天津市東麗區HIV抗體篩查與確證檢測現狀分析

崔欲曉

天津市東麗區疾病預防控制中心微生物檢驗科 300300

獲得性免疫缺陷綜合征（又稱艾滋病）是感染人類免疫缺陷病毒（HIV）后，以人體CD4+T淋巴細胞減少為特征的免疫功能缺陷，臨床上表現為多種機會感染、惡性腫瘤和中樞神經系統病變的綜合性疾患［1-2］。HIV屬于單鏈RNA病毒，基因變異較快，研制其特異性疫苗仍面臨著技術上的挑戰，HIV感染對人類健康造成了嚴重的威脅［3-4］。2019年，全球約有3 790萬HIV感染患者，新發感染人數約170萬，相當于每天有500例新發感染患者。近年來，HIV感染者數量逐年增加，感染人群越來越廣，艾滋病的預防與控制也隨之面臨新的挑戰。我們需要通過擴大檢測來更加全面掌握HIV感染者的情況［5］。目前，HIV抗體檢測是判斷受檢者是否感染HIV病毒的主要依據，能早期發現HIV感染，對控制HIV在人群傳播具有重大意義。HIV抗體檢測方法包括初篩和確證檢測。化學發光法、酶聯免疫吸附法（ELISA）和膠體金法等主要用于HIV抗體初篩［6］。確證檢測采用免疫印跡法（Western blot）。為提高檢測準確性，需對初篩檢測陽性標本進行復檢和確證檢測。本文通過對近幾年HIV抗體初篩和確證試驗結果進行分析，了解本轄區HIV感染現況及HIV抗體陽性條帶分布特點，為今后艾滋病防治及診斷工作提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 樣本來源 2016年1月1日至2020年12月31日天津市東麗區轄區內HIV初篩實驗室（包括1所三甲醫院，2所二甲醫院及1所檢測機構）送檢的初篩有反應的標本，共計256份。

1.2 方法 對256份初篩有反應的標本進行復檢和確證檢測，方法分別為ELISA和Western blot。復檢時標本進行雙孔平行檢測。試驗方法和結果判斷完全依據試劑說明書操作。

1.3 試劑與儀器 ELISA采用北京金豪生產的HIV抗體及抗原P24檢測試劑盒。用Western blot進行HIV確證試驗采用MP生物有限公司生產的HIV抗體檢測試劑盒。使用儀器為Tecan酶標儀及洗板機，Protiblot 48全自動蛋白印跡儀。

1.4 統計學方法 試驗結果運用SPSS 16.0統計軟件整理分析，計數資料采用例（%）表示，行χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 復檢及確證結果 如表1所示，2016年至2019年度初篩結果的復檢符合率均＞93%，2020年復檢符合率有所降低，為87.18%（34/39），各年度比較差異無統計學意義（χ2=1.636，P=0.651）；確證試驗陽性率為88.67%（227/256），低于初篩復檢陽性率94.92%（243/256）；確證結果為不確定的標本占6.64%（17/256），確證結果為陰性的標本占4.69%（12/256）。

表1 2016年至2020年天津市東麗區HIV抗體復檢及確證結果[份（%）]

2.2 確證陽性樣本基本情況 HIV抗體陽性樣本男女性別比為16.07∶1，差異有統計學意義（χ2=3.105，P＜0.05）；HIV抗體陽性樣本年齡分布廣泛，最大75歲，最小17歲，主要集中在17～39歲年齡段。17～39歲占比78.13%，40～59歲占比15.63%，60歲以上占比6.24%。

2.3 確證試驗帶型分布情況 根據試劑說明書所示，確證結果的判定需要結合9個條帶的出現情況；9個條帶包括ENV條帶（gp160、gp120、gp41）、pol條帶（p66、p51、p31）和gag條帶（p55、p24、p17）；確證陽性標本中，ENV條帶出現頻次最多，gp160和gp120占比100.00%，gp41占比97.36%，gag條帶中p24占比100.00%；確證結果為不確定樣本中，gp160和p24出現頻次最多，分別為82.35%和52.94%。見表2。

表2 2016年至2018年天津市東麗區HIV抗體確證試驗條帶分析（%）

3 討 論

轄區人口較多，HIV擴大檢測策略的實施有利于及時發現和掌握HIV感染者的人群分布，更利于早期及時的干預。篩查人數的增加，檢測方法的改變及檢測設備的更新可能導致篩查的假陽性。復檢雙孔均為陽性時，復檢和確證試驗的陽性符合率較高。但當復檢樣品檢測試劑測量值/陽性判定值之比（S/CO）值接近臨界值，或出現一陰一陽的情況時，確證試驗結果多為不確定或陰性，可能是由于患者位于感染早期或窗口期［7］。對于結果為不確定的樣本還需要進行隨訪或核酸檢測［8-9］。轄區送的初篩有反應標本復檢符合率在90%以上，2020年度符合率偏低，主要由于送樣本的機構中，公立醫院送樣量下降，檢測機構送樣占比增加。因此檢測機構的檢測質量還需要加強督導。

確證陽性樣本中，以17～39歲男性為主，統計結果顯示HIV感染以青壯年為主，與肖韶英等［10］研究一致。陽性病例中，60歲以上占6.24%，提示老年男性也是HIV感染人群中不可忽視的群體。轄區內送的初篩陽性樣本復檢符合率接近95%，由于不同廠家的試劑敏感性和特異性存在一定差異，ELISA檢測存在假陰性和假陽性問題［11-12］。因此選擇Western blot進行確證試驗，排除假陽性。確證試驗陽性率低于復檢陽性率，也與確證試驗窗口期晚于初篩試驗有關。從確證條帶分布情況看，抗ENV基因編碼蛋白陽性率最高，gp160和gp120條帶一般同時出現。gag條帶最重要的p24與gp160都是HIV感染早期能檢測到的條帶。確證試驗結果為不確定的標本雖然出現特異性條帶，但還不足以被判定為陽性。不確定樣本通常位于感染早期，初篩試驗為弱陽性，條帶分布以ENV條帶和gag條帶為主。對于不確定樣本可以進一步隨訪或進行核酸檢測，有助于更早期發現感染者，縮短檢測窗口期。

綜上所述，HIV確證結果可以在一定程度上評價初篩試驗結果質量。通過對初篩和確證結果分析，可以精準早期發現HIV感染人群，有效控制HIV感染蔓延。同時應加快核酸試劑研發，進一步提高HIV檢測的敏感性。

利益沖突：作者已申明文章無相關利益沖突。