HMOX1在晶狀體上皮細胞中的抗氧化功能

廖生潔,陳江龍,張靖淇,王夢蝶,黃炳輝,汪凌云

(湖北理工學院 腎臟疾病發生與干預湖北省重點實驗室，湖北 黃石 435003)

0 引言

氧化壓力一直被認為是年齡相關性白內障的重要誘因。光誘導、氧氣和輻射等均能引起氧化壓力的升高，導致晶狀體中蛋白質和脂質的過度氧化，最終使晶狀體變得渾濁。這一結論已在動物模型以及體外培養的晶狀體體系中得到驗證[1-2]。臨床病例研究結果顯示，老年人晶狀體中的晶狀體蛋白質和脂質的過度氧化十分明顯，提示年齡相關性白內障與活性氧(ROS)的形成緊密關聯[2-4]。尋找晶狀體中ROS調控因子，不僅能拓展白內障發生的病理機制，同時還可為年齡相關性白內障患者的預防工作提供指導。

血紅素加氧酶(HMOX)可以將血紅素降解為膽綠素、一氧化碳和鐵，是血紅素降解的限速酶，在各組織中泛表達，特別是高活性組織，如脾臟、大腦和睪丸等。Benari等[5-6]在眼組織角膜上皮、視網膜、視網膜色素上皮和睫狀體中檢測到明顯的血紅素加氧酶活性。作者的前期研究結果發現，在晶狀體上皮細胞中，HMOX1表達水平隨氧化應激強度逐漸升高，提示其可能在晶狀體細胞中發揮抗氧化重要作用，本研究將進一步確定HOMX1在晶狀體上皮細胞中的抗氧化功能。

1 試劑與方法

1.1 細胞培養

HLECs和p293T細胞均使用DMEM(Gibco)基礎培養基，并加入10 %胎牛血清(四季青)。培養箱溫度設置為37 ℃，二氧化碳濃度設置為5 %。

1.2 HMOX1過表達細胞系的構建

將構建好的HMOX1-pBABE質粒與輔助質粒VSVG和GAGPOL轉染p293T細胞……