不同前處理方法對(duì)蔬菜、水果農(nóng)藥殘留GC-MS/MS檢測(cè)結(jié)果的影響分析

張文文 殷錫峰 張麗穎 董科 盧小燕

摘 要：采用改進(jìn)后的NY/T 761—2008方法和QuEChERS方法對(duì)蔬菜、水果進(jìn)行前處理，用GC-MS/MS檢測(cè)26種農(nóng)藥殘留，結(jié)果表明，改進(jìn)后的3種前處理方法對(duì)蔬菜、水果中農(nóng)藥殘留的影響不大，重現(xiàn)性均較好。但是采用QUICLEAR針式過(guò)濾器改進(jìn)后的QuEChERS方法，樣品量、試劑量使用少，操作簡(jiǎn)便、快速、安全，適用于大批量蔬菜、水果農(nóng)藥殘留量的檢測(cè)。

關(guān)鍵詞：農(nóng)藥殘留;GC-MS/MS;農(nóng)產(chǎn)品;前處理方法

農(nóng)藥殘留指的是一定時(shí)期內(nèi)殘留于農(nóng)產(chǎn)品和環(huán)境中的微量農(nóng)藥原體及其有毒降解物和代謝產(chǎn)物[1]。隨著人們生活水平的提高，農(nóng)藥殘留作為蔬菜、水果的主要污染來(lái)源，成為整個(gè)社會(huì)的關(guān)注熱點(diǎn)。農(nóng)藥殘留對(duì)人體的危害主要是農(nóng)藥殘留在體內(nèi)會(huì)發(fā)生蓄積和慢性中毒[2]。常用的農(nóng)藥有有機(jī)磷類、有機(jī)氯類、菊酯類等多種農(nóng)藥，其中部分農(nóng)藥已被列為禁用或限制使用農(nóng)藥，但是受利益的趨勢(shì)，加之農(nóng)戶的用藥意識(shí)淡薄，可能存在違規(guī)使用的情況[3]。農(nóng)藥殘留檢測(cè)中的前處理技術(shù)主要有液液萃取、索氏提取、固相萃取、凝膠滲透色譜技術(shù)等[4]，部分前處理技術(shù)有機(jī)試劑使用量大、操作過(guò)程復(fù)雜、提取率低、對(duì)檢測(cè)人員的身體損害大[5]，亟待研究人員對(duì)其進(jìn)行優(yōu)化，以減少對(duì)檢測(cè)人員身體的危害。本文以青菜、蘋果為基質(zhì)，采用氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（GC-MS/MS），選擇3種不同的前處理技術(shù)，對(duì)兩種基質(zhì)中農(nóng)藥殘留的回收率進(jìn)行分析，確定了最優(yōu)的前處理技術(shù)，為農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

青菜、蘋果（購(gòu)于本地超市）。

1.2 試劑

乙腈（國(guó)藥、默克）、無(wú)水硫酸鎂（國(guó)藥）、氯化鈉（國(guó)藥）、檸檬酸三鈉（國(guó)藥）、檸檬酸氫二鈉（麥克林）、PSA（安捷倫）、硫酸鎂（國(guó)藥）。

1.3 農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

殺螟硫磷、甲基對(duì)硫磷、對(duì)硫磷、甲基異柳磷、醚菊酯、氯菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯、甲氰菊酯、氯氟氰菊酯、氟氯氰菊酯、聯(lián)苯菊酯、溴氰菊酯、氟氰戊菊酯、氟胺氰菊酯、異菌脲、百菌清、腐霉利、乙烯菌核利、三氯殺螨醇、五氯硝基苯、蟲(chóng)螨腈、α-666、β-666、γ-666、δ-666（以上標(biāo)準(zhǔn)品均為農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測(cè)所生產(chǎn)）。

1.4 儀器設(shè)備

氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀（Agilent7890B+7000C）、AH-30勻漿機(jī)（睿科儀器廈門有限公司）、WH-861渦旋混合器（太倉(cāng)華利達(dá)實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）、HHS型電熱恒溫水浴鍋（上海博訊實(shí)業(yè)有限公司）、Centrifuge 5804R冷凍離心機(jī)（德國(guó)eppendorf公司）、TTL-DCII氮吹儀（北京同泰聯(lián)科技發(fā)展有限公司）、QUICLEAR多功能針式濾器（阿爾塔科技有限公司）、固相萃取裝置。

1.5 試驗(yàn)方法

1.5.1 試樣制備

購(gòu)買的新鮮青菜、蘋果，分別稱取500 g，放入打漿機(jī)中打成漿狀，作為試樣。

1.5.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

（1）農(nóng)藥單標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液。準(zhǔn)確吸取1.0 mL農(nóng)藥殘留標(biāo)準(zhǔn)溶液到10 mL棕色容量瓶中用丙酮定容，配制成10 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液儲(chǔ)備液放-4 ℃冰箱中備用，共26種。

（2）混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液。先將農(nóng)藥單標(biāo)儲(chǔ)備液隨機(jī)分為3組，分別準(zhǔn)確吸取1.0 mL的分組標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液于10 mL棕色容量瓶中，用丙酮稀釋定容，配制成各農(nóng)藥組分質(zhì)量濃度均為1.0 mg/L的混合工作溶液放-4 ℃冰箱中備用。

（3）基質(zhì)空白標(biāo)準(zhǔn)溶液。將經(jīng)過(guò)測(cè)定不含有待測(cè)農(nóng)藥的青菜、蘋果作為空白對(duì)照樣。準(zhǔn)確吸取1 000 ?L、750 ?L、500 ?L、250 ?L、150 ?L和50 ?L的混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，加入空白樣品基質(zhì)中，分別配制濃度為0.2 mg/L、0.15 mg/L、0.1 mg/L、0.05 mg/L、0.03 mg/L和0.01 mg/L 6個(gè)濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)工作液，其中0.1 mg/L濃度作為加標(biāo)回收濃度，做3個(gè)重復(fù)。

1.5.3 前處理方法

蔬菜、水果的前處理方法見(jiàn)表1。

1.5.4 儀器條件

（1）GC條件。色譜柱：HP-5 MSUI（30 m×0.250 mm×

0.25 ?m，Agilent公司）;程序升溫：60 ℃保持1 min，以40 ℃/min升至170 ℃并保持0 min，再以10 ℃/min升至310 ℃保持3 min;載氣：高純氦氣（≥99.999%）;進(jìn)樣口溫度：250 ℃;進(jìn)樣體積：1 ?L;進(jìn)樣方式：不分流。

（2）MS/MS條件。離子源：電子轟擊離子化（EI）;電離能量：70 eV;離子源溫度：280 ℃;四極桿溫度：150 ℃;載氣類型：氦氣;淬滅氣類型：氦氣;碰撞氣類型：氮?dú)?質(zhì)譜接口溫度：280 ℃;碰撞氣流速：1.5 mL/min;分析模式：MRM。26種農(nóng)藥化合物GC/MS離子參數(shù)見(jiàn)表2。

2 結(jié)果與分析

試驗(yàn)選用含水分、糖和有機(jī)酸等物質(zhì)干擾多且消費(fèi)量大的青菜、蘋果作為代表性蔬菜、水果，選擇26種農(nóng)藥作為3種前處理方法對(duì)比的研究對(duì)象，其中包括有機(jī)磷類、有機(jī)氯類、菊酯類等多種農(nóng)藥。由于GC-MS/MS檢測(cè)農(nóng)藥殘留，均存在基質(zhì)增強(qiáng)效應(yīng)，因此，本文研究的3種方法標(biāo)準(zhǔn)曲線采用基質(zhì)標(biāo)。

由表3可知，3種前處理方法對(duì)蔬菜、水果中農(nóng)藥殘留的影響不大，重現(xiàn)性均較好。但是采用QUICLEAR針式過(guò)濾器改進(jìn)后的QuEChERS方法，樣品量、試劑量使用少，操作簡(jiǎn)便、快速、安全，適用于大批量蔬菜、水果農(nóng)藥殘留量的檢測(cè)。

3 結(jié)論與討論

GC-MS/MS技術(shù)充分發(fā)揮了氣相色譜和質(zhì)譜技術(shù)特點(diǎn)，可快速、準(zhǔn)確檢測(cè)農(nóng)藥及其衍生物的殘留，可準(zhǔn)確獲取被檢組分的保留時(shí)間、含量等數(shù)據(jù)信息。曹小麗等[6]采用GC-MS/MS分析技術(shù)，建立了水果、蔬菜中62種農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)分析方法，結(jié)果表明該方法快速、靈敏、重現(xiàn)性好。馬智玲等[7]采用QuEChERS方法結(jié)合GC-MS/MS技術(shù)建立了蔬菜、水果中129種農(nóng)藥殘留檢測(cè)分析方法，結(jié)果表明，129種農(nóng)藥在一定含量范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，該方法靈敏度高、簡(jiǎn)便快捷。當(dāng)前相關(guān)研究?jī)?nèi)容都證明了該技術(shù)的優(yōu)越性[8-9]。

傳統(tǒng)前處理技術(shù)有機(jī)試劑使用量大、操作過(guò)程復(fù)雜、提取率低、對(duì)檢測(cè)人員的身體損害大，已不再適用于農(nóng)產(chǎn)品的大批量檢測(cè)。QuEChERS方法具備快速、簡(jiǎn)單、廉價(jià)、有效和可靠等特點(diǎn)，在各個(gè)檢測(cè)領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用[10]。本研究是在NY/T 761—2008和QuEChERS前處理方法的基礎(chǔ)上進(jìn)行了優(yōu)化，其中方法1是NY/T 761—2008前處理技術(shù)的優(yōu)化，方法2和方法3是QuEChERS前處理方法的優(yōu)化，尤其是采用QUICLEAR針式過(guò)濾器改進(jìn)后的QuEChERS方法樣品量、試劑量使用少，操作簡(jiǎn)便、快速、安全，重現(xiàn)性好，可廣泛應(yīng)用于日常大批量蔬菜、水果農(nóng)藥殘留量的檢測(cè)。

參考文獻(xiàn)

[1]張子倫.淺析農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留檢測(cè)研究技術(shù)[J].農(nóng)業(yè)開(kāi)發(fā)與裝備，2020（11）：100-101.

[2]景延秋，喻保華.農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化背景下加強(qiáng)我國(guó)農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量檢測(cè)體系建設(shè)[J].江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2008（7）：156-158.

[3]司露露，梁楊琳，呂春秋，等.QuEChERS-氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法和高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法快速檢測(cè)蔬菜中267種香港規(guī)例中的農(nóng)藥殘留量[J].食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào)，2021，12（1）：122-136.

[4]何芬.蔬菜和水果中農(nóng)藥殘留檢測(cè)的質(zhì)量控制措施[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)研究，2021，27（1）：147-148.

[5]馮建永，劉輝.蔬菜農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)的比較分析[J].中國(guó)瓜菜，2017，30（9）：38-40.

[6]曹小麗，劉素華，劉仲，等.氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜結(jié)合QuEChERS方法檢測(cè)蔬菜、水果中62種農(nóng)藥殘留[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2015，25（8）：1119-1124.

[7]馬智玲，趙文，李凌云，等.氣相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜法快速測(cè)定蔬菜水果中129種農(nóng)藥的殘留量[J].色譜，2013（3）：228-239.

[8]劉華文，蘇海雁，陸小康，等.QuEChERS/超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定茶葉中28種農(nóng)藥殘留[J].食品工業(yè)科技，2021，42（2）：223-229.

[9]易江華，段振娟，方國(guó)臻，等.QuEChERS方法在食品農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)中的應(yīng)用[J].中國(guó)食品學(xué)報(bào)，2013，13（2）：153-158.

[10]劉滿滿，康澍，姚成.QuEChERS方法在農(nóng)藥多殘留檢測(cè)中的應(yīng)用研究進(jìn)展[J].農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào)，2013，15（1）：8-22.