平頂山市無償獻血人群隱匿性乙肝血清學特征分析

陳 丹

平頂山市紅十字中心血站(河南 平頂山 467000)

隱匿性乙型肝炎感染(occult hepatitis B virus infection,OBI)特指血清轉換前的窗口期,機體存在乙肝病毒DNA,但仍無法對乙肝病毒表面抗原(HBsAg)進行有效測定,乙肝核心抗體(抗-HBc)可能為陽性的一段特殊時期[1]。OBI在不同地區的流行狀況存在一定差異[2],據相關研究統計,2017年,平頂山市的乙型肝炎(HBV)發病率在38.51/10萬,平頂山市的HBV發病率逐年下降,但缺乏近年來的數據觀察[3]。乙肝屬于血液傳播疾病,基于OBI患者由于處于窗口期外,難以通過HBsAg檢測確診為乙肝患者,繼而造成乙肝輸血及感染風險[4]。因此,有必要就平頂山市無償獻血人群OBI的血清學特征進一步分析,為平頂山市無償獻血機構血液制品采集及篩檢提供數據支持。

1 資料與方法

1.1檢測對象及樣本采集 選取平頂山市中心血站2019年1～12月檢測的51689例無償獻血者的血液標本,獻血者年齡18～55歲,其中初次獻血者20125人,重復獻血者31564人,血液樣本均采集自經膠體金試紙測定HbsAg初篩合格,然后在采血時在血袋樣本留取口留取三個5ml試管樣本,分別為抗凝管、促凝管和帶有分離膠的抗凝管。并留取血袋樣辮保存備查。

1.2設備及試劑 設備選用全自動樣本處理系統(型號TECAN-EVO)、全自動酶免處理系統(型號為BEPIII和FAME)、全自動核酸匯集提取儀、PCR擴增儀。試劑選擇HBV-HCV-HIV(1+2型)熒光PCR聯合檢測試劑,試劑由蘇州華益美生物科技有限公司及上海浩源生物科技有限公司提供。HBsAg及二對半試劑盒由廈門新創生物工程股份有限公司和法國伯樂生產。

1.3檢測方法 采用酶聯免疫吸附法對血液樣品進行測定,采用平行聯檢對HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、梅毒血清學指標進行測定。乙肝二對半操作方式嚴格參照各種試劑及儀器說明書進行操作。上述指標測試結束后進行核酸定性檢測,HBV-DNA核酸定性檢測為陽性者,確定最終OBI標本。

1.4觀察指標 采集獻血者的性別、年齡及HBsAg、HBV-DNA測定結果。當HBsAg測試為陰性(-)且HBV DNA(+)者經跟蹤測試HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb、經分析后視為OBI患者。

1.5統計學方法 采用STATA 11.0軟件進行數據處理,分類變量應用卡方檢驗,連續變量采用t檢驗,檢驗水準α=0.05。

2 結果

2.1OBI感染者性別、年齡情況 經檢驗篩查確定,平頂山市無償獻血人群中隱匿性乙肝患者僅45例,統計年OBI發病率為0.87%。OBI與非OBI患者相比,男性、35歲以上人群、血清學指標HBsAb、HBeAb、HBcAb陽性例數高于非OBI者,有統計學意義(P<0.05)(見表1)。

表1 OBI感染者性別、年齡情況

2.2OBI的血清學標志物分布模式 比較OBI患者的HBsAb、HBeAb、HBcAb陽性率,有統計學意義,以HBcAb陽性率最高,達100%,HBeAb陽性率次之,為53.33%(P<0.05)(見表2)。

表2 OBI的血清學標志物分布模式(n=45)

3 討論

乙型肝炎(HBV)是世界范圍內的流行病之一,我國約有1億以上的HBV感染者[5]。由于HBV起病隱匿,且成人HBV感染者常無自感癥狀。調查顯示,深圳市無償獻血人群中OBI感染率在0.04%[6]。與深圳市相比,本研究就平頂山市2019年的無償獻血者中的OBI感染率在0.09%(45/51689),相比較而言,平頂山市的OBI感染率更高,但與江蘇地區的OBI感染率0.08%接近[7]。

本研究同時比較OBI和非OBI者的性別、年齡段及血清學指標發現,45例OBI患者中多數為男性、年齡>35歲,且HBsAb、HBeAb、HBcAb篩查的陽性率更高。在性別方面,這一結果與深圳市及慶陽市相同[8],考慮主要是男性的生活方式密切相關[9]。而<35歲人群的OBI感染率更低,主要以新生兒接種乙肝疫苗及青年人的免疫功能更強有關,而≥35歲人群會存在免疫功能逐漸衰退,步入50歲以上生活節奏減慢,感染乙肝風險有所降低[10]。

HBV感染受病毒DNA載量及免疫狀態影響,OBI屬于HBV感染的特殊階段,血液的血清中攜帶的病毒DNA載量較低,對受血者而言,需要免疫狀態嚴重下降才能造成輸血感染風險[11]。本研究同時針對血清學指標進行觀察,發現OBI患者HBsAb、HBeAb、HBcAb陽性率更高。因此,對于初篩存在HBsAb、HBeAb、HBcAb陽性患者應進一步確定HBV DNA載量,以保證血液制品的安全性[12]。進一步分析,OBI患者的HBsAb、HBeAb、HBcAb陽性率有統計學意義,以HBcAb陽性率最高,達100%,HBeAb陽性率次之,為53.33%(P<0.05)。這一結果與張毓等研究結果相似[13]。多數OBI患者存在HBsAb、HBeAb、HBcAb中兩種或三種陽性情況,也存在少部分患者單一HBcAb陽性者。研究認為,HBcAb陽性屬于較為穩定的指標,OBI患者通常處于感染或恢復期,而此類OBI患者的HBsAb屬于陰性狀態,無法對受血者產生保護能力,輸注后會增加感染風險[14-15]。同理,雖然沒有HBeAb單獨陽性者,但仍存在部分患者缺乏HBsAb抗體保護,輸注后仍會存在受體感染風險。因此,對于HBeAb、HBcAb陽性者需進一步測定病毒載量,明確受血癥感染風險。

國內外對隱匿性感染者是否可參與獻血仍存在爭議。部分學者認為,隱匿性感染獻血者血液傳播能力差,病毒載量低,且開展全面核酸檢測費用過高,增加用血成本,部分省市的隱匿性感染者的獻血者仍會作為合格供血者[16]。反對者認為,當隱匿性感染著的血液被制成體積大的200ml的新鮮冰凍血漿或20ml的血漿紅細胞后,足以感染給被輸血者[17]。因此,國際上通常認為,應將HBV的最低傳染量下調至3.0IU/ml。當獻血者的核酸DNA為陰性時可作為合格供血者。

綜上所述,平頂山市無償獻血人群中隱匿性乙肝發病率為0.87%,核酸檢測是降低單純乙肝病毒抗原抗體篩查所漏診的OBI的輸血感染風險的有效方式,尤其對于存在HBeAb、HBcAb陽性結果患者應進一步進行核酸測定,避免造成輸血傳播乙肝風險。