硅藻土在口蹄疫病毒澄清中的應(yīng)用

馮澤泰

（新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)，新疆 烏魯木齊 830052）

深層過(guò)濾工藝在生物制品的工業(yè)化生產(chǎn)中得到了廣泛的應(yīng)用。硅藻土是重要的深層過(guò)濾成分。利用硅藻土疏松、多孔的特性，既能有效攔截大顆粒，還可以有效吸附小顆粒雜質(zhì)。從而提高過(guò)濾效果，有效降低下游的純化、滅活壓力。

由最佳一致逼近理論可知，該函數(shù)具有三個(gè)偏差點(diǎn)，即區(qū)間的兩端點(diǎn)xri-1與xri及區(qū)間內(nèi)某一點(diǎn).令xzri為區(qū)間[xri-1,xri]內(nèi)幅度相對(duì)誤差絕對(duì)值最大的一點(diǎn)，易知此點(diǎn)誤差函數(shù)的一階導(dǎo)數(shù)為0.其中，εri為每個(gè)區(qū)間上幅度相對(duì)誤差最大值.基于最佳一致逼近理論并結(jié)合平方根函數(shù)的性質(zhì)，得出4個(gè)方程：

1 材料

500L生物反應(yīng)器（江蘇綠楊），1000L生物反應(yīng)器（江蘇綠楊），2000L病毒收集罐（江蘇綠楊），層疊式深層過(guò)濾器（美國(guó)PALL），四柱塞隔膜泵（德國(guó)Quattroflow）層疊式深層過(guò)濾單元（瑞士菲托），硅藻土（賽力特C1000），1000L循環(huán)罐（江蘇綠楊），UV1900紫外分光光度計(jì)（上海佑科），口蹄病種毒（新疆天康生物制藥懸浮二車間提供），BHK細(xì)胞（新疆天康生物制藥懸浮二車間提供）。

2 病毒培養(yǎng)

將BHK生產(chǎn)用種細(xì)胞在500L細(xì)胞反應(yīng)器內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)后，放大到1000L反應(yīng)器內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達(dá)到400萬(wàn)～500萬(wàn)個(gè)/mL后，罐體降溫至4℃，停止攪拌、停止供氧。待細(xì)胞沉至罐底后，將上層細(xì)胞培養(yǎng)液排出，加入病毒維持液。恢復(fù)攪拌和供養(yǎng)。將生產(chǎn)用的種毒加入反應(yīng)器內(nèi)。培養(yǎng)18～24h后，停止供氧，反應(yīng)器內(nèi)的攪拌開至最大。

3 病毒澄清

將深層過(guò)濾單元按照要求裝入層疊式過(guò)濾器內(nèi)，用流通蒸汽滅菌。將硅藻土置于pH7.6的高鹽緩沖液中，蒸汽滅菌備用。待病毒收獲后，氣動(dòng)柱塞隔膜泵，調(diào)整泵速和壓力，使硅藻土均勻涂于深層過(guò)濾單元表面。將收獲毒液轉(zhuǎn)入深層過(guò)濾器內(nèi)，反復(fù)循環(huán)，直至病毒收獲液變的完全清澈。柱塞隔膜泵降低速度，用pH7.6的稀釋液沖洗深層過(guò)濾單元，盡量減少毒液的浪費(fèi)。取樣檢測(cè)澄清度和146S后，向毒液內(nèi)加入滅活劑，按照滅活規(guī)程進(jìn)行滅活。滅活結(jié)束，取樣檢測(cè)146S、總氮、滅活效果。

4 結(jié)論與討論

連續(xù)對(duì)OHM/02株5批毒液20150328、20150401、20150403、20150407、20150410重復(fù)采用相同的硅藻土過(guò)濾工藝，檢測(cè)結(jié)果（見表1）。

以“母愛(ài)”為主題，要求投稿文章語(yǔ)句通順，條理明晰，文筆優(yōu)美，內(nèi)容充實(shí)而積極向上。文章字?jǐn)?shù)應(yīng)在五百字以上，兩千字以下。

表1 采用硅藻土澄清O型口蹄疫病毒的檢測(cè)結(jié)果

連續(xù)對(duì)AKT-III株五批毒液20150428、20150501、2015 0503、20150507、20150510重復(fù)采用相同的硅藻土過(guò)濾工藝，檢測(cè)結(jié)果（見表2）。

表2 采用硅藻土澄清AKT-III株口蹄疫病毒的檢測(cè)結(jié)果

根據(jù)表1和表2的檢測(cè)結(jié)果顯示，采用了硅藻土的澄清工藝，口蹄疫病毒的滅活效果未受影響，病毒收率未發(fā)生明顯改變。必要時(shí)，可以選擇硅藻土深層過(guò)濾工藝澄清口蹄疫病毒。