流感病毒抗原檢測(cè)在流感篩查中的應(yīng)用效果研究

熊倩妤，楊興林，洪章萍，屠大朋，楊 俊

（貴陽(yáng)市公共衛(wèi)生救治中心檢驗(yàn)科，貴州 貴陽(yáng) 550004）

流行性感冒（流感）是指由流感病毒感染引起的一種急性呼吸道傳染病。流感病毒具有傳染性強(qiáng)、易變異、傳播迅速等特點(diǎn)。流感在學(xué)校、托幼機(jī)構(gòu)等人群聚集場(chǎng)所可大規(guī)模爆發(fā)，嚴(yán)重危害人們的健康[1]。世界衛(wèi)生組織報(bào)道，每年全球有20%～30%的兒童和5%～10%的成年人會(huì)發(fā)生季節(jié)性流感，其中有300 萬(wàn)～500 萬(wàn)例患者為重癥患者，有29 萬(wàn)～65 萬(wàn)人可因患此病死亡[2]。引起流感的常見(jiàn)病毒有甲型流感病毒、乙型流感病毒和丙型流感病毒。近年來(lái)，甲型流感（由甲型流感病毒感染引起的流感）和乙型流感（由乙型流感病毒感染引起的流感）在世界各地的流行趨勢(shì)均有所上升[3]。建立快速的流感檢測(cè)方法，可為臨床診療工作的開(kāi)展提供依據(jù)，提高抗病毒藥物應(yīng)用的合理性，也利于對(duì)流感疫情采取更有效的控制措施。本文主要是探討流感病毒抗原檢測(cè)在流感篩查中的應(yīng)用效果。

1 資料與方法

1.1 基線資料

選擇貴陽(yáng)市公共衛(wèi)生救治中心2019 年11 月至2020 年9 月期間接診的5442 例發(fā)熱（體溫＞37.3℃）患者作為研究對(duì)象。在這些患者中，有男性3083 例，女性2359 例；其年齡最大為97 歲，最小為1 個(gè)月，平均年齡為12.2 歲。

1.2 方法

1.2.1 流感病毒抗原檢測(cè) 對(duì)患者進(jìn)行流感病毒抗原檢測(cè)的方法是：采集其鼻咽拭子，標(biāo)本采集后立即置于消毒干燥、嚴(yán)格密封的塑料管中保存并送檢，若不能立即送檢需在2℃～8℃的冷藏柜中保存（最長(zhǎng)可保持8 h）。采用膠體金免疫層析法和甲型/ 乙型流感病毒抗原檢測(cè)試劑盒（由廣州萬(wàn)孚生物技術(shù)有限公司提供）對(duì)標(biāo)本進(jìn)行流感病毒抗原檢測(cè)，在15～20 min 內(nèi)觀察檢測(cè)結(jié)果。整個(gè)檢測(cè)必須在生物安全柜中進(jìn)行。將剩余的樣本提取液標(biāo)注好患者姓名等信息后放入－ 80℃的冰柜中保存待檢（核酸檢測(cè)）。

1.2.2 核酸檢測(cè) 采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR）法對(duì)患者進(jìn)行核酸檢測(cè)，方法是：以磁珠法提取病毒的核酸，RNA 提取儀為EX2400 核酸自動(dòng)提取儀，嚴(yán)格按照試劑盒（由上海之江生物有限公司提供）的說(shuō)明書(shū)提取病毒的核酸。用羅氏Z480 擴(kuò)增儀對(duì)病毒的核酸進(jìn)行基因擴(kuò)增，嚴(yán)格按試劑盒（試劑盒為湖南圣湘生物有限公司提供的甲型、乙型流感病毒核酸檢測(cè)試劑盒）的說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。整個(gè)檢測(cè)必須在生物安全柜中進(jìn)行。當(dāng)Ct值＜38時(shí)表示檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性，當(dāng)Ct值≥40 時(shí)表示檢測(cè)結(jié)果呈陰性，當(dāng)Ct值介38～40 之間時(shí)需進(jìn)行復(fù)檢。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察對(duì)5442 例患者進(jìn)行流感病毒抗原檢測(cè)的陽(yáng)性檢出率及檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性的患者性別及年齡的分布情況。統(tǒng)計(jì)甲型、乙型流感病毒抗原檢測(cè)的陽(yáng)性檢出率。在5442 例患者中隨機(jī)抽取153 例患者進(jìn)行流感病毒抗原檢測(cè)及核酸檢測(cè)，觀察其檢測(cè)結(jié)果。統(tǒng)計(jì)用流感病毒抗原檢測(cè)診斷153例患者甲型流感及乙型流感的準(zhǔn)確率、特異度及敏感度。準(zhǔn)確率=（真陽(yáng)性例數(shù)+真陰性例數(shù)）/ 總例數(shù)×100%。靈敏度=真陽(yáng)性例數(shù)/（真陽(yáng)例數(shù)+假陰性例數(shù)）×100%。特異度=真陰性例數(shù)/（真陰性例數(shù)+假陽(yáng)性例數(shù)）×100%。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

用SPSS 25.0 軟件處理本研究中的數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料用%表示，用χ2 檢驗(yàn)，計(jì)量資料用表示，用t檢驗(yàn)，P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 進(jìn)行流感病毒抗原檢測(cè)的陽(yáng)性檢出率及檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性的患者性別及年齡的分布情況

對(duì)5442 例患者進(jìn)行流感病毒抗原檢測(cè)的結(jié)果顯示，其中檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性的患者有519 例，陽(yáng)性檢出率為9.54%。在519 例檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性的患者中，男女患者的占比相比（P＞0.05）；不同年齡的患者相比（P＜0.05），其中年齡為6～18 歲患者的占比高于其他年齡段患者的占比（P＜0.05）。詳見(jiàn)表1。

表1 進(jìn)行流感病毒抗原檢測(cè)的陽(yáng)性檢出率及檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性的患者性別及年齡的分布情況

2.2 甲型、乙型流感病毒抗原檢測(cè)的陽(yáng)性檢出率

對(duì)5442 例患者進(jìn)行流感病毒抗原檢測(cè)的結(jié)果顯示，其中甲型流感病毒抗原呈陽(yáng)性的患者有388 例，陽(yáng)性檢出率為7.13%；乙型流感病毒抗原呈陽(yáng)性的患者有131 例，陽(yáng)性檢出率為2.41%。5442 例患者甲型流感病毒抗原的陽(yáng)性檢出率高于乙型流感病毒抗原的陽(yáng)性檢出率（P＜0.05）。詳見(jiàn)表2。

表2 甲型、乙型流感病毒抗原檢測(cè)的陽(yáng)性檢出率

2.3 隨機(jī)抽取153 例患者進(jìn)行流感病毒抗原檢測(cè)及核酸檢測(cè)的結(jié)果

隨機(jī)抽取153 例患者進(jìn)行流感病毒抗原檢測(cè)的結(jié)果顯示，其中甲型流感病毒抗原呈陽(yáng)性的患者有86 例；對(duì)其進(jìn)行核酸檢測(cè)的結(jié)果顯示，其中甲型流感病毒抗原呈陽(yáng)性的患者有69 例。隨機(jī)抽取153 例患者進(jìn)行流感病毒抗原檢測(cè)的結(jié)果顯示，其中乙型流感病毒抗原呈陽(yáng)性的患者有21 例；對(duì)其進(jìn)行核酸檢測(cè)的結(jié)果顯示，其中乙型流感病毒抗原呈陽(yáng)性的患者有24 例。詳見(jiàn)表3、表4。

表3 甲型流感病毒抗原檢測(cè)及核酸檢測(cè)的結(jié)果（例）

表4 乙型流感病毒抗原檢測(cè)及核酸檢測(cè)的結(jié)果（例）

2.4 用流感病毒抗原檢測(cè)診斷其中153 例患者流感的準(zhǔn)確率、特異度及敏感度

用流感病毒抗原檢測(cè)診斷其中153 例患者甲型流感的準(zhǔn)確率、特異度、敏感度分別為86.27%、77.38%、97.10%。用流感病毒抗原檢測(cè)診斷其中153 例患者乙型流感的準(zhǔn)確率、特異度、敏感度分別為92.81%、96.90%、70.83%。

3 討論

流感是全球重點(diǎn)監(jiān)測(cè)的急性傳染病之一，具有起病急、傳染性強(qiáng)、傳播速度快等特點(diǎn)，可引起嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問(wèn)題[4]。對(duì)流感病毒進(jìn)行快速檢測(cè)對(duì)于防控流感疫情至關(guān)重要。目前，臨床上檢測(cè)流感病毒的方法有病毒培養(yǎng)法、流感病毒抗原檢測(cè)法、核酸檢測(cè)法等。病毒培養(yǎng)法是臨床上診斷流感最準(zhǔn)確的方法，但采用該方法進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)鑒定的周期長(zhǎng)達(dá)14 d 左右，在此期間難以為臨床用藥提供指導(dǎo)，故該檢測(cè)法在臨床應(yīng)用中受限較為嚴(yán)重。用核酸檢測(cè)法診斷流感的特異度和靈敏度較高，但需要使用昂貴的設(shè)備，且對(duì)實(shí)驗(yàn)室的條件要求嚴(yán)格，很多醫(yī)療機(jī)構(gòu)和流感檢測(cè)點(diǎn)都不具備相應(yīng)的檢測(cè)人員和檢測(cè)設(shè)備[5]。采用流感病毒抗原檢測(cè)法診斷流感具有操作簡(jiǎn)單、快捷、能在短時(shí)間（20 min）內(nèi)快速作出定性診斷等優(yōu)點(diǎn)[6]。本研究的結(jié)果顯示，5442 例患者甲型流感病毒抗原的陽(yáng)性檢出率高于乙型流感病毒抗原的陽(yáng)性檢出率（P＜0.05）。究其原因主要是，2019 年11 月至2020 年9 月期間我中心的流感類型以甲型流感為主。與乙型流感病毒相比，甲型流感病毒具有更強(qiáng)的變異性，故甲型流感更易流行及造成嚴(yán)重的后果[7-8]。

本研究的結(jié)果證實(shí)，用流感病毒抗原檢測(cè)診斷甲型流感和乙型流感的準(zhǔn)確率、特異度、敏感度均較高，該方法可用于對(duì)患者進(jìn)行流感篩查。