接觸性檢材DNA檢驗影響因素分析

石莉娜 婁中文 劉軍銘

摘要：隨著犯罪嫌疑人的反偵查意識及能力增強，接觸性檢材在現場提取檢材中所占比重增大，現場接觸性檢材DNA在案件偵破過程中發揮的作用也日漸明顯。本文闡述接觸性檢材的處理方法和DNA檢驗的常見方法，探討影響接觸性檢材檢驗結果的因素，意在表述接觸性檢材DNA檢驗的價值。

近年，隨著媒體對公安工作的宣傳，刑事案件的偵查手段已經不是秘密，犯罪分子的反偵查手段的日益狡猾，明顯的生物物證常常被有意識的銷毀和破壞，而來自人體代謝脫落細胞由于微小痕量，常被忽略。對于這些潛在的微量生物物證，一旦成功地獲得了關鍵物證的DNA分型，往往就能夠成為案件偵破的關鍵線索，并為案件定性及法庭量刑提供科學證據。

如何發現和采集現場微量檢材，準確及時提取到關鍵物證，選擇合理的檢驗方法，得到有效的STR分型，對節省警力，有效節約破案成本，為偵查部門提供強有力的線索有重要意義。

一、接觸類檢材的處理方法

（一）脫落細胞粘取器

1.對于金屬、塑料、橡膠效果較好。

2.不適合玻璃、木質、大理石、磚頭等，建議采用棉簽等擦拭。

3.不適合塵土較多、油污、潮濕的接觸性檢材。

優點：采集效率高、釋放效率高，對極微量的接觸類檢材提取效果好;

缺點：適用范圍相對有局限

（二）棉簽標準兩步法擦拭

1.適用于大多數接觸性檢材，特備是凹凸不平、灰塵較多、載體表面潮濕以及位置面積較大的接觸性檢材。

2.對于塑料、漆面等基底的樣本采集效率低于粘取器，在對現場載體轉移時要用半干棉簽反復擦拭。

3.直接剪取。

（1）樣本較集中的衣領、口罩等針織檢材，剪取的載體應盡量小。

（2）滲透性的紙張。如紙張能看到明顯指（掌） 紋印，或用茚三酮熏顯。

（三）脫落細胞提取儀

適用于樣本分布面積較大的軟質載體或表層疏松檢材，如衣物、棉帽、床單等，脫落細胞提取儀可以有效的對細胞進行富集，提高檢材檢出率。

二、接觸性生物物證DNA檢驗常見方法

1.磁珠純化法：通過細胞裂解液的使用，對細胞實施裂解，使其內部DNA得以釋放，再添加適量磁性顆粒，將細胞內游離態DNA分子予以吸附，而細胞內蛋白質、血紅蛋白等雜質無法被磁性顆粒所吸附，從而余留于細胞裂解液內。隨后，磁場條件下，可實現液體、磁性顆粒間有效分離，通過對磁性顆粒的回收，加之純水、TE液的作用完成DNA洗脫和收集工作。利用磁珠純化法，具有操作簡易、回收率高、模板純凈、自動化收集的優勢，當前行業領域商品化磁珠DNA試劑提取盒和減少繁瑣手工操作的純化儀已存在，但因耗時長和成本高、耗材貴等缺陷，使之磁珠純化法應用范圍受到局限。

2.過濾柱法：利用硅膠旋轉柱對磁性顆粒實施替換，即選擇超濾膜對其DNA分子予以截取，對其他雜質實施過濾。目前該類型商品化試劑提取盒也存在，其操作簡便、回收率高，但其大分子污染物殘留、DNA檢出率低、過濾柱成本較高，促使法醫在針對接觸性生物物證DNA檢驗中，應充分結合檢材條件與資金成本，對DNA檢測法進行合理選擇。

三、接觸性檢材法醫DNA檢驗影響因素

1.提取時間：因表皮細胞離體后機體功能、溶酶體均會受到影響，如機體功能活性降低、溶酶體大量釋出，溶酶體通過對高分子物質、復合物實施逐層降解，該過程屬于表皮細胞自溶現象。而在表皮細胞出現自溶后，核染色體呈現固縮或碎裂，使DNA得以溶解。DNA自溶、降解具有一定的規律，一般在72 小時內自溶和降解速率影響因素較小，而超過該期限則會加快溶解速率。

2.提取環境：

（1）外界環境。接觸性檢材DNA檢驗需在無菌環境下進行，若選擇自然環境作為DNA提取空間，則會受到光源和潮濕、高溫與灰塵、昆蟲以及細菌等因素的影響。

（2）載體環境。表面粗糙、密度低載體空間，如石塊、木塊、針織品等載體，其表皮細胞脫落DNA檢出率較高;而表層光滑、密度高載體空間，如橡膠或金屬等，DNA檢出率明顯有所降低。此外，載體污染程度也是影響DNA降解速率的主要因素。

（3）人源性污染。對于接觸性檢材而言，其DNA含量普遍偏低，若被常量DNA載體所覆蓋，如血跡或唾液等，結合STR檢驗可有效實現DNA模量擴增的目的，但會對接觸性DNA檢出率產生影響;若接觸性檢材多樣，則會有交叉污染問題，從而使DNA檢出分型呈混合型模式。不利于后期的認定工作。

接觸類檢材由于接觸面積廣、DNA 含量少、易被污染，發現及提取難度大，為提取到有效的脫落細胞，檢驗接觸類檢材DNA就要注意以下問題：

（一）了解案情，準確分析提取接觸類檢材的重點部位。檢驗前了解案情，了解物證所處案件現場的環境及各個物證之間的關系，分析接觸類檢材接觸部位，采取相應的提取方法。

（二）控污染，由于接觸性檢材的DNA 含量很少，極易被污染，任何污染都有可能造成檢驗的失敗，現勘人員應第一時間保護現場，在采集檢材時做好自身防護。采集時使用無污染的采集產品，反復使用的器械在使用后要嚴格的清洗消毒，一次提取一件檢材，并注意保護采集的樣本，避免樣本間的交叉污染。

對現場物證接觸性DNA及時提取并在短時間內完成送檢工作;最大限度上提高脫落細胞接觸性DNA模量;選擇個人防護或單獨包裝的形式，避免接觸性DNA發生污染;通過對接觸性DNA載體清潔度的控制，對其提取方法進行合理選擇。

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作者簡介：

石莉娜，女，1983年8月出生，碩士研究生，中級。

婁中文，男，1990年8月，大學本科，中級。

劉軍銘，男，1988年5月，碩士研究生，中級。