加米霉素經口的急性毒性試驗研究

路美玉，鄧菲，耿雅麗

（華北制藥集團動物保健品有限責任公司 石家莊 052165）

加米霉素是一種新型的半合成大環內酯類動物專用抗生素，通過抑制細菌RNA依賴性蛋白合成而起抑菌和殺菌作用，是抗菌譜廣、抗菌活性較強的抗生素，主要用于防治溶血性曼氏桿菌、多殺巴氏桿菌、睡眠嗜組織菌和支原體引起的牛呼吸系統疾病（SRD）[1-3]，并已在牛、羊飼養領域廣泛應用[1,4]，扮演著家畜呼吸道重癥感染最后一道防線的重要角色。

近幾年，加米霉素以其吸收快、分布廣，在肺組織中濃度高，消除緩慢且藥效持久的優點，在全球的使用量迅速增長，具有廣闊的應用前景。我國已批準使用該藥，但由于其劑量低，其毒性效果未見報道[5,6]。為科學的評價加米霉素原藥的急性毒性，本研究采用對大鼠經口灌胃加米霉素，并觀察分析大鼠的中毒癥狀及死亡情況，以期明確加米霉素對大鼠經口急性毒性反應，明確其半數致死劑量（LD50），為加米霉素在臨床中的正確使用提供依據。

1 材料及方法

1.1 受試物

加米霉素原藥（華北制藥集團動物保健品有限責任公司生產）。

1.2 試驗動物

健康SPF級SD大鼠（6～7周齡，體重160～180g，購自北京維通利華動物科技有限公司）。

1.3 試驗動物飼養管理

試驗動物自由采食和飲水，飼料由北京科奧協力飼料有限公司購入，飲用水為無菌水，雌雄動物分籠飼養；飼養溫度控制在22±3℃之間，相對濕度控制在50%～60%；光照強度控制在200～300Lx；光源采取人工明暗各12h；氨濃度控制在14mg/m3以下；噪聲控制在50分貝以下。購入后在動物房飼養3d適應試驗環境，并達到試驗標準180～220g用于試驗。

1.4 預試驗

以5,000mg/kg·bw為高劑量組，按5倍依次遞減設高、中、低三個劑量組，即分別以5,000mg/kg·bw、1,000mg/kg·bw、200mg/kg·bw為高、中、低劑量組開展預試驗。預試驗各個劑量組均為4只大鼠（雌、雄各半），將受試物用1%羧甲基纖維素鈉配置成混懸液，經口對SD大鼠進行灌胃染毒，大鼠灌胃體積為2mL/100g體重。灌胃前禁食8～12h，不限制飲水。染毒后觀察（觀察期為1～2周）大鼠的一般表現、中毒癥狀和死亡情況，并對死亡大鼠進行剖檢，做好記錄。試驗結果顯示，預試驗中各劑量組實驗動物（雌、雄各半）均未見死亡，即高劑量組（5,000mg/kg·bw）亦未見死亡，因此正式試驗的高劑量組可定為5,000mg/kg·bw。

1.5 正式試驗

根據預試驗結果，正式試驗的染毒劑量確定為5,000mg/kg·bw。將正式試驗的30只試驗大鼠隨機分為3組，每組10只（雌雄各半），每次取1組進行試驗，重復3次；將受試物用1%羧甲基纖維素鈉配置成混懸液，經口對SD大鼠進行灌胃染毒，灌胃體積為2mL/100g體重。灌胃前禁食8～12h，不限制飲水。染毒后觀察大鼠的一般表現、中毒癥狀和死亡情況，并對死亡大鼠進行剖檢，做好記錄。若所有試驗動物均未死亡，則試驗結束時每組隨機挑選2只受試動物進行大體剖檢并做好記錄。

1.6 試驗設計

試驗均采用隨機區組試驗，試驗重復三次進行。

1.7 數據處理

數據采用Exce l2010軟件進行數據處理及統計分析。

2 結果與分析

2.1 加米霉素對大鼠生長影響

采用5,000mg/kg·bw加米霉素對大鼠進行灌胃后在試驗觀察期內均未見中毒癥狀（表1），亦未見死亡，且試驗結束時對大鼠進行大體剖檢顯示其心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、胃腸道等組織器官均未見異常變化（表2）。

表1 動物臨床癥狀結果

表2 動物剖檢結果

2.2 加米霉素對SD大鼠經口LD50

按5,000mg/kg·bw劑量經口染毒，在試驗觀察期限內SD大鼠死亡率均為0%（0/10、0/10、0/10）（表3），可判定加米霉素原藥對SD大鼠經口急性毒性試驗的LD50大于5,000mg/kg·bw。

表3 動物死亡結果

3 討論與結論

相關研究表明加米霉素毒性較低，并且對動物主要器官系統如心臟、腎臟及神經系統無明顯副作用，LD50較高[7]。本研究結果也表明加米霉素原藥對大鼠經口LD50大于5,000mg/kg·bw，并且所有受試SD大鼠在試驗觀察期內均未見中毒癥狀，亦未見死亡，且試驗結束時剖檢大鼠的心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、胃腸道等組織器官均未見異常變化，這與前人研究結果相吻合，臨床使用安全。█