同期選取43例到院體檢的健康者納入對照組。43例重度燒傷患者中，男24例，女19例；年齡為23～64歲，平均(46.71±12.63)歲；燒傷面積：20例燒傷面積占體表總面積的30%～45%，15例＞45%，8例為11%～20%Ⅲ度燒傷。43例健康者中，男26例，女17例；年齡為22～64歲，平均(47.84±13.20)歲；體質量指數(BMI)為19～23 kg/m2，平均(21.24±1.03) kg/m2。兩組性別、年齡構成比差異無統計學意義(P＞0.05)，86例入組對象及家屬均已簽署知情同意書。

1.2 納入及排除標準

納入標準：(1)入組健康者B超、放射科檢查、血尿常規檢測結果均正常；(2)重度燒傷患者符合《中國燒傷專科手術分級評估方法專家共識(2019版)》[2]中重度燒傷診斷標準。

排除標準：合并免疫性疾病、慢性皮膚炎癥、肝腎綜合征、內分泌系統功能障礙者。

1.3 檢測儀器及方法

1.3.1 檢測儀器

T淋巴細胞亞群水平和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)水平檢測采用美國BD公司所生產的FACSCanto II流式細胞儀；C-反應蛋白(CRP)檢測所用熒光免疫定量分析儀由基蛋生物科技股份有限公司生產，型號為Getein1600。

1.3.2 檢測方法

受測T淋巴細胞亞群包括自然殺傷細胞(NK)以及白細胞分化抗原CD4+、CD8+，采用單克隆抗體分析法進行檢測，取100 μL血細胞抗凝混懸液置入檢測試管，后加入熒光素標記單抗，震蕩混勻靜置20 min；接著加入細胞裂解液，離心吸取上清，加入400 μLPBS洗滌；后重懸于700 μLPBS洗滌液中。CRP及TNF-α采用免疫熒光法進行檢測，采用抗凝試管收集250 g外周血液樣本混合實驗緩沖液進行稀釋、避光震蕩捕獲微球抗體，后于室溫環境下離心5min，使用移液槍吸取125 μL上層清液；接著往每管內加入200 μL洗滌緩沖液，利用渦旋將微球重懸30 s，離心5 min后吸取200 μL血漿上層清液，盡量吸棄液體；最后根據流式細胞儀樣本檢測需求，于每管內加入150～300 μL洗滌緩沖液，通過渦旋重懸微球抗體。于60 min內上各指標對應儀器或采用對應試劑進行檢測。

1.4 觀察指標

比較對照組與觀察組的CRP、TNF-α以及NK、CD4+、CD8+淋巴細胞水平，同時對重度燒傷患者CRP、TNF水平與NK、CD4+、CD8+T淋巴細胞水平的相關性進行分析。

1.5 統計學分析

采用SPSS 22.0統計學軟件對此次研究數據進行分析，計量資料以±s表示，進行t、r檢驗，若檢驗結果為P＜0.05則差異具有統計學意義。

2 結 果

2.1 兩組炎性因子、T淋巴細胞亞群水平比較

觀察組CRP、TNF-α水平均高于對照組，NK、CD4+水平低于對照組，CD8+水平與對照組相比較高(P＜0.05)。見表1。

表1 兩組炎性因子、T淋巴細胞亞群水平比較(±s )

表1 兩組炎性因子、T淋巴細胞亞群水平比較(±s )

組別 例數 CRP/(mg·L-1) TNF-α/(ng·L-1) NK/% CD4+/(個/μL) CD8+/(個/μL)觀察組 43 38.25±5.13 99.58±21.46 5.08±1.52 356.30±36.57 1 526.72±417.84對照組 43 4.52±1.30 33.26±12.86 12.93±4.10 531.68±38.64 1 070.11±361.26 t 12.990 6.042 8.296 9.139 2.108 P＜0.001 0.008 ＜0.001 ＜0.001 0.042

2.2 重度燒傷患者炎性因子、T淋巴細胞亞群水平相關性分析

觀察組43例重度燒傷患者CER、TNF水平與NK細胞、CD4+均呈負相關，與CD8+細胞呈正相關(P＜0.05)。見表2。

表2 重度燒傷患者炎性因子、T淋巴細胞亞群水平相關性分析(±s )

表2 重度燒傷患者炎性因子、T淋巴細胞亞群水平相關性分析(±s )

炎性因子 NK/% CD4+/(個/μL) CD8+/(個/μL)r P r P r P CRP -0.449 0.016 -0.423 0.019 0.375 0.025 TNF -0.315 0.030 -0.377 0.024 0.405 0.019

3 討 論

重度燒傷引發炎性病變的病理機制被認為與機體免疫力低下、炎性因子所致神經內分泌反應、燒傷創面變形壞死組織為細菌提供良好培養基等因素有關；基于此，準確評估重度燒傷患者炎性反應程度，不僅是臨床感染診斷、治療效率提升的關鍵措施，也是有效改善患者預后的重要參考依據[3-4]。考慮到重度燒傷所引起的病理變化在發病機制上呈復雜性特征，對各項機制的相關性進行分析，可提高臨床病理診斷分析的系統性及科學性。

本研究中，對健康者以及重度燒傷患者的炎性因子及T淋巴細胞水平進行檢測后發現，重度燒傷患者炎性因子、T淋巴細胞水平與正常人群差異較顯著，提示重度燒傷患者局部肌膚黏膜、器官病變會誘發不同程度的炎性反應，同時破壞機體正常免疫屏障。有學者研究指出[5]，與一般輕度燒傷相比，重度燒傷患者皮損程度較嚴重，其局部黏膜屏障出現應激性損傷、微生物移位的可能性較大；若此類病變持續發展未得以控制，則易激活各類炎性介質，并在多種放大效應引導下引發多器官連鎖應激反應。除了炎癥反應以外，免疫調節失常也是機體遭遇各類創傷、感染影響后出現的典型癥狀。T細胞、NK均參與到細胞免疫應答過程中，其中活化后的NK細胞與免疫應答過程中發揮釋放、分泌趨化因子的作用，T細胞亞群于機體出現創傷、失血性休克等疾病且并發免疫抑制時表現出較低的增殖活性；重度燒傷后，體表肌膚、皮下組織受損破潰，相應區域的免疫屏障自然難以保持完整性[6]。

有關研究指出[7]，促炎—抗炎動態調控機制失衡在免疫功能減弱過程中發揮重要推動作用，而免疫抑制會介導炎癥反應的生成。關于以上說法中提到的炎癥反應與免疫功能之間的相互作用，本研究對重度燒傷患者炎性因子及其T淋巴細胞水平相關性進行分析后得出，其炎性因子與T淋巴細胞水平存在正相關或負相關關系，提示重度燒傷患者發生炎性病變的同時往往伴隨著免疫功能減退。重度燒傷會刺激外源性、內源性病原體相關模式分子大量釋放，同時激活自體免疫防御機制啟動先天免疫反應、誘導免疫細胞分泌趨化因子抵御炎癥介質增殖；然而，T淋巴細胞所介導的獲得性免疫反應主要通過調節巨噬細胞功能來完成抗菌職能，而燒傷合并感染者巨噬細胞功能正處于抑制狀態，此情況或引發巨噬細胞代償性分泌大量炎性因子以維持促炎—抗炎機制平衡[8]。在巨噬細胞職能減退、代償性釋放炎性因子的影響下，T淋巴細胞活化受阻、CD4+與CD8+的動態平衡被打破，機體抗炎能力持續下降；以上免疫調節機制失衡因素綜合作用會加劇炎性組織的積累，構成惡性循環。

綜上所述，重度燒傷患者炎性因子與其T淋巴細胞水平存在顯著相關性。