流感病毒抗原檢測在流感篩查中的應用效果研究

熊倩妤，楊興林，洪章萍，屠大朋，楊 俊

（貴陽市公共衛生救治中心檢驗科，貴州 貴陽 550004）

流行性感冒（流感）是指由流感病毒感染引起的一種急性呼吸道傳染病。流感病毒具有傳染性強、易變異、傳播迅速等特點。流感在學校、托幼機構等人群聚集場所可大規模爆發，嚴重危害人們的健康[1]。世界衛生組織報道，每年全球有20%～30%的兒童和5%～10%的成年人會發生季節性流感，其中有300 萬～500 萬例患者為重癥患者，有29 萬～65 萬人可因患此病死亡[2]。引起流感的常見病毒有甲型流感病毒、乙型流感病毒和丙型流感病毒。近年來，甲型流感（由甲型流感病毒感染引起的流感）和乙型流感（由乙型流感病毒感染引起的流感）在世界各地的流行趨勢均有所上升[3]。建立快速的流感檢測方法，可為臨床診療工作的開展提供依據，提高抗病毒藥物應用的合理性，也利于對流感疫情采取更有效的控制措施。本文主要是探討流感病毒抗原檢測在流感篩查中的應用效果。

1 資料與方法

1.1 基線資料

選擇貴陽市公共衛生救治中心2019 年11 月至2020 年9 月期間接診的5442 例發熱（體溫＞37.3℃）患者作為研究對象。在這些患者中，有男性3083 例，女性2359 例；其年齡最大為97 歲，最小為1 個月，平均年齡為12.2 歲。

1.2 方法

1.2.1 流感病毒抗原檢測 對患者進行流感病毒抗原檢測的方法是：采集其鼻咽拭子，標本采集后立即置于消毒干燥、嚴格密封的塑料管中保存并送檢，若不能立即送檢需在2℃～8℃的冷藏柜中保存（最長可保持8 h）。采用膠體金免疫層析法和甲型/ 乙型流感病毒抗原檢測試劑盒（由廣州萬孚生物技術有限公司提供）對標本進行流感病毒抗原檢測，在15～20 min 內觀察檢測結果。整個檢測必須在生物安全柜中進行。將剩余的樣本提取液標注好患者姓名等信息后放入－ 80℃的冰柜中保存待檢（核酸檢測）。

1.2.2 核酸檢測 采用逆轉錄-聚合酶鏈反應（reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR）法對患者進行核酸檢測，方法是：以磁珠法提取病毒的核酸，RNA 提取儀為EX2400 核酸自動提取儀，嚴格按照試劑盒（由上海之江生物有限公司提供）的說明書提取病毒的核酸。用羅氏Z480 擴增儀對病毒的核酸進行基因擴增，嚴格按試劑盒（試劑盒為湖南圣湘生物有限公司提供的甲型、乙型流感病毒核酸檢測試劑盒）的說明書進行操作。整個檢測必須在生物安全柜中進行。當Ct值＜38時表示檢測結果呈陽性，當Ct值≥40 時表示檢測結果呈陰性，當Ct值介38～40 之間時需進行復檢。

1.3 觀察指標

觀察對5442 例患者進行流感病毒抗原檢測的陽性檢出率及檢測結果呈陽性的患者性別及年齡的分布情況。統計甲型、乙型流感病毒抗原檢測的陽性檢出率。在5442 例患者中隨機抽取153 例患者進行流感病毒抗原檢測及核酸檢測，觀察其檢測結果。統計用流感病毒抗原檢測診斷153例患者甲型流感及乙型流感的準確率、特異度及敏感度。準確率=（真陽性例數+真陰性例數）/ 總例數×100%。靈敏度=真陽性例數/（真陽例數+假陰性例數）×100%。特異度=真陰性例數/（真陰性例數+假陽性例數）×100%。

1.4 統計學方法

用SPSS 25.0 軟件處理本研究中的數據，計數資料用%表示，用χ2 檢驗，計量資料用表示，用t檢驗，P＜0.05 表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 進行流感病毒抗原檢測的陽性檢出率及檢測結果呈陽性的患者性別及年齡的分布情況

對5442 例患者進行流感病毒抗原檢測的結果顯示，其中檢測結果呈陽性的患者有519 例，陽性檢出率為9.54%。在519 例檢測結果呈陽性的患者中，男女患者的占比相比（P＞0.05）；不同年齡的患者相比（P＜0.05），其中年齡為6～18 歲患者的占比高于其他年齡段患者的占比（P＜0.05）。詳見表1。

表1 進行流感病毒抗原檢測的陽性檢出率及檢測結果呈陽性的患者性別及年齡的分布情況

2.2 甲型、乙型流感病毒抗原檢測的陽性檢出率

對5442 例患者進行流感病毒抗原檢測的結果顯示，其中甲型流感病毒抗原呈陽性的患者有388 例，陽性檢出率為7.13%；乙型流感病毒抗原呈陽性的患者有131 例，陽性檢出率為2.41%。5442 例患者甲型流感病毒抗原的陽性檢出率高于乙型流感病毒抗原的陽性檢出率（P＜0.05）。詳見表2。

表2 甲型、乙型流感病毒抗原檢測的陽性檢出率

2.3 隨機抽取153 例患者進行流感病毒抗原檢測及核酸檢測的結果

隨機抽取153 例患者進行流感病毒抗原檢測的結果顯示，其中甲型流感病毒抗原呈陽性的患者有86 例；對其進行核酸檢測的結果顯示，其中甲型流感病毒抗原呈陽性的患者有69 例。隨機抽取153 例患者進行流感病毒抗原檢測的結果顯示，其中乙型流感病毒抗原呈陽性的患者有21 例；對其進行核酸檢測的結果顯示，其中乙型流感病毒抗原呈陽性的患者有24 例。詳見表3、表4。

表3 甲型流感病毒抗原檢測及核酸檢測的結果（例）

表4 乙型流感病毒抗原檢測及核酸檢測的結果（例）

2.4 用流感病毒抗原檢測診斷其中153 例患者流感的準確率、特異度及敏感度

用流感病毒抗原檢測診斷其中153 例患者甲型流感的準確率、特異度、敏感度分別為86.27%、77.38%、97.10%。用流感病毒抗原檢測診斷其中153 例患者乙型流感的準確率、特異度、敏感度分別為92.81%、96.90%、70.83%。

3 討論

流感是全球重點監測的急性傳染病之一，具有起病急、傳染性強、傳播速度快等特點，可引起嚴重的公共衛生問題[4]。對流感病毒進行快速檢測對于防控流感疫情至關重要。目前，臨床上檢測流感病毒的方法有病毒培養法、流感病毒抗原檢測法、核酸檢測法等。病毒培養法是臨床上診斷流感最準確的方法，但采用該方法進行細胞培養鑒定的周期長達14 d 左右，在此期間難以為臨床用藥提供指導，故該檢測法在臨床應用中受限較為嚴重。用核酸檢測法診斷流感的特異度和靈敏度較高，但需要使用昂貴的設備，且對實驗室的條件要求嚴格，很多醫療機構和流感檢測點都不具備相應的檢測人員和檢測設備[5]。采用流感病毒抗原檢測法診斷流感具有操作簡單、快捷、能在短時間（20 min）內快速作出定性診斷等優點[6]。本研究的結果顯示，5442 例患者甲型流感病毒抗原的陽性檢出率高于乙型流感病毒抗原的陽性檢出率（P＜0.05）。究其原因主要是，2019 年11 月至2020 年9 月期間我中心的流感類型以甲型流感為主。與乙型流感病毒相比，甲型流感病毒具有更強的變異性，故甲型流感更易流行及造成嚴重的后果[7-8]。

本研究的結果證實，用流感病毒抗原檢測診斷甲型流感和乙型流感的準確率、特異度、敏感度均較高，該方法可用于對患者進行流感篩查。