3 種血細胞分析儀對白細胞分類結果的比較

陳睿，李慶，夏春燕，李軼勛，朱麗萍，王麗英（通信作者）

昆明醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院醫(yī)學檢驗科·云南省實驗診斷研究所·云南省檢驗醫(yī)學重點實驗室（云南昆明 650032）

隨著科學技術的飛速發(fā)展，血細胞分析技術亦取得了較大的進步，精密、準確及快速的自動化血細胞分析儀被廣泛應用于各級臨床實驗室[1]。實驗室儀器的性能水平應符合其規(guī)定的檢測能力，但因儀器種類繁多、功能各異，檢測結果存在一定的差異性。目前，國內(nèi)各級臨床檢驗中心并未建立白細胞分類結果的室間質量評價系統(tǒng)，大多數(shù)實驗室通常以傳統(tǒng)人工鏡檢結果為金標準，以此來比對血細胞分析儀的白細胞分類結果，也有部分實驗室將血細胞分析儀的白細胞分類結果與各種白細胞直接計數(shù)結果進行比對[2-8]。在國內(nèi)，同一實驗室內(nèi)同時擁有不同品牌、不同型號和不同使用年限的血細胞分析儀的情況非常普遍，但不同型號、不同品牌的血細胞分析儀在內(nèi)部結構、試劑、校準品等方面存在一定的差異，這可能會導致檢測結果出現(xiàn)偏差，從而影響臨床分析[9-10]。因此，關注檢測結果的準確性，提高血細胞分析系統(tǒng)的可比性，對確保檢測結果的準確性、提高醫(yī)學實驗室的工作質量具有重要意義，這同時也是獲取ISO 15189實驗室認可需要實現(xiàn)的質量目標之一[11]。如何用簡單有效的方法明確每臺儀器的性能、保證檢測質量，是實驗室管理的重要問題。基于此，本研究探討并驗證國內(nèi)普遍使用的3種全自動血細胞分析儀對白細胞分類結果的可靠性，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 研究對象

隨機選取我院2020年6月門診和住院患者的100份EDTA-K2抗凝血液常規(guī)樣本，其中，白細胞計數(shù)在正常參考區(qū)間（4.0×109/L～10.0×109/L）內(nèi)的樣本有56份，不在正常參考區(qū)間（>10.0×109/L）的樣本有44份。

1.2 檢測儀器及試劑

檢測儀器：Sysmex XE-2100全自動血細胞分析儀、Sysmex XN-9000全自動血細胞分析儀、Beckman Coulter LH750全自動血細胞分析儀、Sysmex DL-60推片機、尼康55i 顯微鏡。

試劑：DCL 稀釋液、血紅蛋白溶血劑SLS、血細胞分析用染色液WDF、血細胞分析用染色液WNR、血細胞分析用溶血劑WDF、血細胞分析用溶血劑WNR 等相關試劑，均由Sysmex 提供。

1.3 方法

儀器法：樣本檢測前，3種儀器運行室內(nèi)質控，質控均在控；將100份樣本按順序編號后，分別采用我科室的3臺全自動血細胞分析儀（Sysmex XE-2100和XN-9000及Beckman Coulter LH750）進行白細胞檢測。

顯微鏡法：將100份樣本采用全自動推片機進行推片，染色后，由兩位中級職稱以上的資深檢驗師進行顯微鏡鏡檢分類白細胞。

1.4 統(tǒng)計學處理

相關性采用Microsoft Excel 2007進行分析。

2 結果

2.1 3種儀器白細胞分類結果之間的相關性分析

針對白細胞計數(shù)在正常參考區(qū)間內(nèi)的樣本，Sysmex XE-2100和XN-9000的5種白細胞分類結果均具有較好的相關性（r>0.90）；Beckman Coulter LH750和Sysmex XN-9000的白細胞分類結果中，嗜堿性粒細胞的相關性較差（r<0.60），其他4種白細胞的相關性均較好（r>0.90），見表1～2。

表1 Sysmex XN-9000和XE-2100的相關性（白細胞計數(shù)在正常參考區(qū)間內(nèi)的樣本）

針對白細胞計數(shù)不在正常參考區(qū)間內(nèi)的樣本，Sysmex XE-2100和XN-9000的白細胞分類結果中，中性粒細胞、淋巴細胞、嗜酸性粒細胞和嗜堿性粒細胞仍具有較好的相關性（r>0.89），而單核細胞（r<0.71）的相關性較差；Sysmex XN-9000和Beckman Coulter LH750的白細胞分類結果中，中性粒細胞、淋巴細胞、嗜酸性粒細胞的相關性較好（r>0.89），而單核細胞（r<0.71）和嗜堿性粒細胞（r<0.65）的相關性較差，見表3～4。

表2 Sysmex XN-9000和Beckman Coulter LH750的相關性（白細胞計數(shù)在正常參考區(qū)間內(nèi)的樣本）

表3 Sysmex XN-9000和XE-2100的相關性（白細胞計數(shù)不在正常參考區(qū)間內(nèi)的樣本）

表4 Sysmex XN-9000和Beckman Coulter LH750的相關性（白細胞計數(shù)不在正常參考區(qū)間內(nèi)的樣本）

2.2 3種儀器與人工顯微鏡鏡檢符合率分析

以人工顯微鏡鏡檢的分類結果為金標準，Sysmex XE-2100和XN-9000的白細胞分類結果中，中性粒細胞、嗜酸性粒細胞及嗜堿性粒細胞計數(shù)值的符合率均較高（≥90%），而淋巴細胞及單核細胞的符合率均較低（≤80%）；Beckman Coulter LH750的白細胞分類結果中，中性粒細胞及嗜酸性粒細胞計數(shù)值的符合率均較高（≥90%），而淋巴細胞、單核細胞和嗜堿性粒細胞計數(shù)值的符合率較低（≤80%），見表5。

表5 3種儀器與人工顯微鏡鏡檢對白細胞分類的符合率比較

3 討論

Beckman Coulter LH750是我室使用較早的1臺血細胞分析儀，采用電阻抗、高頻傳導、激光散射的技術原理對白細胞進行精確地分類，但該儀器共用同一通道檢測5類白細胞，故分類結果與Sysmex XE-2100和XN-9000相比較差，因嗜堿性粒細胞易受中毒顆粒的影響，故對其的分類結果較其他兩臺儀器最差。

Sysmex XE-2100和XN-9000均采用了半導體激光流式細胞術和熒光染色技術對白細胞進行分類和計數(shù)，且具備單獨檢測嗜堿性粒細胞的通道，因此，這兩種儀器的檢測相關性較好。針對有核紅細胞較多的樣本，Sysmex XE-2100無法對其進行準確計數(shù)，從而會導致白細胞計數(shù)結果增高，而Sysmex 公司新推出的Sysmex XN-9000血細胞分析儀，在XE-2100的基礎上對熒光染料試劑進行了改良，從而使XN-9000可實現(xiàn)對有核紅細胞的計數(shù)，并對白細胞計數(shù)進行校正，故檢測準確性高于Sysmex XE-2100。但當血液中出現(xiàn)幼稚細胞時，儀器均會作出相應的報警提示，但其無法對幼稚細胞做出分類或者會將幼稚細胞歸為淋巴細胞或單核細胞，從而導致淋巴細胞和單核細胞分類的相關性較差，此時則需進行顯微鏡鏡檢分類。

綜上所述，3種全自動血細胞分析儀基本滿足所規(guī)定的性能水平，且對正常白細胞的分類具有良好的相關性。但在實際應用過程中，血細胞分析儀只能起到篩查作用，對異常細胞的檢測能力較差，觸及復檢規(guī)則的樣本仍需進行人工復檢，以免造成誤診、漏診[12-13]。建議在平時的常規(guī)檢查中，可聯(lián)合采用全自動血細胞分析儀與血涂片人工鏡檢方式進行檢測，以提高工作效率和準確性，優(yōu)化醫(yī)院的血常規(guī)檢查，從而為及時診斷疾病提供有效依據(jù)[14]。