外周血單個核細胞EB病毒DNA檢測的結果分析及臨床意義

蔡麗娟 任妹 劉劍榮 潘幸

（萍鄉市人民醫院檢驗科, 江西 萍鄉 337000）

EB病毒（Epstein-Barr virus，EBV）是一種雙鏈DNA病毒，屬于γ-皰疹病毒亞科淋巴淺隱病毒屬，容易長期潛伏于淋巴細胞中，通過環狀DNA的方式游離于胞漿整合染色體內。一般情況下，EBV對免疫功能正常者基本無影響；但當免疫功能受損后，EBV會大量復制，引起臨床出現病理變化。大量研究發現，EBV好發生于兒童時期，尤以幼兒期常見，且大部分患兒感染后無明顯癥狀；但該病毒會終身伴隨患兒，影響患兒免疫機制，可能造成患兒免疫功能出現障礙，發生淋巴組織增殖性疾病等相關并發癥[1～2]。

目前，臨床對于EBV的診斷主要依賴患者臨床癥狀及實驗室輔助診斷，但存在檢測率較低、高假陽性率等缺點。有研究發現，采用PCR技術對外周血單個核細胞EBV的DNA檢測較血清學檢測陽性率高[3]。類似的，既往研究表明，對懷疑EBV感染或免疫異常的嬰幼兒予以PCR技術檢測對患兒病情具有良好評估作用[4]。因此，采用PCR技術可提升臨床對EBV的檢出率，為EBV相關疾病的診治提供一定臨床價值。鑒于此，本研究選取本院就診治療的120例疑似EBV患者的臨床資料，分析外周血單個核細胞EBV的DNA檢測的結果分析及臨床意義，具體見下。

1 對象與方法

1.1 一般資料

選取2020年1月至2020年12月于本院疑似EBV感染診療的120例患者，兒童97例，成人23例，97例兒童中男52例，45例，年齡為0.5～14歲，平均年齡7.24±2.38歲，其中0-3歲患兒71例，大于3歲患兒26例。23例成人中男14例，女9例，年齡為22～46歲，平均年齡25.84±6.71歲。該研究經醫院倫理委員會批準。納入標準：受檢者資料完整；無中途退出研究者；所有患者及其家屬均知曉本研究并簽署知情同意書。排除標準：合并心、肝、腎等臟器病變者；臨床資料缺失者。

1.2 方法

熒光定量PCR檢測EBV-DNA：抽取患者EDTA 抗凝外周血3 mL,密度梯度離心法分離外周血單個核細胞。將采集好的外周血單個核細胞經12000 r?min-1離心機離心5 min，去上清，沉淀后將50 μL提取液混勻，以100 ℃恒溫孵育10 min。再次采用12000 r?min-1離心機離心5min，上清液即為模板。利用中山達安公司 EBV 熒光PCR檢測試劑盒進行EBV-DNA測定。小于500拷貝?mL-1為陰性。

1.3 觀察指標

對比不同人群EBV-DNA陽性檢出率情況。

1.4 統計學方法

本研究數據采用SPSS22.0軟件進行統計分析，計量資料采用平均值±標準差（±SD）表示，行t檢驗；計數資料采用例（n）及百分數（%）表示，行χ2檢驗，以P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 EBV-DNA在各人群中的陽性檢出率

EBV-DNA陽性檢出率在兒童檢出率明顯高于成人（P<0.05），見表1。

表1 EBV-DNA在各人群中的陽性檢出率

2.2 不同患兒中的EBV-DNA陽性檢出率

EBV-DNA陽性檢出率在小于3歲的患兒常見于上呼吸道感染、肺炎、支氣管炎，在大于3歲的患兒中常見于上呼吸道感染、肺炎、扁桃體炎等患兒中；兩組EBV-DNA陽性檢出率比較（43.66% vs 46.15%，P>0.05）,差異無統計學意義；見表2。

表2 不同患兒中的EBV-DNA陽性檢出率

2.3 患兒臨床表現與EBV-DNA陽性率的關系

在小于3歲的患兒中，發熱、黃疸、咳嗽、眼瞼浮腫的患兒EBV-DNA陽性檢出率較高；在大于3歲的患兒中，發熱、咳嗽、咽峽炎、頸淋巴結腫大的患兒EBV-DNA陽性檢出率較高；但兩組EBV-DNA陽性檢出率比較（43.66% vs 46.15%，P>0.05），差異無統計學意義；見表3。

表3 患兒臨床表現與EBEBV-DNA陽性檢出率

3 討論

EBV好發于兒童，是兒科常見感染疾病。本研究發現，檢出EBV-DNA陽性者以兒童居多；這與既往研究對可疑EBV感染患者陽性檢測發現，該陽性率高達42.94%相一致[5]。為明確影響EBV-DNA陽性在患兒疾病分布情況，本研究對患兒疾病進行追蹤發現，在發生上呼吸道感染、肺炎、支氣管炎、扁桃體炎等疾病中具有較高的陽性率。可能與EBV可侵犯B淋巴細胞，使B淋巴細胞抗原發生改變，引起T淋巴細胞防御形成細胞毒性效應，導致患者機體細胞溶解、死亡有關。本研究結果表明3歲以下及3歲以上兒童EBV-DNA陽性檢出率比較無差異，但本研究樣本量較少，有待今后繼續研究。

另研究表示，原發性EBV感染的臨床表現與感染時患者的年齡密切相關，當原發性感染發生在1～5歲時常不表現出特異性的疾病。EBV可以影響身體的任何器官系統，臨床可表現為疲勞、發熱、頸后淋巴結腫大、脾腫大等，亦可伴有黃疸、肝腫大[6]。這與本研究結果相符，因此，臨床上醫師在接診該類患兒時應密切關注并予以針對性檢測，避免漏診及誤診。

綜上所述，外周血單個核細胞中EBV-DNA檢測發現，兒童感染最為常見，且常隱匿于上呼吸道感染、肺炎、支氣管炎、扁桃體炎中。對該類患兒進行外周血單個核細胞EBV-DNA檢測有利于臨床早期診治疾病，降低重癥疾病發生，值得臨床推廣。