產蛋后期籠養攸縣麻鴨蛋氨酸需要量研究

黃 璇 姚玥州 李 闖 張 旭 李震威 蔣桂韜 胡 艷 戴求仲*

(1.湖南省畜牧獸醫研究所，動物營養與飼養技術研究室，長沙 410131；2.湖南家禽安全生產工程技術研究中心，長沙 410128；3.湖南農業大學動物科技學院，長沙 410128；4.攸縣畜牧水產事務中心，攸縣 412300)

蛋氨酸是家禽玉米-豆粕型飼糧中的第一限制性氨基酸[1]，其參與體內蛋白質的合成，還可清除自由基，增強機體免疫力，對禽生產性能也有重要影響。在家禽上的研究表明，蛋氨酸缺乏會抑制生長，影響生產性能發揮，而過量添加蛋氨酸并不能進一步提高生產性能，甚至會出現生產性能下降的趨勢[2-4]。目前使用的玉米-豆粕型飼糧中缺乏蛋氨酸，需添加合成蛋氨酸來滿足家禽生產需要，因此研究其適宜添加量成為家禽生產中重要營養目標之一[5]。有關鴨不同產蛋期推薦的蛋氨酸需要量為0.40%～0.45%。我國《肉鴨飼養標準》(NY/T 2122—2012)中給出肉蛋兼用型種鴨產蛋后期蛋氨酸需要量為0.40%[6]；另外,本課題組研究了產蛋高峰期臨武鴨蛋氨酸需要量為0.41%～0.43%[7]；He等[8]報道產蛋后期紹興鴨蛋氨酸需要量為0.45%。攸縣麻鴨作為我國著名蛋用型麻鴨品種，具有生長快、性成熟早、產蛋性能佳和適應能力強等特點，然而目前關于攸縣麻鴨營養參數研究較少，特別是關于氨基酸需要量的數據極少。因此，本試驗以攸縣麻鴨為試驗動物，通過飼喂不同蛋氨酸水平的飼糧，研究飼糧蛋氨酸水平對產蛋后期攸縣麻鴨產蛋性能、蛋品質、血清生化和抗氧化指標的影響，并通過線性和二次曲線回歸模型確定其蛋氨酸需要量，為攸縣麻鴨飼養標準制訂提供理論依據和數據支持。

1 材料與方法

1.1 試驗設計與試驗飼糧

選取健康狀況良好、產蛋率[(78.46±1.48)%]相近的56周齡產蛋后期攸縣麻鴨300羽，隨機分成5組，每組6個重復，每個重復10羽，進行為期9周的飼養試驗。試驗設5個蛋氨酸水平，分別在基礎飼糧中以0.06%為梯度添加DL-蛋氨酸，各組飼糧蛋氨酸水平分別為0.27%、0.33%、0.39%、0.45%和0.51%。基礎飼糧參照小型蛋鴨營養需要，并結合本實驗室已確定的攸縣麻鴨其他營養需要量參數配制，各組飼糧均制成顆粒料，基礎飼糧組成及營養水平見表1。

表1 基礎飼糧組成及營養水平(風干基礎)

1.2 飼養管理

飼養試驗在湖南省畜牧獸醫研究所試驗鴨場進行。鴨舍為半封閉式鴨舍，試驗鴨采用雙層立體籠養，單籠飼養，自由飲水，白天自然光照，晚上補充光照，每天保持16～17 h光照。每天09:00和16:00各喂料1次，根據上次喂料時試驗鴨采食情況，適當增減給料量，使鴨保持自由采食狀態。

1.3 測定指標與方法

1.3.1 產蛋性能

試驗期間每天按重復記錄產蛋總數、總蛋重和采食量，試驗結束時以組為單位統計平均蛋重、日產蛋量、產蛋率、平均日采食量，計算料蛋比：

料蛋比=平均日采食量/日產蛋量。

1.3.2 蛋品質

在試驗第4周和第8周末從每組抽取接近平均蛋重的鴨蛋18枚(每重復3枚)，4 ℃保存，在24 h之內測定蛋黃重、蛋殼強度(蛋殼強度測定儀)、蛋殼厚度(蛋殼厚度測定儀)、蛋黃顏色和蛋白高度(蛋品分析儀)，并計算蛋黃比例和哈氏單位：

蛋黃比例=蛋黃重/蛋重；哈氏單位=100×lg(H-1.7W0.37+7.57)。

式中：H為蛋白高度(mm)；W為蛋重(g)。

1.3.3 血清生化和抗氧化指標

在試驗結束時，每個重復隨機選取試驗鴨2只，空腹12 h后，翅下靜脈采血5 mL，靜置30 min后，3 000 r/min離心15 min，分離血清，-20 ℃下保存。使用全自動生化分析儀(URIT-8000，優利特，美國)檢測血清中葡萄糖(GLU)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(UN)、尿酸(UA)、甘油三酯(TG)、膽固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)的含量以及谷草轉氨酶(ALT)、谷丙轉氨酶(AST)的活性。采用比色法使用酶標儀(SKY，Thermo，美國)檢測血清中過氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量以及總抗氧化能力(T-AOC)。以上試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。

1.4 數據處理

采用SPSS 18.0軟件進行單因素方差分析(one-way ANOVA)，差異顯著者再進行Duncan氏法多重比較，結果用“平均值±標準差”(mean±SD)表示，P<0.05為差異顯著。最后采用SAS 9.0軟件中的非線性模擬程序中的二次曲線模型擬合試驗鴨各敏感指標與飼糧蛋氨酸水平的二次曲線方程，再通過求導得出蛋氨酸需要量。

2 結 果

2.1 飼糧蛋氨酸水平對蛋鴨產蛋性能的影響

由表2可知，飼糧蛋氨酸水平對產蛋率、平均蛋重、平均日采食均無顯著影響(P>0.05)。0.39%和0.45%蛋氨酸水平組日產蛋量顯著高于0.27%蛋氨酸水平組(P<0.05)；0.39%蛋氨酸水平組料蛋比最低，且顯著低于0.27%和0.33%蛋氨酸水平組(P<0.05)。

表2 飼糧蛋氨酸水平對蛋鴨產蛋性能的影響

2.2 飼糧蛋氨酸水平對蛋鴨蛋品質的影響

由表3可知，飼糧蛋氨酸水平對蛋白高度、蛋黃顏色、蛋黃比例、蛋殼厚度和蛋殼強度均無顯著影響(P>0.05)，蛋白高度和蛋殼強度隨著飼糧蛋氨酸水平提高呈遞增趨勢。0.27%蛋氨酸水平組哈氏單位顯著低于其他各組(P<0.05)，其他各組之間差異不顯著(P>0.05)。

表3 飼糧蛋氨酸水平對蛋鴨蛋品質的影響

2.3 飼糧蛋氨酸水平對蛋鴨血清生化和抗氧化指標的影響

由表4可知，飼糧蛋氨酸水平對血清生化指標無顯著影響(P>0.05)。與0.27%和0.33%蛋氨酸水平組相比，0.45%和0.51%蛋氨酸水平組血清GSH-Px活性顯著提高(P<0.05)；隨著飼糧蛋氨酸水平提高，血清GSH含量呈遞增趨勢，且0.39%、0.45%和0.51%蛋氨酸水平組血清GSH含量顯著高于0.27%蛋氨酸水平組(P<0.05)；0.45%蛋氨酸水平組血清CAT活性最高，顯著高于0.27%蛋氨酸水平組(P<0.05)。

表4 飼糧蛋氨酸水平對蛋鴨血清生化和抗氧化指標的影響

2.4 產蛋后期攸縣麻鴨蛋氨酸需要量

由表5可知，基于敏感指標對產蛋后期攸縣麻鴨蛋氨酸需要量進行估測，各差異顯著指標當中只有日產蛋量、料蛋比、哈氏單位和血清CAT活性與飼糧蛋氨酸水平存在二次曲線變化(P<0.05)，通過建立以上4個敏感指標與飼糧蛋氨酸水平的二次曲線方程，估測該階段攸縣麻鴨達到最高日產蛋量、哈氏單位和血清CAT活性以及最低料蛋比的飼糧蛋氨酸水平分別為0.413%、0.451%、0.417%和0.418%。試驗鴨血清GSH-Px活性和GSH含量與飼糧蛋氨酸水平只存在線性變化(P<0.05)。

3 討 論

3.1 飼糧蛋氨酸水平對蛋鴨產蛋性能的影響

蛋氨酸被認為是限制家禽正常生長的主要氨基酸，它會影響其他氨基酸的利用和吸收，飼糧適量蛋氨酸水平可改變氨基酸平衡，提高其生產性能[9]。本試驗結果顯示，以產蛋性能作為評價指標，飼糧蛋氨酸水平雖對產蛋率、平均蛋重、平均日采食均無顯著影響，但在0.39%～0.45%時可顯著提高日產蛋量，降低料蛋比。當蛋氨酸水平達到0.51%時，產蛋性能卻出現下降趨勢。以上研究結果說明了蛋氨酸在家禽飼糧中存在適宜水平，過量添加蛋氨酸生產性能反而會降低[4-5]。料蛋比可反映飼料利用率，料蛋比越低飼料利用率越高。在本試驗條件下，隨著飼糧蛋氨酸水平的提高，料蛋比先降低后升高，飼糧蛋氨酸水平為0.39%時，料蛋比達到最低值，說明0.39%蛋氨酸水平組氨基酸比例趨于平衡，飼料利用率高，因此通過產蛋性能各指標判斷，飼糧0.39%蛋氨酸水平可滿足產蛋后期攸縣麻鴨生產需要。這一研究結果低于吳永保等[10]對低能量水平飼糧中育肥期北京鴨的研究結果(0.42%)；高于江世珍[11]報道的肉鴨后期蛋氨酸需要量(0.367%)和宋春玲[12]對產蛋初期金定鴨蛋氨酸需要量(0.36%)的研究結果；但與Xie等[2]獲得的21～49日齡北京鴨蛋氨酸需要量(0.39%)和He等[8]報道的產蛋后期紹興鴨蛋氨酸需要量(0.40%)較接近。另外回歸分析結果顯示，以日產蛋量和料蛋比為評價指標，通過二次曲線模型估測得出飼糧蛋氨酸水平為0.413%和0.418%時，試驗鴨獲得最高日產蛋量和最低料蛋比，估測值高于判定值(0.39%)。

表5 產蛋后期攸縣麻鴨蛋氨酸的需要量

3.2 飼糧蛋氨酸水平對蛋鴨蛋品質的影響

蛋品質的測定對衡量鴨蛋食用價值和經濟價值具有重要意義，一般來說，哈氏單位是用來衡量蛋品質量和新鮮程度重要指標，哈氏單位越高說明蛋貨架期越長[13]。本試驗結果表明，飼糧中添加蛋氨酸有提高蛋殼強度和蛋白高度的趨勢；哈氏單位隨著蛋氨酸水平的提高呈升高后降低趨勢，與0.27%蛋氨酸水平組相比，飼糧蛋氨酸水平達到0.33%時即可顯著提高哈氏單位，其中0.45%蛋氨酸水平組哈氏單位最高。回歸分析結果顯示，哈氏單位達到最大值時飼糧蛋氨酸水平為0.451%，并可促進鴨蛋蛋白質沉積。這與Ruan等[3]對19～43周齡的龍巖蛋鴨以及周旻瑤[14]對“京紅1號”商品蛋雞的研究結果基本一致。然而He等[8]和Fouad等[13]研究認為，飼糧中添加蛋氨酸對龍巖鴨和紹興鴨的哈氏單位、蛋黃顏色和蛋白高度等蛋品質指標均無顯著影響，分析其原因可能是由于蛋鴨所處產蛋期和飼糧組成等差異造成的。

3.3 飼糧蛋氨酸水平對蛋鴨血清生化和抗氧化指標的影響

血清生化指標是反映動物體內物質代謝和某些組織器官機能狀態變化的重要指標。當動物體內氨基酸不平衡或蛋白質供應不足時，導致機體對養分吸收受限制，血清TP、ALB、TG和HDL等含量會下降，而血清UA和UN含量則增加[15]。飼糧蛋氨酸水平在0.27%～0.51%時對試驗鴨血清生化各指標均無顯著影響，說明飼糧粗蛋白質水平在17%、蛋氨酸水平在0.27%～0.51%時，試驗鴨機體營養狀況較好，氨基酸平衡狀況較佳，因此血清中GLU、蛋白質和脂肪均可維持在一個較高水平。這與林禎平等[16]和葉慧等[17]在獅頭鵝方面的研究結果相一致。

當細胞中產生內源性氧自由基時，就會發生氧化應激，機體通過抗氧化劑的中和作用來抵消或清除其有害作用[18]。蛋氨酸是GSH合成前體物質，而GSH作為GSH-Px合成底物，在清除細胞內的過氧化氫(H2O2)及脂類過氧化物上發揮作用，另外在CAT活性很低時GSH-Px可代替CAT清除H2O2[3,19]。因此，血清GSH、MDA含量和GSH-Px、CAT活性均可作為蛋氨酸調控氧化應激重要指標。Fouad等[13]研究表明，飼糧蛋氨酸水平在0.25%～0.50%時對產蛋鴨血清GSH、氧化型谷胱甘肽(GSSG)、MDA含量以及GSH-Px活性均無顯著影響。然而Hu等[20]研究表明，飼糧中補充蛋氨酸組的血清GSH-Px活性高于對照組。李珍珍等[21]研究發現，飼糧適宜蛋氨酸水平可以提高21日齡籠養蛋雛鴨血清GSH含量及GSH-Px和SOD活性，降低血清MDA含量。本試驗結果顯示，適宜飼糧蛋氨酸水平(0.39%～0.51%)可以顯著提高產蛋后期的攸縣麻鴨血清CAT、GSH-Px活性和GSH含量，并通過二次曲線分析得出飼糧蛋氨酸水平為0.417%時血清CAT活性最高。這一結果與Hu等[20]、葉慧等[17]和李珍珍等[21]研究報道一致。飼糧中添加蛋氨酸可促進GSH的合成，提高CAT和GSH-Px活性，從而提高攸縣麻鴨抗氧化能力，對防止細胞內過氧化作用具有一定效果。攸縣麻鴨血清CAT、GSH-Px活性和GSH含量可敏感反映蛋氨酸抗氧化能力，隨飼糧蛋氨酸水平增加血清GSH-Px活性和GSH含量呈線性上升，而CAT活性呈二次曲線變化，推測可能是由于GSH-Px部分替代了CAT抗氧化功能。然而，目前關于蛋氨酸對機體抗氧化防御系統的具體作用機理還缺乏研究，尤其在蛋鴨方面，還需要進一步研究。

4 結 論

飼糧蛋氨酸水平為0.39%時可顯著提高產蛋后期攸縣麻鴨日產蛋量，顯著降低料蛋比，改善蛋品質，滿足生產需要；飼糧蛋氨酸水平為0.45%時產蛋后期攸縣麻鴨血清抗氧化指標較佳。結合回歸分析結果，產蛋后期攸縣麻鴨蛋氨酸需要量為0.41%～0.45%。