張 雪, 陶 金,李 焱
(1 貴陽職業技術學院,貴州 貴陽 550081;2 貴州裝備制造職業學院, 貴州 貴陽 551400;3 貴州大學, 貴州 貴陽 550000)
肺筋草為百合科植物,多生長于近水山坡、石縫處,主要分布于我國貴州、云南、湖南、湖北、廣西等南部地區。肺筋草具有潤肺平喘、清熱、利尿、驅蟲、活血調經之功效[1]。肺筋草中含有黃酮及其苷類、三萜皂苷、氨基酸、還原糖、鞣質、有機酸、油脂、香豆素及內脂等化學成分[2]。近年來,天然抗氧化劑由于安全、無毒,越來越受到歡迎[3],本研究以肺筋草為研究對象,對肺筋草油脂類物質的提取工藝和抗氧化性進行了初步試驗研究。為肺筋草中油脂類成分在工業化生產、保健食品等領域廣泛應用提供依據。
肺筋草,干品,購買于貴陽市油榨街花鳥市場。
石油醚、乙酸乙酯、正己烷,均為分析純。
HS20500D超聲波清洗器,天津市恒奧科技發展有限公司; HH-4 數顯恒溫水浴鍋,國華電器有限公司;RE52AA型旋轉蒸發儀,上海亞榮生化儀器廠;SHZ-Ⅲ型循環水真空泵,上海亞榮生化儀器廠;紫外可見分光光度計,北京萊伯泰科技儀器有限公司;總抗氧化能力試劑盒,南京建成生物研究所;多功能熒光酶標儀,北京綠百草科技發展有限公司。
1.2.1 肺筋草油脂的提取工藝研究
肺筋草經篩選、粉碎、烘干后,稱取10 g,按1:10的比例加入,浸泡30 min后,采取超聲波提取法提取肺筋草油脂,經旋轉蒸發除去溶劑后稱重,蒸餾瓶前后增重即為肺筋草油脂質量,計算肺筋草油脂提取率。
1.2.2 肺筋草油脂的工藝優化
在正交試驗之前,先做預實驗,通過文獻[4]確定水平因素為,料液比、提取時間、超聲功率。通過預實驗,根據油脂的顏色判斷,時間超過60 min后,細胞破壞導致葉綠素出現,油脂顏色綠色加深,故設計時間小于60 min。由于肺筋草材料比較蓬松,料液比不恰當,會導致物料與溶劑不能完全浸透。故范圍選在1:(6~10)之間。根據參考文獻[5],確定超聲功率在250~450 W。
為系統考察超聲波提取法的工藝參數,本實驗選取料液比(A)、提取時間(B)、超聲功率(C)作為考察因素,以油脂產率作為考察指標。見表1。

表1 試驗因素與水平Table 1 Orthogonal form factor experiment
1.2.3 肺筋草油脂的抗氧化性測定
采用南京建成生物公司抗氧化試劑盒測定,測定原理是,機體中的抗氧化物質能使Fe3+還原成Fe2+,后者可與菲啉類物質形成穩固的絡合物,通過比色,可測出其抗氧化能力。將在37 ℃時,每分鐘每毫升樣品液使反應體系的吸光度(OD)值每增加0.01時定義為一個總抗氧化能力單位,結果以(單位/毫升溶液)來表示[6]。

表2 正交試驗結果Table 2 Results of optimization design

表3 方差分析表Table 3 Analysis of variance
從極差和方差分析可知,三種因素影響的主次順序是:料液比>時間>功率,肺筋草提取油脂的最佳工藝為A2B2C2,即料液比為1:8,時間40 min,功率350 W。
植物油脂中含有抗氧化物質,能使Fe3+還原成Fe2+,后者可與菲啉類物質形成穩固的絡合物,通過比色,可測出其抗氧化能力高低。采用總抗氧化能力(T-AOC)測試盒,按照測試盒說明書配制試劑,測定520 nm波長出的吸光度,結果見表4。

表4 肺筋草油脂抗氧化能力測定結果Table 4 Antioxidant activity of Aletris spicata(Thunb.)Franch oil
式中,A0為對照管吸光值(OD);A1為樣品管吸光值(OD);反應液總體積為0.01;取樣量為30。
肺筋草油脂具有較強的抗氧化性,這可能是由于肺筋草油脂中含有較高的角鯊烯的作用,角鯊烯屬于酚類化合物,它能中止游離基反應,使游離基還原成分子,使游離基反應無法進行。實驗結果表明肺筋草油脂具有較好的抗氧化活性。
本文對肺筋草中油脂類成分的提取工藝進行了研究,確立了從肺筋草中提取油脂類成分的最佳提取工藝是以石油醚為提取溶劑,料液比為1:8,超聲提取時間40 min,功率350 W。為肺筋草油脂類成分的工業化提取提供了技術支持;同時對肺筋草中的油脂類成分進行了抗氧化活性研究,結果表明肺筋草油脂具有較好的抗氧化活性,為肺筋草油脂類成分在保健食品等領域的應用提供了依據,對肺筋草的綜合利用具有深遠的意義。